缺氧缺血I生脑损伤新生大鼠脑神经细胞凋亡及脑组织中Rho GDP解离抑制因子和Bcl-2表达的变化

目的研究RhoGDP解离抑制因子（Rho GDP dissociation inhibitor 2,RhoGDI2）mRNA及Bcl-2mRNA的表达在缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage,HIBD）中的作用和机制。方法30只新生7日龄SD大鼠按照完全随机化方法分为假手术组及HIBD6h和48h组,每组10只。采用流式细胞仪检测脑细胞凋亡情况,并用Real—timeRT—PCR方法测定脑组织中RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平。结果（1）新生大鼠HIBD后48h结扎侧大脑半球脑水肿明显。（2）HIBD6h出现典型的凋亡细胞峰,细胞凋亡率为（1．40±0．12）％。HIBD48h凋亡峰更为明显,细胞凋亡率达到（15．86±0．98）％。缺氧缺血后与假手术组相比,差异有统计学意义（P〈0．01）。（3）假手术组大鼠RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平较高（4．12±0．74、2．55±0．65）,在HIBD6h后二者表达开始下降（3．19±0．77、1．96±0．36）,48h降低更加明显（1．04±0．18、1．06±0．17）,与假手术组比较,HIBD各时间点RhoGDI2和Bcl-2mRNA的表达均明显降低,差异有统计学意义（P〈0．01）。（4）缺氧缺血后各时间点RhoGDI2mRNA的表达和Bcl-2mRNA的表达呈正相关（r=0．831,P〈0．05）。结论脑缺氧缺血后,随着凋亡的出现,RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平降低,提示RhoGDI2表达失衡可能通过Bcl-2参与新生大鼠HIBD中凋亡的发生。     

3-氨基苯甲酰胺减轻骨骼肌缺血再灌注损伤的实验研究

目的 研究3-氨基苯甲酰胺(3AB)对鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用,以及组织中凋亡和胀亡的存在情况.方法 54只SD大鼠随机分为空白对照组、缺血再灌注组、3AB组,持续缺血4h,再灌注6、24和48 h.检测血浆乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸激酶(CPK)活性,肌肉内丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(SOD)活性,进行组织学、免疫组化、超微结构分析.结果 3AB组在再灌注24h和48 h时,在MDA含量下降、SOD活性升高、骨骼肌湿重与干重比值下降、组织学改变范围及免疫组化阳性范围方面,均与缺血再灌注组有明显差异.结论 再灌注开始时应用3AB对于缺血再灌注损伤有明显的保护作用,主要体现在再灌注的稍后期阶段(再灌注24 h和48 h).缺血再灌注过程中,凋亡和胀亡是并存的.     

新型全自动免疫组化染色机在临床病理工作中高标准化应用体会

  探讨新型全自动免疫组化染色机在临床病理工作中高标准化操作的应用,为临床病理诊断提供有力依据。     

超声造影评价肝纤维化的实验研究

目的 探讨超声造影评价大鼠肝纤维化的价值.方法 应用四氯化碳诱导大鼠肝纤维化,在反相脉冲谐波模式下,经尾静脉团注超声造影剂,记录造影剂到达肝动脉时间(hepatic artery arrival time,HAAT)、到达门静脉时间(portal vein arrival time,PVAT)、到达肝静脉时间(hepatic vein arrival time,HVAT),并与免疫组化结果进行相关性分析.结果 S0～S4期HAAT、PVAT两两比较差异无统计学意义;S3期、S4期HVAT较So～S2期缩短(P＜0.05).HVAT与C-Ⅳ、LN免疫组化染色阳性反应面积百分比呈负相关,相关系数分别为-0.680,-0.639.结论 超声造影对于评价肝纤维化有一定的价值.     

由左颈总动脉导管经肾动脉的大鼠肾脏无创伤给药法探讨

目的 建立一种大鼠肾脏无创伤性局部血管给药的新方法,并对其给药后成活率和损伤性进行观察.方法 16只Wistar大鼠,用PE10导管经大鼠左侧颈总动脉-降主动脉-胸主动脉-腹主动脉,抵达肾动脉直接给药.统计其成活率并对给药的肾动脉血管行病理学观察.结果 大鼠成活率可达87.5%,且不会造成肾动脉血栓或血管内皮损伤.结论 该法可以成功的实现大鼠肾动脉远距离插管,零距离无创伤性局部血管给药,同时还可以推广用于腹腔的某些其它脏器甚至更远的后肢.     

小鼠特应性皮炎建模方法的改进

目的用卵清蛋白(OVA)致敏小鼠特应性皮炎(atopic dermatitis,AD),建立一种更为简便、稳定的小鼠AD模型。方法采用6周龄BALB/c雌性小鼠,第1日腹腔注射200μg/m L OVA溶液0.5 m L系统致敏,第6日皮下注射100μg/m L OVA溶液0.5 m L再次致敏。并于第18、39日背部局部贴含50μL,1 000μg/m LOVA的1.5 cm2的无菌纱布,每日更换,分2次局部致敏,各持续1周。第46日,观察小鼠皮肤及其病理学改变,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中总Ig E水平,统计成模率及动物死亡情况。结果 AD模型小鼠皮肤肉眼可见潮红、脱屑、偶见结痂等皮炎改变;病理可见表皮细胞增厚,过度角化,真皮内淋巴细胞等浸润。模型组小鼠血清总Ig E水平为(6 296.17±1 021.28)ng/L,显著高于空白对照组的(1 280.97±501.24)ng/L和生理盐水组的(1 327.57±629.71)ng/L(均P0.01)。成模率为94%,死亡率6%。结论该方法可以成功建立小鼠AD模型,造模方法简单,成模率高。     

缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑神经细胞凋亡及脑组织中Rho GDP解离抑制因子和Bcl-2表达的变化

目的 研究Rho GDP解离抑制因子(Rho GDP dissociation inhibitor 2,RhoGDI2)mRNA 及Bcl-2 mRNA的表达在缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)中的作用和机制.方法 30只新生7日龄SD大鼠按照完全随机化方法分为假手术组及HIBD 6 h和48 h组,每组10只.采用流式细胞仪检测脑细胞凋亡情况,并用Real-time RT-PCR方法测定脑组织中RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平.结果 (1)新生大鼠HIBD后48h结扎侧大脑半球脑水肿明显.(2) HIBD6 h出现典型的凋亡细胞峰,细胞凋亡率为(1.40±0.12)％.HIBD 48 h凋亡峰更为明显,细胞凋亡率达到( 15.86±0.98)％.缺氧缺血后与假手术组相比,差异有统计学意义(P＜0.01).(3)假手术组大鼠RhoGDI2和Bcl-2 mRNA表达水平较高(4.12±0.74、2.55±0.65),在HIBD 6 h后二者表达开始下降(3.19±0.77、1.96±0.36),48 h降低更加明显(1.04±0.18、1.06±0.17),与假手术组比较,HIBD各时间点RhoGDI2和Bcl-2 mRNA的表达均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).(4)缺氧缺m后各时间点RhoGDI2 mRNA的表达和Bcl-2 mRNA的表达呈正相关(r=0.831,P＜0.05).结论 脑缺氧缺血后,随着凋亡的出现,RhoGDI2和Bcl-2 mRNA表达水平降低,提示Rh0GDI2表达失衡可能通过Bcl-2参与新生大鼠HIBD中凋亡的发生.