流式细胞术分析脑益嗪对成纤维细胞的调控作用

用流式细胞术测定不同剂量的脑益嗪（ＣＩＮ）对培养中３Ｔ６成纤维细胞的影响，包括检测细胞生长周期、ＤＮＡ含量、分裂增值指数及Ｇ１期和Ｇ２期蛋白质含量的变化。发现用脑益嗪后Ｇ１期细胞数增加，而Ｓ期细胞数减少，但无明显的量效关系；ＤＮＡ含量及分裂增殖指数下降；Ｇ１期及Ｇ２期蛋白质含量明显高于对照组。结果表明，脑益嗪可阻滞Ｇ１→Ｓ进程，使细胞堆积于Ｇ１期，减少ＤＮＡ含量及细胞分裂，增加蛋白质含量，使３Ｔ６细胞呈现不平衡生长状态。     

氢化泼尼松注射液致过敏性休克1例的急救护理

正氢化泼尼松注射液是肾上腺皮质激素类药,可减轻和防止组织对炎症的反应,从而减轻炎症的表现,也可防止或抑制细胞介导的免疫反应、迟钝的变态反应,对抗细胞内毒素对机体的刺激反应,减少细胞损害,发挥保护机体的作用。该药多用于皮炎、变态反应性疾病、感染性休克等。使用氢化泼尼松注射液引起变态反应较罕见。2014年     

激活素和卵泡抑素mRNA在肝纤维化形成过程中的作用

目的 观察四氯化碳（ＣＣｌ４）诱导实验性肝纤维化模型大鼠肝纤维化形成过程中激活素（ＡＣＴ）βＡ、βＣ、βＥ及卵泡抑素（ＦＳ）ｍＲＮＡ的表达。方法 ４０％ＣＣｌ４皮下注射制备大鼠实验性肝纤维化模型，注射 ＣＣｌ４后１、２、３、４、５、６、７周分批处死动物，每次 ６～１２只，采用半定量 ＲＴ—ＰＣＲ检测 ＡＣＴ βＡ、βＣ、βＥ亚基及 ＦＳｍＲＮＡ的表达。结果 正常肝脏可检测到ＡＣＴ βＡ、βＣ、βＥ及ＦＳ亚基ｍＲＮＡ，往射ＣＣｌ４２～３周后，βＡ水平下降至检测不到的水平，４周以后，又逐渐升高，注射 ６～７周时其表达水平明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）；注射ＣＣｌ４１～４周可检测到βＣ亚基ｍＲＮＡ，５～７周后其表达水平明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０５）。βＥ亚基ｍＲＮＡ在 ＣＣｌ４注射１～５周后水平下降至检测下到的水平，注射 ６～７周后其表达水平则明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０５）。ＣＣｌ４注射后的各个时期均未检测到ＦＳ ｍＲＮＡ表达。结论 肝纤维化形成过程中ＡＣＴ、ＦＳ表达发生了不同的变化，ＡＣＴ—ＦＳ系统失衡可能参与了肝纤维化的形成。     

大黄与粉防己碱抗实验性肝纤维化的对照研究

目的 研究大黄和粉防己碱(Tet)对大鼠实验性肝纤维化的影响并探讨其可能的作用机制。方法 四氯化碳皮下注射法制备大鼠肝纤维化模型，分别给予大黄和Tet灌胃。酶动力法测定肝功能，放免法测定细胞外基质(ECM)，HE、VG染色检测肝组织病理形态学改变，随机抽取样本电镜下观察超微结构改变。结果 大黄与Tet均可改善肝纤维化时的肝功能状态，降低ECM含量，降低肝纤维化程度，以大剂量大黄和小剂量Tet效果最显著。结论 大黄与Tet可保护肝细胞，抑制ECM合成，具有防治实验性肝纤维化和肝硬化的作用。     

化学合成经修饰抗TIMP-2小干扰RNA对CCl4诱导肝纤维化动物模型的影响

目的:研究化学合成经修饰抗金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)小干扰RNA(siRNA)对CCl4诱导的大鼠肝纤维化的影响及其作用机制.方法:SD大鼠42只随机平均分成7组:正常组、阴性对照组、假手术组、模型组,治疗组(分3组,分别用0.05、0.1、0.2mg/kgsiRNA尾静脉注射).以400mL/LCCl4(3μL/g)sc诱导大鼠肝纤维化.8wk后所有动物取肝组织标本,测门静脉血压(PVP)并经腹主动脉取血.常规HE染色和VanGieson(VG)胶原染色,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CIV)和羟脯氨酸(Hyp).应用荧光实时定量PCR法检测TIMP-2、Ⅰ型胶原纤维(COLⅠ)、Ⅲ型胶原纤维(COLⅢ)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA的表达.应用Westernblot或明胶酶谱法检测TIMP-2、α-SMA和MMP-2蛋白的表达.结果:各治疗组在应用抗TIMP-2siRNA治疗后组织学病变减轻,PVP较模型组降低(2.2±0.1,1.9±0.1,1.6±0.1kPavs2.7±0.1kPa,P<0.05),血清ALT和AST减少(2089.3±154.5,1869.8±138.0,1422.5±139.7nkat/Lvs2717.2±193.8nkat/L,P<0.05;3634.1±242.7,2739.4±141.3,2286.6±145.5nkat/Lvs4067.5±251.5nkat/L,P<0.05),反映肝纤维化指标的HA,LN,PCⅢ,CIV和Hyp均显著低于模型组(176.0±10.2,160.6±9.3,109.9±9.4μg/Lvs206.3±17.0μg/L,P<0.05;93.1±8.2,71.4±7.5,55.9±7.3μg/Lvs116.6±10.8μg/L,P<0.05;71.2±6.1,64.1±5.1,53.6±4.3μg/Lvs91.2±8.9μg/L,P<0.05;64.3±5.4,50.7±5.8,41.6±4.4μg/Lvs80.3±6.8μg/L,P<0.05;328.7±17.6,279.7±16.3,230.4±16.1μg/gvs380.7±20.6μg/g,P<0.05).各治疗组TIMP-2,COLⅠ,COLⅢ和α-SMAmRNA的表达较模型组明显减少(7.53±0.83,5.04±0.75,1.30±0.49vs23.23±2.14,P<0.05;33.38±2.85,22.80±2.48,11.45±1.27vs43.18±3.32,P<0.05;19.23±1.95,13.21±1.35,10.11±1.09vs25.90±2.23,P<0.05;23.76±2.06,15.33±1.25,10.53±1.02vs34.85±3.16,P<0.05),且TIMP-2,MMP-2和α-SMA蛋白的表达也相应减少(23.27±3.06,14.13±1.86,9.16±1.33vs44.83±5.45,P<0.05;23.80±2.14,15.58±1.52,9.52±0.93vs39.90±3.23,P<0.05;24.58±2.59,19.29±2.31,13.40±1.98vs57.19±7.07,P<0.05).结论:化学合成经修饰抗TIMP-2siRNA能显著降低TIMP-2的表达,促进细胞外基质的降解,抑制肝星状细胞的活化.     

生长抑素对大鼠实验性肝纤维化的负调节作用

研究证实,肝纤维化的关键细胞--肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)在活化后表达生长抑素受体(somatostatin receptors,SSTR)[1].而低剂量生长抑素(SST)既能抑制HSC增殖,又能促进其凋亡[2].奥曲肽等SST类似物还具有减少胶原合成的生物学效应[3].因而SST可通过HSC细胞膜上的SSTR介导,在肝纤维化过程中发挥负调节作用.为此,本研究采用四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化,在此基础上观察不同剂量SST对肝功能、细胞外基质(extracellular matrix,ECM)水平及纤维化程度的干预作用,以期阐明SST对肝纤维化的影响及其机制.     

雌激素对雄性大鼠肝纤维化形成的影响

目的探讨体内睾酮(T)和雌激素(β-Est)抑制肝纤维化的关系.方法CCl4皮下注射诱导肝纤维化模型,观察20μg·kg-1·d-1β-Est对完整或去势雄性大鼠肝纤维化形成的影响.以标准酶、ELISA、RIA分别测定血清肝功能、细胞外基质(ECM)和性激素水平;VG胶原染色观察肝组织病理学改变,结合图像分析计算胶原面积;RT-PCR和免疫组化检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、激活素βA(ACTβA)在组织中的表达.结果β-Est能改善去势纤维化大鼠肝功能,降低ECM分泌、肝组织纤维化程度和TGF-β1、ACTβA表达,而对完整雄性大鼠肝纤维化形成无影响;两组大鼠血清雌二醇水平无显著性差异.结论β-Est能抑制肝纤维化形成,T影响其发挥保护作用,可能是造成肝纤维化性别差异原因之一.     

实验性肝病血清生化学及肝组织脂质过氧化

通过建立大鼠0Cl_4肝纤维化、酒精营养性肝病以及大白兔肝纤维化和高胆固醇血症肝病模型。比较这些模型血清透明质酸(hyaluanic acid,HA)、脯氨酸肽酶(prolidase,PLD)、脂质、肝功能以及肝组织脂质过氧化物丙二醛(malonaldehyde,MDA)和三酰甘油(triglyceride,TG)含量的改变,探讨不同动物实验性慢性肝病模型血清和肝组织生化学变化特征。     

血管紧张素Ⅱ对肝星状细胞增殖及胶原合成影响

１．材料与方法：雄性ＳＤ大鼠,体重４００～４５０ ｇ,购于上海医科大学实验动物中心。肝星状细胞（ＨＳＣ）的分离采用原位酶消化法。链酶蛋白酶、胶原酶、Ｎｙｃｏｄｅｎｚ等均为Ｓｉｇｍａ公司产品。将不同浓度（１０－９、ｍ－８、１０－７、１０－６、１０－５ｍｏｌ／Ｌ）血管紧张素Ⅱ（Ａｎｇ Ⅱ）与无血清培养ＨＳＣ共孵育。 Ａｎｇ Ⅱ 对ＨＳＣ增殖的影响采用ＭＴＴ法测定,对ＨＳＣ胶原合成的影响采用３Ｈ－脯氨酸掺入法测定。培养上清液透明质酸、层粘连蛋白采用放射免疫法测定（试剂盒购于上海海军医学研究所）。ＨＳＣ平滑…     

钙拮抗剂对成纤维细胞胶原基因的影响

目的：研究钙拮抗剂汉防己甲素（Tet)、维拉帕米(Ver)和硝苯啶（Nif)对3T3成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ胶原基因表达的影响,旨在探讨其抗肝纤维化的机理。方法：应用标记Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型前胶原cDNA探针与RNA斑点印迹杂交技术,检测Tet,Ver和Nif与3T3成纤维细胞共育前后Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原mRNA水平的变化。结果：Tet,Ver和Nif与3T3成纤维细胞共育后Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原mRNA水平有不同程度降低。结论：钙拮抗剂可以抑制细胞外基质胶原基因的表达。