伴有偏头痛的卵圆孔未闭封堵患者的疗效研究

目的:探讨经皮卵圆孔未闭(PFO)封堵的可行性,为开展此项工作提供理论基础。方法:采用自身对照,收集患者术前术后的HIT-6头痛评分量表得分、手术前后的超声心动图、TCD发泡实验结果、血常规中血小板含量。采集患者术前1h内行Valsalva动作或咳嗽后的股动脉及股静脉血样,术后1d股动静脉血样。并对术后患者规范随访至少1年。结果:动脉血中五羟色胺(5-HT)含量术后较术前明显降低(t=4.877,P0.05),而静脉血中5-HT含量术后与术前比较无明显差异(t=0.063,P0.1)。患者HIT-6得分术后与术前对比,术后偏头痛对生活的影响程度明显降低(t=10.511,P0.05)。TCD发泡实验结果与HIT-6评分资料分级进行Spearman秩相关分析结果显示:一致性分析结果:χ~2=44.69,P=0.020.05,相关系数r=0.74,P=0.000.05,表明栓子信号数量越多,患者头痛越严重。结论:对于存在PFO的严重偏头痛患者而言,行经皮PFO封堵手术治疗能减轻偏头痛的影响。     

人血清反应因子基因的原核表达及鸡卵黄多克隆抗体的制备

目的 在原核系统中表达人血清反应因子(serum response factor,SRF)基因,制备鸡卵黄抗SRF抗体并鉴定其特性.方法 构建SRF表达载体PGEX-T-2-SRF,并在大肠杆菌中以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropy-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达.表达产物经谷胱甘肽-S转移酶(glutathione-S-transferase,GST)亲和层析柱纯化后,用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)进行鉴定.用纯化的SRF免疫海蓝白母鸡,制备鸡抗SRF抗体.抗体的效价及特异性用蛋白质印迹技术进行测定和分析,免疫荧光鉴定其在心肌细胞中的定位.结果 构建的重组质粒PGEX-4T-2-SRF在大肠杆菌中得到高表达,诱导表达的蛋白存在于包涵体和细菌裂解上清液中,纯化的SRF经SDS-PAGE鉴定呈单一条带.以纯化的SRF免疫制备了鸡抗SRF抗体.蛋白质印迹技术结果表明,该抗体可与原核表达的SRF特异性结合,抗体效价为1:5000.免疫荧光证实该抗体可以和心肌细胞的细胞核特异性结合.结论 在原核细胞中表达了SRF制备的鸡抗SRF的抗体对SRF能进行特异性结合.     

超声造影剂促进野生型p53基因转染抑制大鼠卵巢癌生长的实验研究

目的 探讨超声辐照造影剂微泡促进野生型p53基因转染进而抑制大鼠卵巢癌生长的有效性。方法构建野生型p53真核质粒表达载体pcDNA3．1＋／p53，将40只卵巢癌荷瘤大鼠分成4组。第1组瘤体内注入造影剂微泡和野生型p53质粒混合物，并用超声辐照大鼠腹部瘤区；第2组注入裸质粒后予以超声辐照瘤体；第3组注射超声造影剂和基因混合物后无超声辐照；第4组仅注入裸质粒而无超声辐照。每组进行基因转染每周1次，共进行8次。2月后用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测野生型p53 mRNA在卵巢癌组织中的表达，Western Blot检测野生型p53基因蛋白表达。结果成功构建野生型p53真核质粒表达载体pcDNA3．1＋／p53，埋线法建立卵巢癌动物模型；用超声波辐照微泡促进基因转染后见p53基因转录及表达。第1组p53 mRNA的表达明显增强，高于其他3组，约是第2组的2．65倍，第4组的5．95倍。第2组高于未行超声辐照组，是第4组的2．23倍。第3、4组基因表达差异无统计学意义；Western Blot分析示p53基因蛋白表达的差异模式基本同mRNA，即第1组p53 mRNA的表达增强，高于其他3组，约是第2组的1．75倍，第4组的3．13倍；第2组高于未行超声辐照组，是第4组的1．79倍；第3、4组基因表达差异无统计学意义。结论瘤体内注射造影剂微泡和野生型p53质粒混合物后行超声辐照，可明显增加质粒基因在癌瘤组织中的导人及表达，超声联合造影剂微泡可作为卵巢癌基因治疗中促进基因转移的辅助方法。     

非小细胞肺癌化疗疗效相关血清小分子蛋白的初步研究△

目的:寻找非小细胞肺癌化疗耐药与敏感患者血清中的差异小分子蛋白,通过分离纯化进行质谱鉴定。方法:用WCX2蛋白芯片结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,分别检测14例化疗敏感和26例化疗耐药的非小细胞肺癌血清蛋白质谱,筛选出差异表达蛋白质谱。Clinprot磁珠分离纯化后,进行基质辅助激光吸附电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)鉴定。结果:SELDI-TOF-MS检测到100个有效蛋白峰,其中P<0.05的差异蛋白峰23个,联合质荷比(m/z)为3193.14Da和3263.61Da的差异蛋白建立预测非小细胞肺癌化疗耐药模型,敏感性90.23%,特异性98.56%。进行MALDI-TOF/TOF-MS鉴定,质荷比(m/z)为3263.61Da的蛋白为DNA结合相关蛋白。结论:SELDI-TOF-MS技术可以筛选非小细胞肺癌化疗疗效相关蛋白。     

儿童恶性骨肿瘤患者Th1/Th2亚群漂移的研究

儿童恶性骨肿瘤的发病率仅次于造血系统恶性肿瘤,其中成骨肉瘤约占儿童恶性肿瘤的5%。本病对手术及放化疗的效果不佳,预后极差[1]。随着肿瘤免疫学的发展,以细胞因子为核心的免疫治疗逐渐被临床所接受。根据分泌细胞因子的不同,可将辅助性Ｔ淋巴细胞亚群分为辅助性亚群1(Ｔｈ1)和辅助性亚群2(Ｔｈ2)两个亚群。Ｔｈ1亚群与Ｔｈ2亚群平衡状态的失调,必然导致细胞因子网络的紊乱,从而影响细胞免疫和体液免疫的功能。通过检测细胞因子的水平,可以反映Ｔｈ1/Ｔｈ2的平衡状态[2]。恶性骨肿瘤患儿体内Ｔｈ1/Ｔｈ2状态尚未见报道。本实验对此进行了…     

靶向DAL-1基因的shRNA表达载体的构建与鉴定

目的：建立DAL-1稳定抑制的非小细胞肺癌（NSCLC）细胞实验模型．方法：构建靶向DAL-1的shRNA表达载体转染NSCLC细胞株，筛选出阳性克隆，在mRNA和蛋白质水平鉴定其抑制效率，最终得到DAL-1稳定抑制的细胞株．结果：通过双酶切鉴定和测序鉴定构建的shRNA表达载体序列正确，T4表达载体在mRNA和蛋白质水平能有效抑制DAL-1的表达，抑制率分别为（87．4±2．0）％和（82．7±2．1）％．结论：成功设计并构建了靶向DAL-1的shRNA表达载体，建立了DAL-1稳定抑制的NSCLC细胞株，为进一步研究DAL-1在NSCLC细胞中的作用提供了实验模型．     

微波固化保肢术后成骨肉瘤患者红细胞免疫功能的变化

研究微波固化保肢术提高患者生存率的免疫学机制。方法应用色散比浊法检测患者血清Ｃ３、Ｃ４含量，应用红细胞Ｃ３ｂ受体花环、免疫复合物花环及直接肿瘤花环检测红细胞免疫功能。     

肝癌介入治疗护理

目的:探讨经肝动脉化疗栓塞治疗肝癌的护理措施。方法:对8例肝癌患者介入治疗护理。结果:8例患者护理满意。结论:运用科学的方法对患者进行有效的护理是非常重要的。     

肿瘤转移抑制基因KiSS-1在乳腺癌脑转移患者的表达及临床意义

目的 转移抑制基因KiSS-l在多种肿瘤的浸润转移中起着重要的作用。但该基因与乳腺癌脑转移的关系仍很不清楚。本研究检测了乳腺癌原发灶和脑转移灶中KiSS-l基因的表达并探讨其临床意义。方法 选择2002年6月～2004年6月行乳腺癌脑转移病灶切除的患者12例，应用实时荧光定量PCR检测乳腺癌原发灶和转移灶中KiSS-l基因mRNA的表达，应用Westernblot检测KiSS-l蛋白的表达，并进一步应用免疫组化进行验证。结果 实时荧光定量PCR显示脑转移标本KiSS-l mRNA表达仅为原发灶的1／10，与原发灶比较有显著差异（P〈0．01），Western blot检测显示脑转移灶KiSS-l蛋白较原发灶明显减弱，免疫组化显示KiSS-l在原发灶中表达率明显低于原发灶。结论 KiSS-l基因在乳腺痛脑转移中具有转移抑制作用，可能在乳腺癌脑转移治疗中发挥作用。