早期康复训练后大鼠脑缺血半影区生长蛋白Gap-43及突触素P38 mRNA表达的变化(英文)

背景:近年来证实,成熟大脑在存活期间仍具有再生的可塑性,即结构和功能的重建。发育成熟的中枢神经系统,在脑缺血时Gap-43表达水平是评估轴突损伤和再生反应的一个重要指标。缺血性脑卒中后神经功能的恢复与脑的可塑性有关。目的:探讨早期康复训练对大鼠脑缺血半影区与神经重塑有关的生长蛋白Gap-43和突触素P38mRNA的影响。设计:随机对照实验。单位:青岛大学医学院人体解剖学教研室。材料:实验于1999-12/2002-06在青岛大学医学院神经解剖实验室完成。选取成年健康雌性Wistar大鼠52只,随机分为假手术组4只,康复治疗组24只,自然恢复组24只。方法:康复治疗组和自然恢复组采用线栓法经颈外动脉插入4-0尼龙线建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型,假手术组除尼龙线插不到起始部位外,其余步骤相同。动物苏醒后出现左侧Horner征,提尾时右前肢内收屈曲,爬行时向右划圈为手术成功的标志。假手术组于术后24h取材;康复治疗组大脑中动脉闭塞120min再灌注6h后置于MG迷宫中进行康复训练,2次/d,10～20min/次,保证动物不疲劳,于术后6h,1,3,7,14,21d取材;自然恢复组术后120min再灌注6h,1,3,7,14,21d取材,作为自然病程对照。常规制作石蜡切片进行尼氏染色,应用VIDAS21显微图像处理系统测定缺血半影区的反应产物吸光度(A)值,以同一张切片上未受损胼胝A值为背影,减去背影A值,得到校正A值。对缺血中心区的免疫活性未作量化处理。主要观察指标:①主要结局:脑缺血半影区生长蛋白Gap-43及突触素P38mRNA原位杂交检测结果。②次要结局:康复治疗组缺血半影区细胞形态学观察。结果:实验纳入的52只大鼠全部进入结果分析。①脑缺血再灌注后不同时间点各组缺血半影区生长蛋白Gap-43和P38mRNA的表达:假手术组皮质区着色浅,Gap-43和P38mRNA表达的校正A值分别为0.37±0.12,0.70±0.14;自然恢复组Gap-43和P38mRNA表达均于术后6h和3d开始增高,第7天达到高峰,第14天开始降低。康复治疗组Gap-43和P38mRNA的表达在缺血再灌注后6h,1,3,7,14,21d均高于同期自然恢复组,但仅在第14天差异显著(1.19±0.60,0.87±0.18,t=4.13,P<0.05)。②康复治疗组细胞形态学观察结果:低倍镜下可见缺血中心区神经细胞坏死,缺血半影区神经细胞的密度降低,神经元缺血样变性。胞体缩小呈三角形、扇形或长条形,细胞核固缩深染、核仁不清,胞浆呈空泡状。皮质神经元表现为胞浆疏松,核轻度变形、深染。变性神经元与正常神经元共存。手术14d后缺血中心区和半影区可见大量胶质细胞增生。结论:与神经重塑有关的Gap-43和P38mRNA在局部脑缺血再灌注后缺血半影区的表达十分活跃。早期康复训练能够使Gap-43和P38mRNA神经突起出芽并形成新的突触,从而增加脑的可塑性,可能涉及脑缺血后肢体功能的恢复。     

神经调节素对缺血性脑损伤大鼠COX-2表达的影响

目的探讨神经调节素对大鼠局灶性脑缺血再灌注后COX-2表达的影响。方法实验分为假手术组、对照组和治疗组。采用线栓法制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞再灌注（MCAO-R）模型,治疗组给予神经调节素干预治疗。于缺血1 h再灌注6 h1、2 h1、d、2 d、3 d7、d、14 d,对照组和治疗组采用免疫组化和原位杂交技术分别检测COX-2蛋白及COX-2 mRNA的表达。结果假手术组脑组织可见到少量COX-2阳性细胞。对照组缺血再灌注6 h后COX-2阳性细胞数开始增加,再灌注2 d后达高峰,然后阳性细胞逐渐减少,至14 d仍有表达。治疗组COX-2阳性细胞数相对较少,变化规律与对照组相似,同一时间点比较,治疗组均显著低于对照组（t=2.558~6.795,P〈0.05）。结论神经调节素可能通过抑制脑缺血再灌注后COX-2的表达,发挥其神经保护作用。     

解剖学实验教学改革与实践

人体解剖学是形态科学,其实验室建设及实验课的教学尤为重要。为了激发学生对专业课的学习兴趣和培养学生的动手、分析及解决问题的能力,对解剖学实验室建设及实验教学手段及考核方式作出较系统的改革。     

颈后纵韧带交感神经分布特点及临床意义

目的探讨交感神经在人颈后纵韧带的分布特点及临床意义。方法新鲜胎儿尸体6具,分别从C2/3、C4/5、C6/7三点取后纵韧带,每点先取一张切片进行氯化金染色确定神经的存在,再采用乙醛酸法对冷冻切片交感神经进行特异性染色。借助Simple PCI图像分析系统进行半定量分析。结果胎儿颈后纵韧带上有大量交感神经分布,或纵形排列或交织成网。交感神经分布密度为C2/3>C4/5>C6/7(F=6.13,P<0.05)。结论分布于颈后纵韧带上的交感神经受颈椎节段不稳或骨质增生激惹,可能在颈椎病颈性眩晕中起重要作用。     

定量咬合干扰对颞下颌关节早期损伤的实验研究

目的 研究咬合干扰及干扰的量对家兔颞下颌关节早期损伤的影响。方法 采用0.15mm,0.18mm,0.20mm厚的金属冠He板粘接于A、B、C三组家兔左下第一至第三磨牙He面形成咬合干扰,第三天处死家兔,取双侧颞下颌关节连续切片HE染色,光镜观察滑膜组织变化。结果 0.15mm组家兔颞下颌关节的滑膜与空白对照组比较无明显变化;0.18mm组滑膜变化以轻度渗出为主;0.20mm组左侧滑膜变化除渗出外可见增生,右侧滑膜变化主要表现为渗出。结论 高于0.18mm厚的咬合干扰对家兔颞下颌关节能产生早期损伤,表现为滑膜渗出和增生性炎症反应,安装咬合干扰装置侧比对侧产生的反应重,病变部位主要在关节囊-关节盘移行部滑膜。     

早期康复训练后大鼠脑缺血半影区生长蛋白Gap-43及突触素P38 mRNA表达的变化

背景：近年来证实，成熟大脑在存活期间仍具有再生的可塑性，即结构和功能的重建。发育成熟的中枢神经系统，在脑缺血时Gap-43表达水平是评估轴突损伤和再生反应的一个重要指标。缺血性脑卒中后神经功能的恢复与脑的呵塑性有关。目的：探讨早期康复训练对大鼠脑缺血半影区与神经重塑有关的生长蛋白Gap-43和突触素P38 mRNA的影响。设计：随机对照实验。单位：青岛大学医学院人体解剖学教研室。材料：实验于1999—12／2002—06在青岛大学医学院神经解剖实验室完成。选取成年健康雌性Wistar大鼠52只，随机分为假手术组4只，康复治疗组24只，自然恢复组24只。方法：康复治疗组和自然恢复组采用线栓法经颈外动脉插入4—0尼龙线建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型，假手术组除尼龙线插不到起始部位外，其余步骤相同。动物苏醒后出现左侧Homer征，提尾时右前肢内收屈曲，爬行时向右划圈为手术成功的标志。假手术组于术后24h取材；康复治疗组大脑中动脉闭塞120min再灌注6h后置于MG迷宫中进行康复训练，2次／d，10-20min／次，保证动物不疲劳，于术后6h，1，3，7，14，21d取材；自然恢复组术后120min再灌注6h，1，3，7，14，21d取材，作为自然病程对照。常规制作石蜡切片进行尼氏染色，应用VIDAS 21显微图像处理系统测定缺血半影区的反应产物吸光度（A）值，以同一张切片上未受损胼胝A值为背影，减去背影A值，得到校正A值。对缺血中心区的免疫活性未作量化处理。主要观察指标：①主要结局：脑缺血半影区生长蛋白Gap-43及突触素P38 mRNA原位杂交检测结果。②次要结局：康复治疗组缺血半影区细胞形态学观察．结果：实验纳入的52只大鼠全部进入结果分析。①脑缺血再灌注后不同时间点各组缺血半影区生长蛋白Gap-43和P38 mRNA的表达：假手术组皮质区着色浅，Gap-43和P38 mRNA表达的校正A值分别为0．37&;#177;0．12，0．70&;#177;0．14；自然恢复组Gap-43和P38 mRNA表达均于术后6h和3d开始增高，第7天达到高峰．第14天开始降低：康复治疗组Gap-43和P38 mRNA的表达在缺血再灌注后6h，1，3，7，14，21d均高于同期自然恢复组，但仅在第14天差异显著（1．19&;#177;．60，0．87&;#177;0．18，t=4．13，P〈0．05）。②康复治疗组细胞形态学观察结果：低倍镜下可见缺血中心区神经细胞坏死，缺血半影区神经细胞的密度降低，神经元缺血样变性。胞体缩小呈三角形、扇形或长条形，细胞核固缩深染、核仁不清，胞浆呈空泡状：皮质神经元表现为胞浆疏松，核轻度变形、深染。变性神经元与正常神经元共存。手术14d后缺血中心区和半影区可见大量胶质细胞增生。结论：与神经重塑有关的Gap-43和P38 mRNA在局部脑缺血再灌注后缺血半影区的表达十分活跃。早期康复训练能够使Gap-43和P38 mRNA神经突起出芽并形成新的突触，从而增加脑的可塑性，可能涉及脑缺血后肢体功能的恢复。     

人右心室节制索的观察

心脏外科手术多取右心室入路,术后可引起右束支阻滞,已日益为大家所重视。如何防止此并发症的发生是大家所关心的问题。由于右束支主干行于节制索上,因此手术时如何确认其位置,了解其形态变异及与右束支的关系,无疑是防止右束支阻滞的重要解剖基础。为此,我们观察了人心节制索的一些形态特点。     

醒脑静合生脉注射液对大鼠脑出血后脑组织内水通道蛋白表达的影响

目的:探讨醒脑静合生脉注射液对大鼠脑出血后脑组织内水通道蛋白-4(AQP4)表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为脑出血组(ICH)、生理盐水组(NS)、醒脑静合生脉注射液治疗组(XNJSM)、水蛭素治疗组(HIR),每组10只大鼠。采用自体不凝血注入法复制脑出血模型,造模后6 h,XNJSM组ip醒脑静合生脉注射液2 mL.kg-1+10 mL.kg-1(按1∶5比例混合),1次/d,连续3 d;HIR组给予脑内注入水蛭素10 U(5μL)1次。术后72 h取脑组织,HE染色观察各组血肿周围神经细胞形态学改变,免疫组化法及免疫印迹(Western blot)法检测各组血肿周围脑组织AQP4的表达。结果:脑出血后72 h脑组织内AQP4阳性细胞及蛋白表达与NS组比较明显增加(P<0.05),XNJSM组、HIR组脑组织病理形态明显改善,脑组织AQP4表达减少,与ICH组比较差异均有显著性(P<0.05)。结论:醒脑静合生脉注射液能够有效抑制大鼠脑出血后AQP4蛋白的表达,减轻脑水肿,对脑出血后脑组织发挥保护作用。     

大鼠延髓背角和脊髓背角内PKCγ阳性神经元向中缝隐核的投射

目的研究大鼠延髓背角和脊髓背角浅层内蛋白激酶Cγ亚单位（PKCγ）阳性神经元向中缝隐核（NRO）的投射。方法应用荧光金（FG）逆行追踪和PKCγ免疫荧光组织化学染色相结合的双标记方法,观察大鼠延髓背角和脊髓背角内PKCγ阳性神经元向中缝隐核的投射。结果将FG注入NRO,在延髓背角和脊髓背角的Ⅰ-Ⅲ层内可见FG逆标神经元;PKCγ阳性神经元主要分布于延髓背角和脊髓背角的Ⅱ层内侧部及Ⅱ、Ⅲ层交界处,Ⅰ、Ⅲ层内较少;延髓背角Ⅰ层和脊髓背角Ⅰ-Ⅲ层可观察到FG逆标并呈PKCγ阳性的双标神经元。结论延髓背角和脊髓背角浅层向NRO投射的神经元为PKCγ阳性神经元,其在向NRO传递信息的通路中可能发挥重要作用。