低频超声联合SonoVue微泡促进裸鼠基因体内转染的可行性

目的 探讨利用低频超声联合SonoVue微泡造影剂促进基因转染人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤的可行性。方法 采用人前列腺癌PC-3细胞建立裸鼠皮下移植瘤模型,成瘤后随机分为空白组（仅注射生理盐水）、单纯质粒组（注射生理盐水和质粒混悬液）、低频超声组（注射生理盐水和质粒混悬液后超声辐照）和低频超声+微泡组（注射超声微泡造影剂和质粒混悬液后超声辐照）。超声辐照条件：功率3 W/cm²,占空比5：5,频率80 kHz,辐照10 min。基因转染3天后在激光共聚焦显微镜下观察各组绿色荧光蛋白表达情况,并分析其平均荧光强度;同时行常规病理检查,观察低频超声联合微泡辐照对组织的损伤程度。结果 4组中,仅低频超声+微泡组可见明显绿色荧光,与其他各组差异均有统计学意义（P均<0.05）;空白组、单纯质粒组和低频超声组均未见明显绿色荧光。各组均未见明显组织损伤。结论 SonoVue微泡造影剂在低频超声辐照下能够安全有效地促进pEGFP基因转染进入人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤组织内。     

低频低功率超声联合微泡对DU145细胞及PC3细胞早期凋亡的影响

目的比较低频低功率超声联合微泡造影剂对人前列腺癌DU145细胞与PC3细胞早期凋亡率的不同影响。方法使用低频低功率超声连续波辐照人前列腺癌DU145细胞和PC3细胞悬液60 s,实验中两种细胞系各分为4组:空白对照组(A组)、单纯微泡组(B组)、单纯超声组(C组)和超声联合微泡组(D组),辐照后细胞继续培养24 h,流式细胞仪检测细胞早期凋亡情况,透射电镜观察细胞形态改变。结果两种细胞D组的早期细胞凋亡率明显高于其余各组(P﹤0.01),C组亦均高于A组(P﹤0.05),A、B组之间差异无统计学意义;两种细胞经相同处理后,C、D组PC3细胞的早期细胞凋亡率均高于DU145细胞(P﹤0.01)。透射电镜下两种细胞D组可见癌细胞体积变小变圆,空泡增多,有明显的凋亡小体形成,PC3细胞内还可见大量的自噬体出现。结论低频低功率超声联合微泡造影剂能明显诱导人前列腺癌细胞的早期凋亡,且对PC3细胞早期细胞凋亡作用强于DU145细胞。     

微小RNA-182通过靶基因Rac1调控高糖诱导的心肌细胞肥大

目的 探讨微小RNA(miR)-182调控高糖诱导的心肌细胞肥大的机制.方法 利用生物信息学方法预测调控Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)的候选miR.在糖尿病组小鼠(db/db小鼠)和对照组小鼠(db/m小鼠)心肌组织中验证所有候选miR的表达,并分别与Rac1 mRNA做Pearson相关性分析.体外实验,将原代培养的乳鼠心肌细胞分为对照组(葡萄糖浓5 mmol/L)和高糖组(葡萄糖浓度33 mmol/L,HG组).光镜下观察各组乳鼠心肌细胞的形态学变化.采用实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组乳鼠心肌细胞中miR-182和Rac1 mRNA表达水平.再将原代乳鼠心肌细胞分为4组,分别为正常糖组(葡萄糖浓度5 mmol/L,对照组)、高糖组(葡萄糖浓度33mmol/L,HG组)、正常糖+miR-182模拟物组(miR-182组)和高糖+miR-182模拟物组(HG+ miR-182组).采用Lipofectamine2000转染miR-182模拟物(终浓度为100 nmol/L).分别采用RT-PCR和蛋白免疫印迹法检测乳鼠心肌细胞中Rac1、β-肌球蛋白重链(β-MHC)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA和蛋白表达水平.结果 生物信息学方法预测到参与调控Rac1的候选miR共6个,分别为miR-182、miR-142-3p、miR-140、miR-101a、miR-429和miR-200b.糖尿病组小鼠心肌组织中miR-182和miR-142-3pmRNA表达水平均明显低于对照组(P均＜0.05),且miR-182、miR-142-3p mRNA均与Rac1 mRNA表达水平呈负相关(相关系数分别为r=-0.89102,r=-0.837 19),miR-182与Rac1负相关性最为显著.体外实验结果显示HG组乳鼠心肌细胞中miR-182 mRNA表达水平明显低于对照组(P＜0.05),Rac1 mRNA表达水平则明显高于对照组(P＜0.05);光镜下观察HG+ miR-182组乳鼠心肌细胞肥大程度轻于HG组;HG+ miR-182组乳鼠心肌细胞Rac1和β-MHC mRNA及蛋白表达水平均明显高于HG组(P均＜0.05).结论 miR-182可能通过其靶基因Rac1对高糖诱导的心肌细胞肥大进行调控.     

输尿管软镜碎石术围手术期肾彩色多普勒超声血流动力学评价

目的　彩用彩色多普勒超声（CDFI）对单发肾结石患者输尿管软镜碎石术围手术期肾血流动力学的评价。 方法　分析2016年7月至2018年6月共61例输尿管软镜碎石手术的单发肾结石患者,应用CDFI观察围手术期术侧肾叶间动脉血流参数,记录术前1 d、术后1 h内及术后5 d叶间动脉血流参数,并进行统计学分析。 结果　围手术期肾叶间动脉血流参数整体分析,收缩期峰值流速（Vmax）、舒张末期流速（Vmin）及阻力指数（RI）数值差异分别具有统计学意义（P<0.05）。与术前血流参数相比,术后1 h叶间动脉Vmax及Vmin均减低,RI增高（P<0.017）,术后5 d复查,Vmax及Vmin较术后1 h升高、RI较术后1 h减低（P<0.017）,与术前测值相比差异无统计学意义（P>0.017）。 结论　CDFI可以观察并量化输尿管软镜碎石术围手术期肾内动脉灌注,快速评价术侧肾血流动力学变化,手术后会出现短期、可逆性肾叶间动脉流速减低、RI增高。     

细胞及瘤块种植人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤模型的比较

目的 比较细胞悬液法及瘤块法种植裸鼠前列腺癌皮下移植瘤,以期获得使瘤体生长最快,质量最佳的种植方式.方法 采用细胞悬液及瘤块两种方式种植PC-3细胞人前列腺癌皮下移植瘤,比较两种种植方法所种植的移植瘤的成瘤率、成瘤潜伏期、瘤体形态以及移植瘤的中心坏死灶,同时对两种方法种植的皮下移植瘤进行常规病理学检查.本研究同时观察了PC-3细胞悬液浓度对于种植皮下移植瘤成瘤的影响.结果 两种方式种植的移植瘤的成瘤率差异无统计学意义,采用瘤块种植的移植瘤生长较细胞种植稍快,瘤体形态各异,较容易发生中心性坏死;细胞悬液组成瘤稍慢,瘤体较规则,多呈圆形或椭圆形,发生中心性坏死较晚,而且随着细胞浓度增高,其成瘤潜伏期明显缩短.结论 通过比较发现细胞悬液种植皮下移植瘤较瘤块种植更有优势,而且采用较高浓度细胞悬液种植可以有效缩短成瘤潜伏期,是一种较为理想的种植方式.     

MiR-182模拟物提高1型糖尿病小鼠的心脏功能

目的 探讨miR-182模拟物对1型糖尿病小鼠心脏功能的影响及可能作用机制。方法 40只8周龄雄性C57小鼠随机分为正常对照组（n=5）,miR-182模拟物对照组（n=5）,1型糖尿病组（n=15）,1型糖尿病+miR-182模拟物治疗组（n=15）。腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立1型糖尿病动物模型。实验于8周末结束,采用小动物用高分辨超声仪测量小鼠心脏功能;运用透射电镜观察心肌组织超微结构改变;利用real-time PCR技术检测心肌组织β-肌球蛋白重链（β-MHC）,α-肌球蛋白重链（α-MHC）,心房钠尿肽（ANP）,Ⅰ型（Col Ⅰ）和Ⅲ型胶原（Col Ⅲ） mRNA及miR-182 mRNA的表达含量。结果 ①miR-182模拟物可改善1型糖尿病小鼠的心脏功能,增加心脏射血分数及左室短轴缩短率（P<0.01）;②miR-182模拟物可降低糖尿病小鼠心肌组织ANP、Col I、Col Ⅲ的表达及β/a-MHC比值（P<0.01）;③miR182模拟物可改善1型糖尿病小鼠心肌超微结构变化,减轻自噬。结论 MiR-182模拟物能改善1型糖尿病小鼠的心脏功能,其机制可能与减轻心肌肥大和心肌纤维化,减轻线粒体结构损伤及减轻自噬有关。     

信息动态

1 病例报告 患者男,57岁.因发现左侧腹股沟区肿物1年,进行性增大半年于2016-02-22入陕西省人民医院.既往体健.入院查体示,左侧腹股沟区可触及一大小约6 cm×7 cm包块,质硬,表面欠光滑,与周围组织粘连固定,无触痛,同侧阴囊增大,约7 cm×8 cm,呈囊性,表面光滑,未触及睾丸及附睾,无触痛,平卧位体积无变化,同侧精索增粗.常规实验室及结核生化检查无异常,肿瘤标志物无升高.B超提示,左侧附睾头位置及腹股沟区低回声包块,多考虑占位性病变,左侧睾丸鞘膜积液(图1A和图1B).盆腔平扫及增强CT示,左侧腹内斜肌下缘及左侧耻骨肌肿胀,考虑占位性病变(图1C和图1D).全身骨扫描未见异常代谢.综合分析入院诊断为左腹股沟区肿物待查.     

经会阴动态三维超声对便秘的产后女性盆底解剖结构重塑的观察

目的经会阴盆底三维超声动态观察便秘产妇的肛提肌裂孔解剖形态重塑及功能改变。方法选取2014年7月至2017年6月在我院妇产科定期行产后复查的女性110例(产后组),其中有便秘症状45例(便秘产妇),无便秘症状65例(无便秘产妇),同期选取未育的无便秘症状健康妇女100例(对照组)。所有妇女均进行经会阴盆底三维超声检查,观察并测量比较各组妇女的盆底解剖形态结构及特征,测量各组妇女在静息状态、缩肛动作和Valsalva动作3种状态下的肛提肌裂孔面积、周长及肛提肌厚度。结果产后妇女盆底组织结构疏松,对照组妇女肛提肌裂孔结构完整紧凑。在静息状态、缩肛动作及Valsalva动作3种状态下,产后组妇女的肛提肌裂孔面积、周长及肛提肌厚度均明显大于对照组妇女,差异均有统计学意义(P0.05)。产后组便秘产妇在3种状态下的肛提肌裂孔面积及周长均明显大于无便秘产妇(P0.05);在缩肛动作时便秘产妇的肛提肌厚度明显薄于无便秘产妇(P0.05),在静息状态及Valsalva动作时,便秘产妇与无便秘产妇的肛提肌厚度比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论产后妇女盆底解剖结构发生重塑,经会阴三维超声能有效观察产后女性尤其便秘产妇盆底解剖结构与功能的变化。