1例产后哺乳期腹泻患者分离单增李斯特菌的生物学特征分析

目的 分析1例单增李斯特菌所致产后哺乳期腹泻患者的临床特征、病原学、菌株的毒力基因携带及分子特征。方法 搜集病例的临床相关信息;采用选择性增菌和显色培养基分离单增李斯特菌,用VITEK- 2 COMPACT30 全自动细菌分析仪鉴定分离菌株,采用单增李斯特菌诊断血清对分离株进行血清分型,使用脉冲场凝胶电泳技术及多位点序列分型技术进行分子分型,应用PCR检测毒力基因,并用E-test方法检测分离菌株对5种抗生素的药物敏感性。结果 产后哺乳期患者食用甜瓜和冰箱冷藏的酸奶后引起不能自限的腹泻,检测结果证实病原为4b血清型、ST145序列型单增李斯特菌。分离菌株携带毒力基因plcB、act、hly、iap、prfA、inlA,对青霉素、氨苄西林、美罗培南、红霉素和复方磺胺均敏感。结论 单增李斯特菌引起的腹泻患者容易漏诊,加强孕妇等高危人群腹泻患者粪便标本中单增李斯特菌的检测,对于单增李斯特菌病病人的及时治疗,预防不良预后具有重要的公共卫生意义,尤其对这一特殊型别单增李斯特菌在我国引起的病例感染应引起重视,其可能的感染来源和致病风险值得进一步的研究。     

脑源性神经营养因子与腹膜透析患者认知功能障碍的相关性分析

目的：探讨脑源性神经营养因子（BDNF）与持续性非卧床腹膜透析（CAPD）患者认知功能障碍的相关性。方法：以CAPD患者为研究对象,采用中文版蒙特利尔认知评估量表（MoCA）调查其认知功能,并检测血清BDNP水平,采用相关分析法探讨CAPD患者认知功能与BDNP的相关性。结果：（1）98例CAPD患者中伴有认知功能障碍者58例,占59．18％。（2）CAPD组MoCA总分、注意力、延迟回忆和抽象评分显著低于健康对照组,差异均有统计学意义（P＜0．05）。（3）CAPD伴认知功能障碍组和CAPD不伴认知功能障碍组的BDNF均显著低于健康对照组,差异有统计学意义（P＜0．01）;CAPD伴认知功能障碍组的BDNF显著低于CAPD不伴认知功能障碍组,差异有统计学意义（P＜0．01）。（4）血清BDNF与MoCA总分、注意力、延迟回忆和抽象均显著正相关（P＜0．05）。结论：CAPD患者认知功能障碍患病率较高,BDNF可能与CAPD患者认知功能障碍有美．     

建立检测产气肠杆菌的TaqMan荧光定量PCR和普通PCR方法

目的 建立敏感、特异的普通聚合酶链反应(PCR)方法和TaqMan 荧光定量PCR方法对产气肠杆菌进行快速检测。方法 以产气肠杆菌组氨酸脱氢酶基因(hdc)为靶基因设计引物以及TaqMan FAM探针,建立对产气肠杆菌进行检测的普通PCR方法和TaqMan 荧光定量PCR方法,并评价该方法的特异性、灵敏性和稳定性。结果 普通PCR和TaqMan 荧光定量PCR方法均能对产气肠杆菌进行特异检测;普通PCR方法对质粒标准品和粪便模拟标本的检测下限分别为 100 copies/l和1.0105 cfu/g,TaqMan 荧光定量PCR方法对质粒标准品和粪便模拟标本的检测下限分别为33 copies/l和1.0104 cfu/g;TaqMan 荧光定量PCR方法对质粒标准品和粪便模拟标本检测的扩增曲线良好;在稳定性评价试验中,普通PCR方法的重复性良好,TaqMan 荧光定量PCR方法对质粒标准品检测Ct值的组内差异为0.15%~0.98%,组间差异为0.55%~1.63%。结论 本研究建立的检测产气肠杆菌的普通PCR方法和TaqMan 荧光PCR方法特异性好、灵敏度高,能够用于产气肠杆菌的快速检测。     

李斯特菌感染病例的临床及病原学分析

目的分析单核细胞增生李斯特菌(LM)感染患者临床及其LM病原学特征。方法收集北京协和医院LM感染患者信息及其LM菌株,对菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型、血清学、毒力基因检测。结果 18例李斯特菌感染患者中,妊娠相关病例4例,其中2例死胎。14例非妊娠相关病例中,男、女各7例,年龄19～77岁;均患有基础疾病;3例预后不良。18株LM临床分离株的PFGE型别均为数据库中已有带型; 6例入院48 h后起病的患者LM菌株中,存在PFGE同型菌株,需进一步全基因测序对其进行同源性分析。结论李斯特菌感染多累及老人、孕妇、新生儿和免疫功能低下者,临床医师需引起重视。当经验用药未果时,需考虑是否为LM感染。李斯特菌对青霉素类敏感,该类药物可作为治疗李斯特菌经验用药的首选。     

维持性血液透析和维持性腹膜透析患者脂代谢特征及其与营养状况关系的临床研究

目的：比较维持性血液透析（MHD）和维持性腹膜透析（CAPD）患者脂代谢紊乱的异同,探讨各自脂代谢紊乱的特征及其与营养状况的关系。方法：选取2009年7月～2009年10月门诊行MHD的124例患者和行CAPD的65例患者为研究对象。观察指标包括：（1）脂代谢指标：包括胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、载脂蛋白A（Apo-A）和载脂蛋白B（Apo-B）;（2）营养指标：包括营养不良炎症评分（MIS）、肱三头肌皮褶厚度（TSF）、中臂围（MAC）、中臂肌围（AMC）和血清白蛋白（Alb）。结果：（1）MHD患者高TG的发生率为25%,低HDL和低Apo-A发生率分别为72.58%和67%;CAPD组高TC、TG、LDL发生率分别为32.31%、38.46%和35.38%,低LDL、HDL和Apo-A发生率分别为43.08%、73.85%和55.38%;（2）CAPD组的TC、TG、LDL和Apo-A均高于MHD组,差异有统计学意义（P〈0.05）。（3）MHD组MIS低于CAPD组,差异有统计学意义（P〈0.05）;MHD组MAC、MAMC和Alb高于CAPD组,差异有统计学意义（P〈0.05）,两组间TSF差异无统计学意义（P〉0.05）。（4）MHD组TG、HDL和Apo-A与MIS显著负相关（P〈0.05）,与Alb和HDL显著正相关（P〈0.05）。PD组脂代谢指标与MIS和Alb等营养指标无相关性（P〉0.05）。结论：脂代谢紊乱是MHD和CAPD患者常见的并发症。MHD患者脂代谢紊乱的特征是高TG、低HDL和低Apo-A,而高TC却不常见。CAPD患者脂代谢紊乱特征是高TC、高TG和高LDL并存,低LDL、低HDL和低Apo-A并存。CAPD患者脂代谢紊乱和营养不良较MHD患者严重。TG、HDL和Apo-A是可用来评价MHD患者营养状况的指标,而脂代谢指标不能放映PD患者的营养状况。     

甲氧氯普胺加入腹透液中对腹膜透析患者食欲及营养状况的影响

目的：探讨甲氧氯普胺加入腹透液中对腹膜透析患者食欲及营养状况的影响。方法：将食欲明显减退的腹膜透析患者为研究对象,随机分成观察组52例和对照组52例,两组常规治疗相同,观察组予甲氧氯普胺注射液10 mg/d加入腹透液中,疗程为4周。比较两组治疗前和治疗后3月的食欲和血白蛋白、体重指数（BMI）、中臂围、中臂肌围、肱三头肌皮褶厚度（TSF）、改良定量主观整体评估（MQSGA）等营养指标的差别。结果：（1）观察组总有效率（90.39%）显著高于对照组（69.23%）,差异有统计学意义（P〈0.05）;（2）观察组治疗后白蛋白、BMI、中臂围、中臂肌围和TSF均较治疗前显著升高,MQSGA较治疗前显著下降,差异均有统计学意义（P〈0.05）;对照组治疗后白蛋白较治疗前显著升高,MQSGA较治疗前显著下降,差异均有统计学意义（P〈0.05）;治疗后,观察组白蛋白显著高于对照组,MQSGA显著低于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）;（3）两组均未见明显药物不良反应。结论：甲氧氯普胺加入腹透液中可改善腹膜透析患者食欲和营养状况。     

奶牛粪便分离的伊氏李斯特菌伊氏亚种基因组序列测定及其分子特征分析

目的 了解某奶牛场奶牛粪便中李斯特菌的携带情况及其分离株的遗传特征。方法 用ISO 11290方法分离196份奶牛粪便样本中的李斯特菌,对分离的伊氏李斯特菌进行全基因测序,用MEGA6.0构建系统发育树,网站在线比对分析伊氏李斯特菌株的毒力基因、耐药基因及前噬菌体等。结果 196份奶牛场养殖的奶牛粪便样本中有9份样本为李斯特菌阳性,其中3株为伊氏李斯特菌伊氏亚种,6株为英诺克李斯特菌,分离率分别为1.53%和3.06%。3株伊氏李斯特菌伊氏亚种分离株具有包括LIPI-1和LIPI-2在内的绝大部分致病性李斯特菌毒力相关基因,携带一个不完整的前噬菌体及22个耐药相关基因。结论 养殖场奶牛粪便中携带伊氏李斯特菌伊氏亚种。对伊氏李斯特菌伊氏亚种分离株的全基因组、毒力基因、耐药基因、前噬菌体基因等遗传特征分析,为进一步分析其致病性提供了参考。     

73例次腹膜透析相关性腹膜炎的致病菌及药敏分析

<正>腹膜透析(PD)作为终末期肾病(ESRD)肾脏替代治疗的一种方式,目前临床应用已越来越普及,随着2013年国家卫计委"天使展翼"项目的启动,及发达国家PD优先的观点在中国的传播,PD可能会成为我国ESRD患者首选的肾脏替代治疗方案,但PD相关性腹膜炎依然是目前PD技术失败及患者死亡的重要原因。近些年来,随着抗菌药物的使用,PD相关性腹膜炎的细菌谱及耐药性发生了变化。2010年国际腹膜透析协     

某医院72株阴沟肠杆菌临床菌株分子型别与耐药特征分析

目的 分析72株阴沟肠杆菌临床菌株分子型别和耐药特征,为流行病学及临床研究提供参考依据。方法 通过热休克蛋白基因和肽指纹图谱进行分子分型;采用琼脂药敏纸片法分析耐药表型;利用PCR扩增法对20个耐药基因进行检测;运用SAS软件对数据进行统计学分析。结果 72株阴沟肠杆菌临床菌株分为2个分支9个基因群,以分支1（基因群Ⅲ、Ⅵ和Ⅷ）菌株为主（50株,69.4%）。临床菌株对一至三代头孢、氨苄西林/舒巴坦具有较高的耐药率,对另外9种抗生素较为敏感。共检测到8个耐药基因（mir-act、dha、shv、tem、ctx-M、qnrA、qnrB和qnrS）。通过组内统计学分析发现,各型别菌株的临床分布、耐药率和耐药基因携带率不完全相同,差异有统计学意义。结论 通过两种分型方法,阴沟肠杆菌临床菌株中存在优势型别,不同型别的菌株在耐药率和耐药基因携带率上存在差异。     

Ang1-7、A779、AngⅡ对胰岛素抵抗的大鼠卵巢颗粒细胞胰岛素信号通路蛋白的影响

目的探讨Ang1-7、Mas受体拮抗剂A779、AngⅡ作用后,对胰岛素抵抗的大鼠卵巢颗粒细胞葡萄糖摄取及胰岛素信号通路蛋白的影响。方法①构建大鼠卵巢颗粒细胞胰岛素抵抗模型:将颗粒细胞分为空白组和模型组,模型组细胞用地塞米松、胰岛素进行处理,检测两组细胞培养基上清液24 h内葡萄糖浓度、乳酸浓度的差值。②进一步将模型组细胞分别加入不同药物处理24 h:AngⅡ组、Ang1-7组、Ang1-7+AngⅡ组、A779组、Ang1-7+A779组,并检测药物作用后细胞培养基上清液24 h内葡萄糖浓度差值。③采用Western blotting检测空白组、模型组、各药物处理组颗粒细胞Akt、GSK-3β、AS160及其磷酸化蛋白(P-Akt、P-GSK-3β、P-AS160)以及Mas受体蛋白的表达。结果①跟空白组相比,模型组的葡萄糖浓度差值小、乳酸浓度差值小,提示颗粒细胞胰岛素抵抗模型建立成功。②与模型组比较,Ang1-7组葡萄糖浓度差值大(5.55±0.21,P=0.0021),AngⅡ组差值小,Ang1-7+AngⅡ组、A779组差异无统计学意义(P>0.05),Ang1-7+A779组葡萄糖浓度差值小(4.89±0.20,P=0.0108)。③空白组、模型组、各药物处理组颗粒细胞的Akt、GSK-3β、AS160的表达无明显差异。与模型组比较,Ang1-7组P-Akt、P-GSK-3β、P-AS160的表达增强,AngⅡ组P-Akt、P-GSK-3β、P-AS160的表达减弱。与Ang1-7组比较,Ang1-7+A779组Mas受体表达量降低。结论①Ang1-7作用后,胰岛素抵抗的大鼠卵巢颗粒细胞葡萄糖浓度差值增加,AngⅡ作用后与Ang1-7相反,二者相互拮抗,同时Ang1-7、AngⅡ作用后颗粒细胞胰岛素信号通路关键蛋白P-Akt、P-GSK-3β及P-AS160也出现相反变化,表明通过细胞葡萄糖浓度差值体现的细胞葡萄糖代谢有可能是胰岛素信号通路蛋白P-Akt、P-GSK-3β及P-AS160表达变化的结果。②Ang1-7作用后受体Mas表达上调,加入Mas受体拮抗剂A779,细胞葡萄糖代谢受抑制,P-Akt、P-GSK-3β及P-AS160表达降低,提示Ang1-7改善葡萄糖代谢过程中,有受体Mas参与。