一种快速检测HBV基因的荧光定量PCR法的建立

目的：利用二聚体蝎型荧光探针技术,建立一种能用于临床的快捷、敏感、特异、价格低廉的HBV实时荧光定量PCR检测方法。方法：根据HBV基因组保守区域precore／core设计二聚体蝎型荧光探针和引物,构建质粒标准品,优化荧光定量PCR条件,并进行方法学评价。结果：所建方法的检测范围为10^1～10^8 copies／μl,灵敏度达到10copies／μl,低拷贝样品的批内和日间重复性（CV）分别为1．71％和2．57％,高拷贝样品的批内和日间GV,分别为3．00％和3．86％。与商品化TaqMan试剂盒相比,本法阳性检出率较高,且检测时间缩短了45min（约减少1／3）,成本降低50％。结论：成功建立了快速检测HBVDNA的二聚体蝎型荧光定量PCR方法,为研发适合临床应用的HBV基因定量检测试剂盒奠定了基础。     

硫氧还蛋白相互作用蛋白表达下调减轻大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤

目的观察大鼠蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后早期硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)表达变化,检测干预前后TXNIP及下游凋亡因子表达,探讨TXNIP参与SAH后早期脑损伤(early brain injury,EBI)的可能机制。方法血管内穿刺法建立SAH模型。97只成年雄性SD大鼠,随机分为假手术对照组(Sham组,17只)、SAH组(32只)、Control si RNA组(12只)、TXNIP si RNA组(12只)、白藜芦醇(resveratrol,RES)对照组(12只)、RES干预组(12只)。Western blot检测SAH后各时间点及干预前后TXNIP、p-ASK-1、Caspase-3表达变化,荧光共聚焦检测TXNIP在神经元定位,TUNEL法检测细胞凋亡与TXNIP共定位,同时进行脑水肿评估(6只/组)和行为学评分(12只/组)。结果采用TXNIP si RNA和TXNIP抑制剂RES干预后死亡率、行为学评分及脑水肿(F=7.964,P0.05)得到改善。荧光共聚焦显示TXNIP在大鼠脑神经元广泛表达,且主要位于胞浆。荧光TUNEL提示TXNIP与皮层区及海马区凋亡细胞共定位。Western blot发现与Sham组(0.476±0.043,n=3)比较,TXNIP在SAH后12h(0.729±0.548)表达逐渐增高,72h(1.509±0.071)仍处于较高水平,同时伴随下游凋亡因子的增高,差异有统计学意义(F=7.806,P0.05)。采用TXNIP si RNA和TXNIP抑制剂RES干预后,TXNIP表达下调(F=900.849,P0.05,n=3),下游凋亡因子出现下降(p-ASK1,F=32.897,P0.05;Caspase-3,F=89.120,P0.05)。结论大鼠SAH后早期TXNIP表达增加,通过其促凋亡机制参与EBI发生,下调TXNIP能减轻大鼠SAH后EBI,这可能为临床SAH早期治疗提供新的治疗思路。     

家族性高胆固醇血症患者饮食治疗的重要性

家族性高胆固醇血症（ＦＨ）的饮食治疗旨在降低血浆低密度脂蛋白（ＬＤＬ）胆固醇水平，是各种药物治疗的基础。合理的方案是：胆固醇（１００ｍｇ／日），总脂肪（占热卡的２０％），碳水化合物（６５％），蛋白质（１５％）。这种低脂肪、高碳水化合物饮食能降低血浆胆固醇１８～２１％。     

关节镜下后交叉韧带重建术的围手术期护理

目的：探讨关节镜下后交叉韧带重建术的临床护理及经验总结。方法：对37例不同病因导致膝关节后交叉韧带断裂的患者进行关节镜下重建术的围手术期护理。术前对患者针对性的评估，给予心理护理，完善术前检查，做好局部皮肤清洁，肌力评估的准备。术后观察切口情况、末梢血运、并发症的发生、并做好预防和护理，指导正确有效的康复锻炼，明确出院指导。结果：本组37例患者行重建术后早期未出现并发症，症状均得到改善。结论：正确进行膝关节后交叉韧带关节镜下重建术的围手术期护理有利于患者的早日康复，提高了患者的生活质量。     

磷酸化Y盒结合蛋白1的抗体制备及其辅助诊断原发性肝癌合并肺转移的临床价值

目的 制备Y盒结合蛋白1磷酸化抗体(pAb/YB-1S102);探讨腹水中磷酸化YB-1 (pYB-1)作为标志物辅助诊断原发性肝癌合并肺转移的临床价值. 方法 通过生物信息学预测并化学合成102位丝氨酸磷酸化YB-1多肽,耦联载体蛋白后免疫家兔;protein A亲和层析法纯化抗血清pAb/YB-1S102,并验证其特异性.收集109例患者腹水并富集腹水中pYB-1,其中原发性肝细胞癌(HCC) 36例,HCC合并肺转移44例,肝硬化29例;采用Western blot定性检测腹水中pYB-1,并对定性结果进行回归判别与受试者工作特征(ROC)曲线分析.计数资料采用x2检验.结果 酶联免疫吸附法与十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示制备的pAb/YB-1S102效价≥1∶1×106,且纯度较高.Western blot结果证实pAb/YB-1S102能特异性识别内源性pYB-1S102.肝硬化患者腹水中未检出pYB-1S102,HCC合并肺转移患者腹水pYB-1S102阳性率(77.3％)显著高于HCC(30.6％,x2=11.69,P＜0.01);回归分析与ROC曲线结果表明pYB-1S102辅助诊断HCC合并肺转移的灵敏度为77.3％,符合率为73.8％(x2=17.56,P＜0.01). 结论 成功制备可识别内源性pYB-1的抗体pAb/YB-1102;通过定性检测腹水pYB-1,可鉴别诊断HCC合并肺转移.     

脂肪肝虽良性 任其发展危害大

对肝脏的损害脂肪肝是肝脏脂代谢失调的产物,同时又是加重肝脏损伤的致病因素,这是一种互为因果、恶性循环的发展。肝细胞中脂滴增多,使肝细胞脂肪、肿大,细胞核被挤压偏离中心。     

某基层妇幼保健院医院感染现患率调查分析

目的了解医院感染现状,为提高医院感染管理水平提共科学依据。方法采用横断面调查的方法 ,对2013年12月6日0时~24时住院患者医院感染现患率、感染部位及抗菌药物使用情况进行调查。结果共调查当日住院患者320人,调查率100%发生医院感染9例（2.81%）。医院感染部位以下呼吸道感染为主,感染率为46.47%,上呼吸道次之,感染率为40%,日抗菌药物使用212例,使用率为66%,医院感染病例病原学送检率为26%。结论通过医院感染现患率调查,可全面真实地了解医院感染现状,从而有针对性地制定检测方案,降低医院感染发生率。     

甲型H1N1流感712例临床特征及分类管理治疗分析

甲型H1N1流感是一种新的流感病毒引起的急性呼吸道传染病,自2009-03墨西哥发现爆发以来,引发了全球大流行[1,2]。我院为河南省及郑州市定点收治单位。现将2009-06-2010-01我院712例确诊患者临床资料进行综合分析,探讨     

假肥大型肌营养不良患者骨骼肌纤维再生病理特点研究

目的研究假肥大型肌营养不良患者骨骼肌纤维再生病理特点。方法收集25例假肥大型肌营养不良患者活检骨骼肌标本,其中杜兴型肌营养不良（DMD）18例,贝克型肌营养不良（BMD）7例,冷冻连续切片,采用组织化学及免疫组织化学染色,光镜下观察再生肌纤维特点,同时应用形态计量学方法分析肌纤维再生的活跃程度。结果 HE染色下见再生肌纤维深染,胞质嗜碱性,细胞核大,同源观察NCAM染色,再生肌NCAM呈阳性表达,伴随肌纤维的成熟NCAM表达逐渐减弱,成熟肌纤维无表达。DMD患者再生肌纤维直径及横截面积明显小于BMD患者再生肌纤维,再生肌纤维数量较多。结论假肥大型肌营养不良患者骨骼肌纤维再生与年龄有相关性。