犬自体血清培养骨髓基质细胞的实验研究

目的:探讨犬自体血清培养骨髓基质细胞的可行性方法:获取犬自体血清,配制成含10%和20%自体血清的培养液,与含10%胎牛血清的培养液在相同条件下培养犬骨髓基质细胞(BMSCs)。通过倒置显微镜下观察细胞形态,细胞计数以及MTT法对细胞增殖情况进行检测。并且对第2代细胞用3种不同血清成分培养液(均加入β-甘油磷酸钠、抗坏血酸及地塞米松)进行成骨诱导分化,采用免疫组化检测碱性磷酸酶及钙结节形成。对检测到的量化数据做统计学分析,比较各组间的差异,以评价不同血清成分培养液对细胞增殖分化的影响。结果:3组细胞的生长及形态无明显差别,经过诱导培养均能形成钙结节。对3组间量化检测做统计学分析,各组间差异无统计学意义。结论:制备的犬自体血清能完全替代胎牛血清对骨髓基质细胞进行诱导培养。     

利用基因芯片技术筛查腮腺多形性腺瘤差异表达基因的研究

目的:研究腮腺多形性腺瘤和瘤旁组织中差异表达的基因。方法:分别从5例腮腺多形性腺瘤组织和与其相对应的瘤旁组织中提取总RNA并纯化为mRNA,两种不同组织的mRNA分别逆转录合成有荧光分子标记的探针,然后与Agilent人全基因组芯片进行杂交,杂交信号用Agilent扫描仪扫描,结果用ImgGene 3.0软件分析。结果:腮腺多形性腺瘤和瘤旁组织有差异表达的基因447个,其中表达上调185个,下调262个。结论:运用基因表达谱芯片可以筛选出腮腺多形性腺瘤相关基因。     

人腮腺多形性腺瘤细胞的体外培养

目的:建立人腮腺多形性腺瘤有限细胞系.方法:取腮腺多形性腺瘤患者原发肿瘤进行原代培养.观察细胞的形态特征,绘制细胞生长曲线,采用免疫细胞化学检测细胞内特异性抗原标志物,对细胞进行鉴定.结果:多形性腺瘤细胞体外培养时间约为80d,传代至16代,细胞呈短梭形、多边形,肿瘤性腺上皮细胞角蛋白弱阳性,肿瘤性肌上皮细胞肌动蛋白阳性、波形蛋白阳性.结论:多形性腺瘤细胞在体外培养连续传代,为永生化腮腺多形性腺瘤细胞系的建立奠定了基础.     

人永生化细胞系模型建立的方法

肿瘤的发生是一个多基因、多阶段的复杂过程,其中致癌基因与抑癌基因发挥了重要作用。目前对肿瘤的发生机制仍不十分清楚,无法在体内研究肿瘤发生的全过程,为此需要借助于体外细胞模型来完成该类研究。目前,绝大多数研究只是基于啮齿动物细胞系水平,但要明确致癌物质的确切作用,则需要人细胞模型。因此,建立永生化人细胞系就显得十分重要。本文对人永生化细胞系模型建立的各种方法进行了讨论。     

疾徐捻转泻法针刺足三里对高血压家兔的降压作用

目的：观察疾徐捻转泻法针刺足三里对去甲肾上腺素引起的高血压的效果。方法：实验于2005-05／06在大连大学生物有机化学重点实验室完成。①采用健康家兔18只。随机分为正常对照组、高血压模型组和针刺治疗组，每组6只。②正常对照组滴注生理盐水（1．5mL／min）；高血压模型：耳缘静脉滴注40．mg／L去甲肾上腺索溶液（1．5mL／min）。造成家兔实验性高血压；针刺治疗组保持去甲肾上腺索恒定滴速（1．5mL／min），同时以疾徐捻转泻法针刺家兔两侧拟足三里穴位，针刺方法：选用28号、1．5毫针。采用疾徐捻转泻法：进针时疾遮刺入，快速捻转，徐徐出针。行针法2min。留针10min，再行针法2min，留针10min。⑧针刺结束后采用颈动脉直接插管法测定各组收缩压、舒张压和平均动脉压。④组间计量资料比较采用q检验。结果：家兔18只均进入结果分析。针刺治疗结束后收缩压、舒张压和平均动脉压：高血压模型组明显高于正常对照组和针刺治疗组[高血压模型组：（146．6&;#177;21．0）。（115．8&;#177;16．5），（126．3&;#177;17．3）mmHg（1mmHg=0．133kP由；正常对照组：（121．8&;#177;14．3），（93．2&;#177;12．8），（102．2&;#177;12．8）mmHg；针刺治疗组：（112．0&;#177;9．0），（95．5&;#177;8．3），（100．8&;#177;8．3）mmHg。P〈0．05]；正常对照组与针刺治疗组接近（P〉0．05）。结论：疾徐捻转泻法针刺足三里可明显降低高血压家兔血压。     

多形性腺瘤发生机制的新进展

<正>涎腺多形性腺瘤是涎腺肿瘤中最常见的一种,占涎腺上皮性肿瘤的50%以上,一直被认为是一种良性慢性生长的肿瘤。涎腺肿瘤的发生是一个多因子参与的过程,目前主要研究分子水平上潜在的致癌基因、肿瘤抑制基因及其所表达的产物之间的失     

Gli2基因在涎腺多形性腺瘤中的表达及其意义

目的:探讨Gli2基因在涎腺多形性腺瘤和正常涎腺组织中的表达水平及其在多形性腺瘤发生发展中的作用。方法:收集20例腮腺多形性腺瘤组织和20例相对应的瘤旁正常腮腺组织,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测Gli2基因mRNA的表达水平,分析其表达变化,并探讨Gli2基因在涎腺多形性腺瘤发生发展中的作用及其临床应用价值。结果:与正常腮腺组织相比,多形性腺瘤组织中Gli2基因mRNA的表达水平升高。结论:多形性腺瘤中Gli2 mRNA的高表达可诱导肿瘤细胞持续增殖,提示Gli2基因可能在涎腺多形性腺瘤的发生发展中具有重要作用。     

Rho信号通路在周期性张应力诱导人牙周膜细胞骨架重排中的作用

目的探讨周期性张应力对人牙周膜细胞（human periodontal ligament cells,hPDLCs）骨架重排的影响及Rho信号通路在其中的作用。方法应用FX-5000T细胞应变加载系统,对体外培养的hPDLCs施加周期性张应力,幅度为10%,频率为0.1 Hz,加载时间为6 h和24 h。以未加载的细胞作为对照组。应用倒置显微镜观察细胞形态变化,细胞免疫荧光染色和共聚焦显微镜观察细胞骨架蛋白F-actin的变化,并应用Western blot检测Rho通路相关蛋白的表达变化。用Rock的特异性抑制剂Y-27632预处理细胞后,在0.1 Hz,10%幅度条件下,加载6 h和24 h,检测细胞骨架蛋白F-actin的变化和Rho信号通路相关蛋白的表达变化。结果与静态组相比,周期性张应力诱导hPDLCs细胞骨架重排差异有统计学意义,Rho信号通路Rock和p-cofilin蛋白表达增加（P〈0.05）。Rock的特异性抑制剂Y-27632可以降低Rock（P〈0.05）和p-cofilin蛋白表达和细胞骨架重排。结论周期性张应力可促进体外培养的hPDLCs细胞骨架重排,Rho信号通路参与了此过程。     

涎腺多形性腺瘤中Gli-2蛋白的表达及意义

目的 探讨转录因子Gli-2蛋白在涎腺多形性腺瘤(salivary pleomorphic adenoma,SPA)组织中的表达及其生物学意义.方法 采用免疫组织化学方法检测60例SPA组织中Gli-2蛋白的表达情况并进行分析.结果 Gli-2蛋白在60例SPA组织中高表达,主要表达在细胞核内,呈棕黄色颗粒.21例(3...     

疾徐捻转泻法针刺足三里对高血压家兔的降压作用

目的:观察疾徐捻转泻法针刺足三里对去甲肾上腺素引起的高血压的效果。方法:实验于2005-05/06在大连大学生物有机化学重点实验室完成。①采用健康家兔18只。随机分为正常对照组、高血压模型组和针刺治疗组,每组6只。②正常对照组滴注生理盐水(1.5mL/min);高血压模型:耳缘静脉滴注40mg/L去甲肾上腺素溶液(1.5mL/min),造成家兔实验性高血压;针刺治疗组保持去甲肾上腺素恒定滴速(1.5mL/min),同时以疾徐捻转泻法针刺家兔两侧拟足三里穴位,针刺方法:选用28号、1.5毫针,采用疾徐捻转泻法:进针时疾速刺入,快速捻转,徐徐出针。行针法2min,留针10min,再行针法2min,留针10min。③针刺结束后采用颈动脉直接插管法测定各组收缩压、舒张压和平均动脉压。④组间计量资料比较采用q检验。结果:家兔18只均进入结果分析。针刺治疗结束后收缩压、舒张压和平均动脉压:高血压模型组明显高于正常对照组和针刺治疗组犤高血压模型组:(146.6±21.0),(115.8±16.5),(126.3±17.3)mmHg(1mmHg=0.133kPa);正常对照组:(121.8±14.3),(93.2±12.8),(102.2±12.8)mmHg;针刺治疗组:(112.0±9.0),(95.5±8.3),(100.8±8.3)mmHg,P<0.05犦;正常对照组与针刺治疗组接近(P>0.05)。结论:疾徐捻转泻法针刺足三里可明显降低高血压家兔血压。