基于IL-17、IL-31/STAT3信号通路探讨马齿苋对急性湿疹大鼠炎症和瘙痒反应的影响

目的 研究马齿苋对急性湿疹模型大鼠皮肤组织IL-17、IL-31表达的影响及其对IL-17、IL-31/STAT3信号通路的调控作用，探讨其治疗急性湿疹可能机制。方法 24只SD大鼠随机分为正常组、模型组和马齿苋组，每组8只。对模型组和马齿苋组采用2,4-硝基氯苯(DNCB)建立急性湿疹动物模型。成功造模后，分别给予模型组无菌蒸馏水和马齿苋组予马齿苋液。待观察大鼠一般情况后，断颈处死动物，剪去皮肤。对皮肤组织进行病理HE染色观察其病理改变，并做病理损伤评分，免疫组化染色检测IL-17、IL-31、STAT3的积分光密度，并进行统计学分析。结果 与正常组相比，模型组大鼠皮肤组织IL-17、IL-31、STAT3蛋白含量明显升高，具有显著的统计学意义(P<0.01)。与模型组相比，马齿苋组IL-17和IL-31蛋白含量降低，具有统计学意义(P<0.05),STAT3蛋白含量有一定的下降趋势，但不具有统计学意义(P>0.05)。结论 马齿苋可通过减少大鼠皮肤组织IL-17、IL-31的含量达到治疗急性湿疹的作用。急性湿疹的发病机制可能是通过抑制炎症信号通路IL-17/STA...     

马齿苋挥发油对辣椒素诱导瘙痒相关胞内通路的影响

目的：本研究通过马齿苋挥发油干预辣椒素诱导角质层细胞内瘙痒模型,探究马齿苋对抗湿疹瘙痒的作用机制。方法：采用辣椒素诱导的SD大鼠角质层细胞作为胞内瘙痒模型,模型细胞分为模型组、马齿苋挥发油高、低剂量组,另设正常角质层细胞作为空白对照。实验结束后采用免疫荧光技术检测角质层细胞形态,采用流式细胞技术测定细胞内Ca²⁺浓度,采用酶联免疫法法测定白三烯、白细胞介素-31和H1羟色胺含量,RT-PCR测定角质层细胞中辣椒素受体蛋白基因表达,western blot测定辣椒素受体蛋白表达。结果：与模型组相比,马齿苋挥发油干预组的阳性角质层细胞数量明显减小（P<0.05）,胞内Ca²⁺浓度明显降低（P<0.05）,白三烯、白细胞介素-31和H1羟色胺含量均有明显减少（P<0.05）,角质层细胞中辣椒素受体蛋白的基因和蛋白表达均明显减少（P<0.05）。结论：马齿苋挥发油可能通过下调辣椒素受体蛋白表达,减少炎症继发反应而产生止痒效应。     

探讨白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α等血清炎性因子在急性心梗中的应用价值

目的 探讨急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）患者血清中白细胞介素-6（interleukin,IL-6）、肿瘤坏死因子-α （tumor necrosis factor-α,TNF-α）、超敏C反应蛋白（high sensitive C-reactive protein,hs-CRP）的水平变化及其临床意义.方法 收集我院2012年10月至2013年10月,门急送检并经冠状动脉造影确诊为AMI的患者83例,根据心肌肌钙蛋白T（cardiac troponin T,cTnT）水平分为cTnT弱阳性组28例,cTnT阳性组55例,同期收集健康体检者30例为健康对照组.检测所有受试者血清IL-6、TNF-α、hs-CRP水平,测定结果与心肌酶谱中敏感性最高的肌酸激酶同工酶（creatine kinase-MB,CK-MB）相比较,并对检测结果进行统计学分析.结果 三组间CK-MB、IL-6、TNF-α、hs-CRP检测结果比较差异均具有统计学意义（P均＜0.05）.cTnT阳性组患者血清CK-MB、IL-6、TNF-α、hs-CRP水平均明显高于健康对照组,且差异均具有统计学意义（P均＜0.05）.cTnT弱阳性患者组血清IL-6、TNF-α、hs-CRP水平均显著高于健康对照组及cTnT阳性组,差异均有统计学意义（P均＜0.05）.CK-MB水平在cTnT阳性组与弱阳性组之间差异无统计学意义（P＞0.05）.cTnT弱阳性患者组中IL-6、TNF-α、hs-CRP异常率明显高于cTnT阳性组,且差异均有统计学意义（P均＜0.05）.cTnT阳性患者组中CK-MB异常率与cTnT弱阳性组差异无统计学意义（P＞ 0.05）.多因素Logistic回归分析显示,IL-6、TNF-α、hs-CRP均是AMI的独立危险因素（P均＜0.05）.结论 IL-6、TNF-α、hs-CRP等炎性指标与AMI发生、发展相关,与cTnT联合检测对AMI早期诊断具有较好的临床应用价值.     

马齿苋提取物对急性湿疹大鼠皮肤TNF-α与IL-4表达的影响

目的:探讨马齿苋提取物对急性湿疹大鼠背部皮肤TNF-α与IL-4表达的影响及其机制。方法:SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只,分别为正常组、模型组、复方黄柏组、马齿苋组。除正常组外其余各组用2,4-二硝基氯苯(DNCB)于大鼠右背部皮肤造模,造模成功后,模型组、复方黄柏组、马齿苋组分别给予1 ml无菌蒸馏水、复方黄柏液和马齿苋提取液。实验第21天断颈处死动物,肉眼观察4组大鼠右背部皮肤病变,取大鼠左、右背部相同面积皮肤,称重法比较皮肤重量,免疫组化法(SP法)染色4组大鼠右背部皮肤TNF-α、IL-4并采用病理图像分析系统半定量检测其含量。结果:正常组大鼠右背部皮肤光滑、未见病理性改变,模型组大鼠右背部皮肤出现明显肿胀、红斑、糜烂和渗出,复方黄柏组、马齿苋组上述病变均有不同程度减轻。与模型组比较,复方黄柏组和马齿苋组大鼠皮肤肿胀度明显减轻(P<0.01);与复方黄柏组比较,马齿苋组大鼠皮肤肿胀度有所减轻(P<0.05)。空白组、模型组、复方黄柏组、马齿苋组的TNF-α含量分别是(6 652.66±1 190.94)、(19 927.10±5 494.21)、(7 515.13±877.66)、(6 809.93±1 385.54);IL-4含量分别是(5 378.44±1685.01)、(26 334.89±3 993.48)、(7 814.84±1 751.38)、(8 246.57±975.08)。与模型组比较,复方黄柏组和马齿苋组大鼠皮肤组织TNF-α、IL-4含量显著降低(P<0.01);与复方黄柏组比较,马齿苋组大鼠皮肤组织TNF-α、IL-4含量明显降低(P<0.05)。结论:马齿苋提取液对湿疹皮肤具有明显的疗效,其机制可能是通过下调促炎因子TNF-α,同时适度的调控抗炎因子IL-4发挥作用。     

马齿苋提取物对湿疹大鼠皮肤炎症肿胀度影响的研究

目的:通过观察马齿苋提取物对湿疹大鼠皮肤肿胀度的抑制作用,探讨其抗炎作用,为临床治疗提供依据。方法:SD大鼠50只,按体重随机分为5组,每组10只,分别作为模型对照组,阳性对照组,马齿苋提取物高、中、低剂量组。用2,4-二硝基氯苯(DNCB)在大鼠右背部涂抹造模。实验第21天断颈处死,剪取造模皮肤及对称的左侧健康皮肤,取相同面积的皮肤,比较皮肤重量。结果:与模型对照组比较,马齿苋高、中、低三个剂量组均能减少大鼠皮肤的肿胀度(P0.05),与阳性对照组比较,马齿苋高剂量组皮肤肿胀度明显小于阳性对照组(P0.05)。结论:马齿苋提取液减少了湿疹大鼠皮肤的炎症反应,具抗炎作用,对湿疹的治疗有一定意义。     

不同血瘀证辨证分型实验室指标分析

目的:探讨不同血瘀证辨证分型患者血常规检测结果的差异。方法:纳入医院门诊收治的气虚、气滞、寒凝血瘀证及正常健康人各40例,入院后测定血常规、凝血指标[血小板容积(MPV)、红细胞体积(MCV)、红细胞血红蛋白水平(MCH)、红细胞分布宽度(RDW)、血小板体积分布宽度(PDW)、红细胞聚集指数(RE)、血浆黏度(PV)、全血黏度(BV)、红细胞压积(HCT)、红细胞沉降率(ESR)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)]、血脂指标[甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、载脂蛋白A1(Apo-A1)、载脂蛋白B(Apo-B)]、炎症指标[一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、C反应蛋白(CRP)、超氧化物歧化酶(SOD)]水平。结果:寒凝血瘀证MPV、PDW高于对照组(P 0. 05),气虚血瘀证MCV、MCH、RDW高于对照组(P 0. 05),气虚血瘀证上述指标高于气滞血瘀组、寒凝血瘀证(P 0. 05),寒凝血瘀证MPV、PDW高于气虚、气滞血瘀证(P 0. 05);气虚、气滞、寒凝血瘀证RE、BV、HCT、ESR高于对照组(P 0. 05),寒凝血瘀证PV高于对照组、气虚、气滞血瘀证(P 0. 05),气滞血瘀证RE、BV、HCT、ESR均高于气虚血瘀证(P 0. 05),其BV、HCT、ESR又高于寒凝血瘀证(P 0. 05);气虚、寒凝血瘀证各凝血指标高于对照组(P 0. 05),气滞血瘀证APTT、TT、PT、D-D高于对照组(P 0. 05),气虚、气滞血瘀证APTT、TT、PT、FIB低于寒凝血瘀证(P 0. 05),气虚血瘀证D-D高于气滞、寒凝血瘀证(P 0. 05),寒凝血瘀证D-D高于气滞血瘀证(P 0. 05);气滞血瘀证血脂指标高于对照组(P 0. 05),寒凝血瘀证TC、LDL高于对照组(P 0. 05),气虚、寒凝血瘀证各血脂指标均低于寒凝血瘀证(P 0. 05);气虚、气滞、寒凝血瘀证NO、SOD低于对照组(P 0. 05),ET、CRP高于对照组(P 0. 05),气虚、寒凝血瘀证NO低于气滞血瘀证(P 0. 05),寒凝血瘀证ET、CRP高于气虚、气滞血瘀证,SOD低于气虚、气滞血瘀证(P 0. 05),气虚血瘀证ET、SOD高于气滞血瘀证(P 0. 05),CRP低于气滞血瘀证(P 0. 05)。结论:不同血瘀证辨证分型患者血常规指标存在差异,可作为量化诊断的依据。     

血清载脂蛋白M与1-磷酸鞘氨醇在细菌性血流感染中的表达及相关性研究

目的通过测定血清载脂蛋白M(ApoM)和1-磷酸鞘氨醇(S1P)在细菌性血流感染及不同感染程度中的表达,发现血清ApoM在细菌感染诊断、治疗及预后中的作用;为ApoM通过载脂蛋白M-1-磷酸鞘氨醇轴(ApoM-S1P)参与细菌感染的炎症反应提供实验室依据。方法收集成都中医药大学附属医院2018年9月～2019年2月细菌感染标本90例,测定血清ApoM和S1P在细菌感染中的表达,探讨血清ApoM与细菌感染的相关性及诊断效能,同时分析血清ApoM和S1P的相关性;根据细菌感染程度进一步分组,分别测定血清ApoM和S1P的表达水平,探讨血清ApoM与感染程度的相关性,并分析血清ApoM和S1P的相关性。结果细菌性血流感染组ApoM和S1P的检测结果分别为11.06±8.02μg/L和119.31±43.7 ng/ml,明显低于对照组(25.43±7.05μg/L和192.97±41.74 ng/ml),两组间差异有统计学意义(t=-4.716,5.045,均P0.05),细菌性血流感染组的ApoM和S1P呈线性相关(r=0.774,P=0.00);随着感染程度的加重,ApoM和S1P的表达逐渐下调,在败血症、脓毒血症、严重脓毒血症和脓毒血症休克组中分别为18.08±1.58,11.63±4.85,9.32±6.58和7.95±2.7μg/L,149.39±10.44,120.67±26.71,111.76±54.94和101.90±32.82 ng/ml,各组间差异均具有统计学意义(F=14.005,6.115,均P0.05),S1P的表达与ApoM呈线形相关(各组pearson相关系数r=0.569,0.725,0.856和0.873,均P0.05)。结论 ApoM在血液细菌感染早期辅助诊断具有较高的诊断价值;ApoM可能通过ApoM-S1P轴并激活下游受体参与细菌感染的炎症反应,起着潜在的抗炎作用。     

基于H1R、PAR-2/ TRPV1 痒信号通路探讨马齿苋对急性湿疹的干预作用

目的:探讨马齿苋提取液对急性湿疹大鼠背部皮肤组胺受体1(H1R)、蛋白酶激活受体2(PAR-2)和瞬时感受器电位受体1(TRPV1)表达的影响及其对H1R、PAR-2/ TRPV1 信号通路的调控作用。方法:SD 大鼠30 只,分为正常组、模型组、马齿苋组,各组10 只。采用二硝基氯苯(DNCB)建立急性湿疹模型,正常组除外。造模成功后,各组分别给予相应药物。末次给药后对各组大鼠进行湿疹面积及严重度指数(EASI)评分。免疫组化法检测H1R、PAR-2 和TRPV1 的表达,流式细胞技术测定细胞内钙离子(Ca2+ )浓度。结果:与正常组比,模型组大鼠EASI(P<0.01)、H1R(P<0.05)和PAR-2(P<0.01)的含量、Ca2+浓度(P<0.01)显著增加,TRPV1 增加差异不明显(P>0.05)。与模型组比,马齿苋组大鼠EASI(P<0.01)、H1R(P<0.01)和PAR-2(P<0.01)的含量及Ca2+ 浓度(P<0.05)显著减少,TRPV1 减少差异不明显(P>0.05)。结论:马齿苋可减少H1R、PAR-2 含量及降低Ca2+浓度,发挥治疗急性湿疹的作用,其机制可能是通过降低上游分子H1R、PAR-2 含量,使其下游分子TRPV1 失活,减少Ca2+内流,达到抗瘙痒的作用。     

shRNA干扰IRS-1基因通过PI3K/AKT通路对人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1增殖和转移能力的调控作用

目的：探究下调胰岛素受体底物-1 (IRS-1) 表达对人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1增殖和转移能力的作用及作用机制。方法：将细胞分为TPC-1组,sh-scram组和sh-IRS-1组,用shRNA IRS-1 (sh-IRS-1) 转染sh-IRS-1组细胞,shRNA转染sh-IRS-1组细胞,TPC-1组仅加入载体处理,RT-PCR和Western blot检测IRS-1的表达,MTT检测细胞增殖倍数,流式检测细胞凋亡,Transwell和划痕实验检测细胞侵袭、迁移能力,Western blot检测磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶 (PI3K/AKT)通路蛋白的表达。结果：与sh-scram组比较,sh-IRS-1组IRS-1的mRNA及蛋白表达水平明显降低;sh-IRS-1转染细胞后3 d和4 d,sh-IRS-1组细胞增殖倍数明显低于sh-scram组,细胞凋亡率明显高于sh-scram组;同时,与sh-scram组比较,sh-IRS-1组细胞侵袭及迁移能力显著降低;此外,sh-IRS-1还能显著降低p-PI3K/PI3K和p-Akt/AKT的比值。结论：干扰IRS-1表达能降低人乳头状甲状腺癌TPC-1细胞生存能力和转移能力,作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路激活有关。