1例肾-胰岛细胞和干细胞移植治疗Ⅰ型糖尿病合并尿毒症护理体会

近年来肾联合胰岛细胞的移植给糖尿病合并尿毒症的治疗带来了新的希望,但是如何使糖尿病肾病患者在肾移植术后既能保证移植肾功能稳定,又能减少免疫抑制剂对糖代谢所带来的进一步损伤,从而有效控制血糖甚至逆转自身胰岛β细胞分泌胰岛素功能,仍是全球医疗学术难题之一。研究证明间充质干细胞具有自我更新、分化为各种类型细胞的能力（包括诱导分化为胰岛样细胞）以及免疫调节能力。如果将三者联合移植,则可能是解决这些难题最有前途的一种方法。     

采用单抗原微珠抗体检测肾移植受者体内供者特异性抗体

目的 总结应用单抗原微珠抗体检测肾移植受者体内供者特异性抗体(DSA)的经验,并探讨阳性DSA的处理方法及对移植肾功能的影响.方法 应用流式细胞微珠法检测亲属肾移植受者移植前后单抗原微珠抗体,并分析DSA与排斥反应、移植肾功能的关系.结果 30例患者,检测样本173份,其中移植前47份,移植后126份.移植前1例出现DSA,移植后8例出现DSA,应用硼替佐米及增加免疫抑制剂治疗.应用硼替佐米治疗者1例DSA免疫荧光强度下降至阴性水平,2例下降超过50％.出现DSA时与未出现DSA时的估算肾小球滤过滤分别为(1.50±0.59) ml/s与(1.23±0.38) ml/s,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 采用单抗原微珠抗体动态检测DSA的效果好,DSA的出现影响了移植肾eGFR,应用硼替佐米治疗可使DSA免疫荧光滴度下降.     

肾移植后测定血清可溶性细胞间粘附分子-1的临床意义

目的　探讨血清可溶性细胞间粘附分子 1(sICAM 1)在肾移植术后免疫学监测中的价值。方法　采用酶联免疫吸附法 (ELISA)动态监测 5 6例肾移植患者术后血清sICAM 1的变化。结果　肾移植患者术后发生排斥反应时 ,其sICAM 1水平 (390 .6 μg/L±91.0 μg/L)明显高于移植肾功能稳定者 (137.3μg/L±16 .8μg/L)和环孢素A(CsA)肾中毒者 (132 .7μg/L±2 4.8μg/L) ,差异有极显著性 (P <0 .0 1) ;抗排斥反应治疗有效后 ,sICAM 1逐渐降至正常水平 ;CsA肾中毒者的sICAM 1水平无明显变化。结论　肾移植术后动态监测患者血清sICAM 1水平的变化 ,有助于急性排斥反应的诊断、鉴别诊断及抗排斥治疗的疗效评价 ,可以作为肾移植术后急性排斥反应的免疫学监测指标。     

西罗莫司和FTY720对成人胰岛细胞毒性作用的体外研究

目的 探讨西罗莫司（SRL）和FTY720在体外培养试验中对成人胰岛细胞的毒性作用。方法 取成人尸体胰腺，用Liberase胶原酶消化，采用Ficoll密度梯度法纯化胰岛细胞。再将其分别与不同浓度的FTY 720（3、6、15μg／L）和SRL（3、6、15μg／L）共同培养，并设不用任何药物的对照组。各组用低糖和高糖刺激胰岛素分泌，以酶联免疫（ELISA）法检测各培养液中胰岛素的含量，并进行比较分析。结果 各组在高糖刺激下的胰岛素分泌量均大于低糖刺激下的胰岛素分泌量（P〈0．05）。在低糖和高糖刺激时，FTY720和SRL之间及同一免疫抑制剂不同浓度之间的胰岛素分泌量相比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）；各组与对照组比较，差异亦无统计学意义（P〉0．05）。结论 FTY720和SRL对成人胰岛细胞无明显的毒性作用。FTY720和SRL可作为临床胰岛细胞移植后的主要免疫抑制剂。     

成人胰岛细胞移植治疗1型糖尿病

目的 探讨新型成人胰岛细胞分离、纯化技术分离的成人胰岛细胞移植治疗1型糖尿病的安全性与有效性.方法 采用全氟化碳液(PFC)和UW液双层冷藏胰腺,Liberase酶消化,COBE 2991型专用胰岛细胞分离机分离及连续密度梯度纯化,获取高纯度与高活性的胰岛细胞.通过上腹部小切口,胃右静脉或脐静脉插管,将经短期培养的胰岛细胞经门静脉移植到11例1型糖尿病患者肝脏内.采用达利珠单抗或阿来佐单抗进行诱导,西罗莫司和他克莫司联用的方案预防排斥反应,术后观察胰岛素使用情况,监测血糖、G-肽与糖化血红蛋白水平以及肝功能、肾功能.结果 45个胰腺中,42个成功分离出胰岛细胞,其数量平均为28.5×104胰岛当量(IEQ)/个,纯度为95.7%,活率为93.2%,胰岛素释放试验刺激指数为2.43.11例1型糖尿病患者共行胰岛细胞移植20次,其中移植1次4例,2次5例,3次2例,每次移植胰岛细胞数平均为11 200 IEQ/kg.术后随访6个月至4年,6例完全撤除胰岛素,2例胰岛素用量较术前减少80%,3例减少50%.术后血糖稳定维持在正常水平,C-肽均超过0.166 nmol/L,糖化血红蛋白基本正常,肝、肾功能正常,未发生与胰岛细胞输注相关的并发症.结论 新型成人胰岛细胞分离、纯化方法可靠,采用该技术分离、纯化的成人胰岛细胞移植治疗1型糖尿病临床效果较好.     

血清可溶性血管细胞粘附分子-1测定在肾移植急性排斥反应中的临床意义

目的:探讨血清可溶性血管.细胞粘附分子-1(sVCAM-1)测定在肾移植术后免疫学监测中的价值.方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)动态监测56例肾移植患者术后sVCAM-1水平的变化.结果:肾移植患者术后sVCAM-1水平呈规律性变化,急性排斥反应组sVCAM-1水平明显高于移植肾功能稳定组和CsA肾中毒组,差异有非常显著意义(P＜0.01).对激素治疗敏感的排斥反应患者,sVCAM-1逐渐降至正常水平;耐激素的排斥反应患者应用ATG治疗后,sVCAM-1在排斥反应后1个月内仍维持在较高水平.CsA肾中毒组sVCAM-1水平无明显变化.结论:肾移植术后动态监测sVCAM-1水平的变化,有助于急性排斥反应的诊断、鉴别诊断及指导临床治疗.sVCAM-1可以作为肾移植术后急性排斥反应的免疫学监测指标.     

大鼠胰岛细胞经门静脉肝内移植模型的建立

背景：由于肝脏既是胰岛素的作用部位,又是相对的免疫特惠区,排斥反应小,肝窦及其小静脉结构还有利于胰岛的居留和生长,可供移植容积大,有利于胰岛的生存,因此肝脏是一个较为理想的移植部位。 目的：建立一种经门静脉胰岛细胞肝内移植治疗SD大鼠1型糖尿病的动物模型。 方法：采用文献方法制备SD大鼠胰岛细胞。以腹腔注射链尿佐菌素诱导建立SD大鼠1型糖尿病模型,随机数字表法分为2组：实验组经门静脉主干穿刺输注SD大鼠胰岛1 000 胰岛当量1.5 mL;对照组经门静脉主干穿刺输注无血清1640液1.5 mL。术后未给予免疫抑制剂,观察两组大鼠出血量、血糖、胰岛素水平及肝脏组织形态学变化。 结果与结论：所有大鼠均移植成活,门静脉穿刺一次成功率90%,出血量< 0.5 mL。胰岛移植大鼠血糖降为正常的时间1~6(3.7±1.7) d,移植胰岛存活时间为2~15(8.4±4.1) d。术后2周内实验组大鼠空腹血清胰岛素水平明显高于对照组(P < 0.05,P < 0.01)。病理结果证实,移植大鼠肝细胞形态、肝小叶结构均正常,肝实质未见坏死灶,血管内无血栓形成;门静脉主干未见狭窄,亦未发生感染,说明胰岛细胞在肝窦内存活并能发挥功能。证实大鼠胰岛经门静脉主干穿刺输注肝内移植是胰岛移植基础研究的理想模型。     

阿来佐单抗行肾移植免疫诱导治疗的有效性和安全性

目的 评价阿来佐单抗行肾移植免疫诱导治疗的有效性和安全性.方法 将89例肾移植受者随机分为试验组(43例)和对照组(46例).试验组于肾移植术前和术后24 h内分别静脉滴注阿来佐单抗15 mg,对照组不接受免疫诱导治疗.受者术后常规应用环孢素A(或他克莫司)+吗替麦考酚酯+泼尼松预防排斥反应.统计两组术后12月内的移植肾功能、急性排斥反应发生率、感染发生率、移植肾功能延迟恢复发生率、移植肾存活率及淋巴细胞计数,并用ImmuKnowTM免疫细胞功能测定法检测受者CD4+T淋巴细胞的三磷酸腺苷(ATP)值.结果 术后12个月内试验组7.0%(3/43)的受者发生病理证实的急性排斥反应,明显低于对照组的23.9%(11/46,P＜0.05).试验组和对照组总体的感染发生率为别为39.5%(17/43)和30.4%(14/46,P＞0.05),两组机会性感染的发生率分另为23.2%(10/43)和17.4%(8/46,P＞0.05).术后3个月内,试验组淋巴细胞计数低于对照组;术后6个月内,试验组CD4+T淋巴细胞ATP值低于对照组.结论 阿来佐单抗行肾移植免疫诱导治疗可维持受者的免疫抑制状态,未见严重不良反应.     

原发性附睾横纹肌肉瘤一例报告

目的 探讨原发性附睾横纹肌肉瘤的临床特征及诊治进展. 方法总结1例原发性附睾横纹肌肉瘤患者资料并复习文献.患者16岁,发现右阴囊肿物4个月入院.体检:右侧阴囊内4.5 cm×3.5 cm×3.0 cm卵圆形实性肿物,光滑、质硬、无压痛,透光试验阴性,腹股沟未及肿大淋巴结.术前诊断:右附睾炎性结节. 结果 骶管麻醉下行右附睾切除术.病理检查示肿瘤细胞呈小圆形,核小而深染.免疫组化染色:肌红蛋白(++++),肌动蛋白(+++),结蛋白(+++),平滑肌肌动蛋白(一).电镜下见瘤细胞胞质内较多平行排列的细肌丝,未见肌节样结构.病理诊断:右附睾胚胎性横纹肌肉瘤.患者家属拒绝进一步治疗.术后2个月右阴囊内再次发现肿块,生长迅速并疼痛,考虑附睾肿瘤复发.行右睾丸根治性切除术.冰冻切片示切缘无肿瘤细胞,病理诊断:右阴囊横纹肌肉瘤(复发).给予异环磷酰胺、长春新碱、依托泊苷联合化疗.随访1年,未见复发. 结论 附睾原发性横纹肌肉瘤罕见,进展快,临床表现无特异性,诊断主要依赖病理检查.根治性睾丸切除术加辅助化疗和放疗是主要治疗方法,预后好.     

骨髓间充质干细胞抑制T淋巴细胞增殖和miRNA-155表达的体外研究

目的：探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）对单向混合淋巴细胞反应（MLR）培养体系中被激活的T淋巴细胞增殖和miRNA-155表达的影响。方法体外培养SD大鼠MSCs ,采用流式细胞仪检测MSCs细胞表面标记CD11b/c、CD34、CD44和CD90;分别通过成骨和成脂诱导鉴定MSCs的分化潜能。免疫磁珠分选SD大鼠脾T淋巴细胞,并行纯度及活性检测。以SD大鼠T淋巴细胞作为反应细胞、丝裂霉素C灭活的Wistar大鼠单个核细胞作为刺激细胞建立单向MLR培养体系。CCK-8法检测MSCs对MLR中被激活的 T淋巴细胞增殖的影响。Rea1-time PCR法检测MSCs对MLR中被激活的T淋巴细胞miRNA-155表达的影响。结果流式细胞仪鉴定结果显示：CD44及CD90的阳性细胞数分别为（98．9％±0．8％）、（98．1％±0．9％）,而CD11b/c及CD34的阴性细胞数分别为（85．1％±0．6％）、（98．0％±0．8％）。培养的MSCs具有成骨和成脂分化潜能。所分选的T淋巴细胞纯度为（91．9％±1．2％）。MSCs可明显抑制单向MLR培养体系中激活的 T淋巴细胞的增殖和miRNA-155表达,且这种抑制作用呈明显的浓度依赖性。结论 MSCs能够降低被激活的 T 淋巴细胞中miRNA-155的表达,这可能在MSCs调节T淋巴细胞增殖和免疫功能的过程中发挥了重要作用。