人类白细胞抗原分型技术的进展

学术背景：以往人类白细胞抗原分型主要采用血清学和细胞学方法，随着PCR技术、基因芯片技术及分子生物学技术的发展，已建立从基因水平上进行的人类白细胞抗原分型技术。目的：介绍人类白细胞抗原分型方法，为实际应用提供依据。检索策略：应用计算机检索PubMed1997—07／2007—07期间的相关文章，检索词“HLA technology”，并限定文章语言种类为English。同时检索万方数据库1997—07／2007—07相关文章，检索词为“人类白细胞抗原”，并限定文献语种为中文。共检索到相关文献142篇，选择与人类白细胞抗原分型技术有关的文献55篇。将初步筛选的文章进一步查找全文，排除综述和重复文献，内容相似的选择发表在权威杂志或近3年发表的文献，最后共纳入30篇进行综述。文献评价：文献对不同的人类白细胞抗原分型方法进行汇总分析，符合纳入标准的30篇文献中，6篇为中文文献，24篇为英文文献。资料综合：传统的人类白细胞抗原分型方法主要是血清学和细胞学方法，分型准确性较差。随着PCR技术的广泛应用，人类白细胞抗原基因分型方法得到了迅速的发展。序列特异性引物、序列特异性寡核苷酸探针、直接测序、基因芯片等各具特点的人类白细胞抗原分型技术不断出现，使人类白细胞抗原的分型更加准确、精细、简便、实用，为临床推广应用打下了基础。结论：各种人类白细胞抗原基因分型方法各有优势，不能相互替代，这也是由人类自细胞抗原系统的高度多态性和复杂性所决定的，根据不同的用途可选择相应的方法。     

环磷酰胺致大鼠卵巢储备功能低下的模型对照研究

目的:比较环磷酰胺不同剂量致大鼠卵巢储备功能低下,对比分析出哪种剂量能制备出更加理想的大鼠卵巢储备功能低下的模型。方法:将40只有正常周期的SD雌性大鼠随机分为4组:环磷酰胺高、中、低剂量组(分别以浓度计90、75、50mg/kg)和阴性对照组(空白),每组10只。除空白组外,环磷酰胺组均按照计量腹腔注射一次。造模结束后14d,处死大鼠,检测各组大鼠血清性激素及AMH水平,观察大鼠动情周期的变化及各组大鼠卵巢组织形态学变化,对比各组大鼠卵巢和子宫的质量。结果:(1)各组大鼠血清激素及AMH比较:与空白组比较,环磷酰胺高、中、低剂量组致雌性大鼠FSH水平均显著升高,差异有统计学意义(P0.05),致雌性大鼠E2、AMH水平均显著降低,差异有统计学意义(P0.05),其中环磷酰胺中剂量组LH水平显著升高,差异有统计学意义(P0.05);与环磷酰胺中剂量组比较,各组大鼠FSH、LH水平均显著降低,E2、AMH水平均显著升高,差异有统计学意义(P0.01)。(2)各组大鼠卵巢和子宫组织的质量:与空白组比较,环磷酰胺高、中、低剂量组大鼠卵巢质量均下降,差异有统计学意义(P0.05),环磷酰胺高、中剂量组大鼠子宫质量均下降,差异有统计学意义(P0.05);与环磷酰胺中剂量组比较,空白组及高、低剂量组大鼠卵巢质量均下降,差异有统计学意义(P0.01),空白组及低剂量组大鼠子宫质量均下降,差异有统计学意义(P0.01)。结论:环磷酰胺造成大鼠卵巢功能受到损害,中剂量环磷酰胺可以制备出更加理想的大鼠卵巢储备功能低下的模型。     

高功率脉冲微波和电磁脉冲辐照对心肌细胞膜电穿孔效应及机理的研究

电磁辐射可造成人体多器官系统的损伤。对其损伤的病理机制至今尚未完全阐明。心脏是电磁辐射损伤的敏感器官之一。本实验拟通过研究HPPM和EMP对心肌细胞的影响,探讨电磁辐射致伤的关键机制,解释脉冲电磁场致心肌细胞损伤的发展规律。本实验采用HPPM和EMP辐照原代培养心肌细胞的方法,用原子力显微镜、激光扫描共聚焦显微镜、流式细胞仪和全自动生化检测仪等多种实验手段,检测辐照对细胞膜形态、结构和功能的影响。结果发现HPPM和EMP辐照后,心肌细胞搏动减慢,形态异常,活力下降,凋亡和坏死率明显增加。细胞膜出现数量不等、大小不一的电穿孔,细胞膜通透性丧失,结构破坏,细胞培养液中Na 、K 、Ca2 、Cl-、Mg2 、Ca2 和无机磷离子浓度显著升高(P<0.01),细胞内Ca2 浓度显著降低(P<0.01)。结果提示心肌细胞是电磁辐射损伤的敏感细胞,脉冲电磁场可致心肌细胞膜电穿孔,细胞形态、结构和功能均受到严重损伤。电穿孔效应是解释电磁辐射非热效应的关键机制之一。电穿孔导致的细胞膜通透性和膜结构改变存在一定发展规律。     

原子力显微镜在生物医学中的应用

原子力显微镜是观察样品表面结构的一种新的工具 ,它具有比传统扫描电子显微镜更高的分辨率 ,并且可以在生理条件下进行实时观察。同时在分子水平上它还是检测样品之间相互作用力的一个强有力的工具。近年来 ,原子力显微镜越来越多地应用到生物医学的各个方面 ,并且取得了很多令人鼓舞的结果     

程序化护理干预对髋关节置换术后患者康复质量的影响

目的 探讨程序化护理干预对髋关节置换术后患者康复质量的影响。方法 本研究选取2019年5月—2021年4月在河南省某医院进行髋关节置换术的60例患者为研究对象。采用随机数字表法将患者分为常规护理组(30例)和程序化护理组(30例)。常规护理组患者采用常规护理干预,程序化护理组患者在常规护理基础上实施程序化护理干预。比较...     

红藻氨酸作用后海马神经元胞膜表面的超微结构的原子力显微镜观察

目的 观察原代培养神经元在红藻氨酸(KA)作用下细胞表面形态的三维构像变化。方法 利用原子力显微镜(AFM)对大鼠海马神经元经不同浓度的KA(25和250μmol／L，50和100nmol／L)分别作用10min和100min后的表面结构进行纳米级水平扫描和观测。结果 正常海马神经元表面光滑，起伏均匀、规律；KA作用后神经元呈退行性改变，表现为胞体肿胀，胞膜表面粗糙，出现隆起和“孔洞”样结构，并且其变化程度分别与作用时问和KA浓度呈量-效关系。结论 KA对海马神经元毒性作用后胞膜表面超微结构所产生的明显变化，可借助AFM清晰观察，并定量分析。     

非电离辐射对大鼠心肌细胞的损伤及其机制

目的探讨非电离辐射对大鼠心肌细胞损伤效应及机制。方法采用9GHz950mW/cm2微波脉冲和0～100MHz6×104V/m电磁脉冲分别辐照原代培养心肌细胞72h,用原子力显微镜、激光扫描共聚焦显微镜、流式细胞仪和全自动生化检测仪等多种实验手段检测受辐照细胞的细胞膜形态、结构和功能的变化。结果微波脉冲和电磁脉冲辐照后,心肌细胞搏动减慢,形态异常,活力下降,凋亡和坏死率明显增加。细胞膜出现数量不等、大小不一的电穿孔。细胞培养液中Na+、K+、Ca2+、Cl-、Mg2+和无机磷离子浓度显著升高(P<0.01)。结论心肌细胞是电磁辐射损伤的敏感细胞,脉冲电磁场可致心肌细胞膜电穿孔,细胞形态、结构和功能均受到严重损伤。电穿孔效应是解释电磁辐射非热效应的关键机制之一。电穿孔导致的细胞膜通透性和膜结构改变存在一定发展规律。     

次声作用对CHO细胞膜的影响

目的应用原子力显微镜对经次声作用后的CHO细胞膜进行观察，以探讨次声对细胞膜超微结构的影响。方法采用8Hz、130dB的次声作用于CHO细胞，并利用原子力显微镜对正常及经次声作用后的CHO细胞膜表面进行纳米级水平的扫描检测。结果CH0细胞经次声作用后，其细胞膜表面突起明显变短、凹陷变浅，整个细胞膜表面结构变得较为平缓，并且随着次声作用次数的增加，其改变程度亦愈加显著。结论一定强度的次声作用可引起细胞膜表面超微结构的直接改变，并且次声作用次数越多，该变化就越显著。     

陈大舜辨治糖尿病腹泻学术思想及临证经验

总结陈大舜教授基于"魄门亦为五脏使"论治糖尿病腹泻的学术思想及临证经验。陈教授认为糖尿病腹泻的病机是由于五脏气机升降失调,魄门启闭功能障碍;内生邪气交冱壅滞,五脏与魄门使道阻塞导致。临床采用调节五脏气机及清热利湿、活血化瘀、养阴生津,应用特殊的降糖中药等治法,疗效显著。     

荧光探针Fluo-3/AM和FuraRed 测量单细胞中比率钙

应用ACAS570激光扫描共聚焦显微镜（laserscanningconfocalmicroscope,LSCM简称共焦显微镜）和钙离子指示剂Fluo－3／AM、FuraRed荧光探剂双标记技术,测定了单个活细胞内比率钙的动态变化。结果显示37℃,Fluo－3／AM浓度10μmol／L,FuraRed浓度10μmol／L的条件下,昆明小鼠巨噬细胞负载1h左右即可获良好的标记效果。用比率探针测量细胞内Ca~2＋的动态变化,使Ca~2＋的定性定量测定不受染料浓度、细胞大小、照射光强度以及一定程度的光漂白和染料泄漏等因素的影响,提供了一种准确定性定量细胞内Ca~2＋的实时、动态、原位变化的新方法。