去甲氧柔红霉素和硼替佐米对急性髓系白血病细胞凋亡及钙网蛋白表达的影响

目的研究去甲氧柔红霉素(idarubicin,IDA)、硼替佐米(bortezomibin,BOR)及联合用药对急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)不同免疫表型细胞群细胞凋亡及钙网蛋白表达的影响,为寻找有效杀伤白血病细胞的治疗方法提供部分实验依据。方法收集20例初治AML患者外周血,利用淋巴细胞分离液及密度梯度离心法分离出单个核细胞,通过流式细胞术检测CD34+CD38+细胞群、CD34~+CD38~-细胞群。用去甲氧柔红霉素和硼替佐米,以指定浓度和时间分别单独或联合作用于初发AML患者外周血单个核细胞,应用流式细胞术检测CD34~+CD38~-细胞、CD34~+CD38~+细胞的凋亡率及细胞表面钙网蛋白的表达,分析两种药物对凋亡率及免疫原性(钙网蛋白表达率)的影响。结果单药处理组间各细胞群凋亡率和钙网蛋白表达率无明显差别,明显低于联合处理组,高于空白组。去甲氧柔红霉素单药组、蛋白酶体抑制剂单药组及两药联合各处理组内CD34~+CD38~+细胞凋亡率均高于CD34~+CD38~-细胞凋亡率[(45.97±7.85)%对(20.81±1.87)%,P=0.007;(44.16±6.83)%对(21.93±4.74)%,P=0.010;(65.63±7.92)%对(41.69±3.85)%,P=0.009],钙网蛋白表达率也有同样表现[(25.31±2.73)%对(4.40±1.17)%,P0.001;(24.27±4.20)%对(4.27±0.49)%,P=0.010;(42.13±6.06)%对(22.06±2.13)%,P=0.006]。结论去甲氧柔红霉素、蛋白酶体抑制剂均能诱导白血病细胞凋亡和凋亡细胞表面钙网蛋白表达,联合用药有协同作用。CD34+CD38+细胞比CD34+CD38-细胞更易诱导凋亡及表达钙网蛋白。     

基于树突状细胞的肿瘤免疫治疗临床应用方式的研究进展

正树突状细胞(dendritic cell,DC)于1973年被发现,在抗肿瘤免疫治疗中的应用始于上个世纪80年代。从前体细胞产生DC制造了足够数量的抗原呈递细胞的方法,快速用于临床,从而产生了首个基于DC的疫苗接种研究。一般来说,这种形式的免疫治疗需要离体产生的DC负载肿瘤抗原,随后重新注射入患者,以刺激由CD8~+和CD4~+T淋巴细胞介导的抗肿瘤免疫应答。首次报道的关于     

骨髓增生异常综合征患者临床特征分析

目的 探讨细胞形态学检查、流式细胞术、细胞遗传学对MDS诊断分型的作用。方法 以2016年WHO对MDS诊断分型标准为主要参考,回顾性分析安徽医科大学附属安徽省立医院2013年5月~2017年的12月收治住院的120例成人MDS患者的临床症状、血常规、骨髓细胞学、骨髓病理、免疫表型、细胞遗传学方面的特点。结果 120例MDS患者,根据2016年WHO分类,有2例（1.67%）患者符合MDS伴单系病态造血 (MDS-SLD);有27例（22.50%）患者符合MDS伴多系病态造血 (MDS-MLD),各有3例（2.50%）和4例（3.33%）患者符合MDS伴环状铁粒幼红细胞伴单系发育异常（MDS-RS-SLD）和MDS伴环状铁粒幼红细胞伴多系发育异常（MDS-RS-MLD）,各有 34例（28.33%）和43例（35.83%）是MDS-EB-1和MDS-EB-2;2例（1.67%）单纯5q-的MDS;有5例（4.17%）患者MDS未分类。结论 骨髓细胞形态学和外周血指标仍是MDS诊断的金标准,临床症状、血常规、骨髓细胞学、骨髓病理、免疫表型、细胞遗传学的综合考虑更有利于MDS的分型诊断,并对治疗、预后判断有重要指导价值。     

老年急性单核细胞白血病个体化治疗及其预后分析

目的依据治疗方案及危险度分层,对老年急性单核细胞白血病(M5)患者预后进行综合评价,指导个体化治疗。方法回顾性分析79例年龄≥60岁初发M5患者的临床资料,其中65例患者接受诱导缓解治疗并评估疗效,依据治疗方案分为标准剂量化疗方案组、低强度化疗方案组,依据细胞遗传学或分子生物学指标分为低危、中危及高危组,分析其与临床预后的关系。结果 65例患者完全缓解(CR)率61. 5%(40/65),中位生存时间355 d,1年总生存(OS)率64. 0%,2年OS率为36. 5%,1年无病生存(DFS)率51. 2%,2年DFS率为14. 1%。标准剂量化疗方案组CR率为69. 2%(27/39),2年OS率为46. 4%、2年DFS率为11. 7%,与低强度化疗方案组的50%(13/26)、23. 3%、17. 5%,均差异无统计学意义(P 0. 05),两组不良反应发生率相当(P 0. 05)。低危组患者CR率87. 5%(14/16),中危组CR率61. 5%(16/26),高危组CR率43. 5%(10/23),差异无统计学意义(P 0. 05)。此外,低危组1年OS率、1年DFS率,2年OS率,2年DFS率,均优于中危及高危组。危险度分层内标准剂量化疗方案组与低强度化疗方案组相比:中危患者前组2年OS率优于后组(P 0. 05),低危及高危患者两治疗组CR率、2年OS率及2年DFS率差异无统计学意义(P 0. 05)。结论老年AML-M5患者中危组可从标准剂量化疗方案诱导化疗方案中受益,延长生存时间,低危组及高危组需结合患者综合情况制定个体化治疗方案。     

TLR-3激动剂联合TLR-9激动剂对树突状细胞细胞形态及免疫表型的影响

目的 了解TLR激动剂对负载CD34~+白血病细胞的DC的细胞形态及免疫表型的影响,为研究DC的功能、进一步探索体外白血病细胞免疫原性的增强提供依据。方法 收集急性髓细胞白血病初发患者(不包括M3,根据FAB分型)新鲜骨髓抗凝血3-5 mL,经密度梯度离心法分离获得外周血单个核细胞,采用免疫磁珠法分选出CD34~+细胞;体外培养获得DC,然后将DC与药物凋亡的CD34~+白血病细胞融合培养,使用Toll样受体(TLR)激动剂的不同组合(TLR-3激动剂联合TLR-9激动剂)来进一步成熟DC以获得功能性DC,观察其细胞形态和免疫表型特征。结果 ①在倒置显微镜下,成熟DC细胞体积变大,半悬浮,形状不规则,多个毛刺状突起于表面,具有成熟DC的典型形态特征;②流式检测细胞表面CD11c表达明显增加,CD14表达下调,表明DC的转化生成;③TLR3激动剂(poly I∶C)联合TLR9激动剂(CpG DNA)诱导负载CD34~+白血病细胞的DC的成熟,其表面CD11c、CD86阳性表达较单药组及空白对照组明显升高,联合刺激组能进一步使DC成熟。结论 TLR3激动剂及TLR9激动剂作为刺激DC成熟佐剂,具有临床应用前景。