miR-196a-5p在食管鳞状细胞癌中表达及靶基因预测的生物信息学分析

目的:探讨hsa-miR-196a-5p在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）发生发展过程中的作用,并对其生物学特征及表型功能进行预测分析,为最终研究miR-196a-5p的功能提供有利线索。方法:通过Quantitative Real-time PCR方法,检测食管鳞状细胞癌患者肿瘤组织和癌旁正常组织中miR-196a-5p相对表达水平。使用Target Scan、MIRDB、miRand和Tarbase DIANA TOOLS 7.0四种在线软件预测miR-196a-5p的靶向调控基因集合,将4个预测集合利用在线软件VENNY2.1取交集,最终确定miR-196a-5p的靶基因集合范围。在线数据库string可以完成对所预测的靶基因编码蛋白质之间相互关系的预测。最后通过使用在线数据库metascape对hsa-miR-196a-5p预测的靶基因集合进行基于GO、KEGG数据库的功能注释分类分析和通路富集分析。结果:miR-196a-5p序列号为MIMAT0000226,定位于人12q13.13。与斑马鱼、七鳃鳗、鸭嘴兽、褐家鼠、家兔、野猪等物种的miR-196a-5p在UAGGUAGUUUCAUGU UGUUGGG区域高度保守。32对食管鳞状细胞癌肿瘤组织中miR-196a-5p的表达量显著高于对应的癌旁正常对照组织,与前期Agilent Human miRNA基因芯片结果保持一致。生物信息学方法预测的最终靶基因有48个,且其编码蛋白质之间关系网络集中在以HOXA7、HOXA5和HOXA9为核心的HOX家族和EXOC基因簇。miR-196a-5p靶基因功能集中在胚胎和器官形态发生、骨骼系统开发、RNA聚合酶Ⅱ启动子转录调控、基因表达/转录的正调控,以及参与转录因子活性调节等方面。主要参与的信号通路有促性腺激素释放激素、Ras、FoxO信号通路、AGE-RAGE信号通路、胰岛素信号通路和肿瘤转录失调通路（P<0.01）等。miR-196a-5p在ESCC肿瘤组织中显著高表达,而TGFBR3基因与miR-196a-5p出现相反的表达方式,我们推测TGFBR3可能是ESCC中miR-196a-5p的一个靶基因。结论:miR-196a-5p在食管鳞状细胞癌中是高表达状态,提示miR-196a-5p可以作为癌症促进子参与食管癌的发生发展。     

多囊卵巢综合征痰湿证患者脂联素及其受体mRNA表达与体外受精结局的相关性研究

目的:探讨脂联素、脂联素受体与多囊卵巢综合征(PCOS)痰湿证的关系,以及其与体外受精(IVF)结局的相关性。方法:选择行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的PCOS患者共43例(痰湿证20例、非痰湿证23例)及对照组30例,化学发光法检测3组患者血清胰岛素(FIN)水平;取卵日留取外周血及卵泡液,并提取黄素化颗粒细胞,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清和卵泡液中脂联素(APN)水平,实时定量PCR(RT-PCR)法测定黄素化颗粒细胞脂联素、脂联素受体m RNA的表达水平。结果:1)PCOS痰湿组BMI及FIN明显高于其余两组(P0.01),且PCOS非痰湿组也高于对照组(P0.05)。2)PCOS痰湿组血清及卵泡液APN水平、Adipo R1、Adipo R2m RNA表达水平均显著低于其余两组(P0.05);各组颗粒细胞均无脂联素m RNA的表达。3)血清APN、卵泡液APN、Adipo R1、Adipo R2m RNA与BMI及FIN分别呈负相关;BMI与FIN呈正相关。4)妊娠妇女血清脂联素含量明显高于未妊娠妇女(P0.05)。结论:PCOS痰湿证患者具有明显的胰岛素抵抗特征;其胰岛素抵抗(IR)可能与卵巢局部脂联素受体m RNA的表达下降有关;采卵日血清中高水平的脂联素可预示良好的IVF结局。     

多重癌1例

患者男性 ,80岁 ,僧人。因排便习惯改变伴便血 1年 ,加重 8个月入院。直肠指检发现肠腔呈环形狭窄 ,距肛门 6～ 8cm处可触及一肿物 ,质硬 ,有触痛。肠镜示直肠内有一半环状隆起肿物 ,表面高低不平 ,易出血 ,经活检病理诊断为直肠管状腺癌。腹部B超示膀胱右侧壁发现一面积为 2 1cm×1 7cm的稍强回声区 ,向腔内突起。膀胱镜下见右侧壁与前壁交界、距输尿管开口上方 2cm处有一菜花样肿物 ,直径为3cm ,触之易出血 ,经活检病理诊断为膀胱移行细胞癌。此外 ,在右侧乳晕区还发现一个约 3cm无痛包块 ,质地硬 ,表面不光滑 ,边界不清 ,表面皮肤无红…     

NRG1在肝细胞肝癌中杂合性丢失和蛋白表达的研究

目的：分析在肝细胞性肝癌中NRG1基因的两个多态性位点D8S278和D8S499杂合性丢失（loss ofheterozygosity,LOH）情况及其与NRG1蛋白表达水平之间的关系,探讨NRG1在肝细胞肝癌发生发展中的作用。方法：酚氯仿抽提经石蜡包埋的肝癌和癌旁正常组织DNA,进行PCR扩增,扩增出来的产物进行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳并分析两位点杂合性丢失情况;用免疫组织化学方法检测肝癌组织和癌旁正常组织中NRG1的表达情况。结果：D8S278和D8S499的LOH率分别为32.43%（24/74）、37.86%（26/69）,总频率为48.65%（36/74）;NRG1在肝癌组织中的阳性表达率为67.57%（50/74）,显著低于在正常组织中的表达水平（97.30%,72/74）（P〈0.05）,这种降低与NRG1基因多态性位点的LOH有关;NRG1表达下调与肿瘤大小、Edmondson分级相关,而与年龄、性别、HBsAg、AFP、肝硬化和肝内外转移无明显相关。结论：NRG1基因可能是肝细胞肝癌的一个候选抑癌基因,在肝癌发生发展中起一定的作用;可为临床诊断、治疗及预后评估提供理论依据。     

肺部慢性非干酪样肉芽肿性病变20例

肉芽肿（granuloma）是一种渗出的单核细胞和巨噬细胞局部增生形成的境界清楚的结节状病灶。其本质是迟发超敏反应所致的炎症，由于在免疫应答中起作用的主要是巨噬细胞和上皮样细胞，因此肉芽肿也可定义为巨噬细胞及其衍生细胞（如上皮样细胞，多核巨细胞）的聚集，伴随或不伴随其他炎症细胞的出现。肺部肉芽肿性病变很多，     

酪氨酸蛋白磷酸酶样A结构域2在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨酪氨酸蛋白磷酸酶样A结构域2(PTPLAD2)基因产物表达与食管鳞状细胞癌(ESCC)临床病理特征及预后的关系。方法应用免疫组织化学染色法分析了213例ESCC标本中PTPLAD2基因产物表达情况和定位,并对其进行了术后5 a随访。结果 PTPLAD2主要定位在细胞膜,且其在正常鳞状上皮中表达较高(54.0%),而在ESCC组织中低表达(16.0%),对PTPLAD2的表达与ESCC患者临床病理特征关系分析结果显示,在有淋巴结转移和预后差的ESCC病例中低表达;PTPLAD2在ESCC中的表达与ESCC的浸润、转移及分化程度均相关(P<0.05);PTPLAD2表达可作为ESCC患者预后独立指标。结论 PTPLAD2在ESCC中的表达与食管癌的发生发展、浸润转移和预后密切相关,PTPLAD2可能是ESCC发生相关的新的潜在抑癌基因,可作为临床预测浸润转移和估计预后的一个重要参考指标。     

生豆浆灌胃治疗小鼠急性坏死性胰腺炎研究

目的 探讨生豆浆灌胃对ANP小鼠的治疗作用.方法 采用腹腔注射左旋精氨酸法诱导小鼠ANP模型.200只小鼠按随机分组法分为正常组、ANP组、生豆浆治疗组、熟豆浆治疗组和纯净水组.后4组又分制模后6 h、12 h、24 h、48 h和72 h 5个时间点,各8只.检测各组血清淀粉酶活性,观察胰腺病理变化并评分,分析小鼠死亡率.结果 生豆浆组24 h、48 h和72 h血清淀粉酶活性分别为(3 910±833)U/L、(2 798±634)U/L和(3 398±1 389)U/L;胰腺病理分值分别为3.13±0.34、2.35±0.19和2.22±0.21,较其他3组均明显降低(P＜0.01或P＜0.05).生豆浆组7 d内死亡2只,其他组死亡5～6只.结论 生豆浆灌胃可明显抑制ANP小鼠的血清淀粉酶活性,减轻胰腺炎症程度,降低死亡率.该法可能是一种可行的治疗方法,值得进一步研究.     

克隆性分析技术在肝脏局灶性结节性增生诊断中的应用

目的:探讨整个肝局灶性结节性增生(FNH)病变及各结节的克隆性,以阐明其本质,同时比较其与肝细胞腺瘤(HA)鉴别的克隆性组成方法:女性肝脏标本3例共4个FNH病灶．在病变区和非病变区取组织提取基因组DNA,余标本制备石蜡切片,HE染色,应用显微切割技术分离其中3个FNH内的小结节状病变,提取基因组DNA,经甲基化敏感的HpaⅡ或Hha Ⅰ消化,巢式PCR扩增磷酸甘油酸激酶(PGK)和雄激素受体(AR)基因．应用Bst Ⅺ酶切和琼脂糖凝胶电泳显示PGK基因的单核苷酸多态性; 应用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳显示AR基因的 CAG重复序列长度多态性．2例HA和4例HCC 作为肿瘤参照．结果:2例HA及4例HCC均为单克隆性．4个 FNH病变,直径1．5-5．3 cm,但缺乏特征性的中央星状瘢痕,结果均显示为多克隆性病变;其中的61个结节性病变中,56个呈变异肝细胞结节(NAH)形态,5个为普通再生结节．克隆性分析结果显示,56个NAH样病变中,除4个未扩增成功外,52个NAH中有21个(40．4％)显示X 染色体失活嵌合性丢失,提示为肿瘤性病变; 其中1例FNH的14个单克隆结节中,有2个与其他病变失活带型不一致,提示在同一FNH中; 存在着不同起源的NAH样病变．5个普通肝细胞增生结节及病变周围肝组织均为多克隆组成．结论:FNH是由无数个NAH构成的,其整个病变是多克隆性,但其中某些结节已经是肿瘤性增生．克隆性检测有助于其与HA的鉴别,而且所取样本必须是病变的整个切面或其大部分．     

以肝组织为主要成分的纵膈畸胎瘤1例报道及文献回顾

目的:报道1例以肝组织为主要成分的纵膈成熟型囊性畸胎瘤,并结合文献探讨其临床及组织病理学特点. 方法:对1例以肝组织为主要成分的纵膈成熟型囊性畸胎瘤进行常规病理及免疫组化观察. 结果:显微镜下见瘤组织内含有三个胚层衍生物,但大部分区域以肝组织为主.免疫组织化学染色:以肝组织为主区结果示Hepatocyte(+)、AFP(+)、GP3(+)、CK18(+ );NSE(-)、Syn(-)、CgA(-)、CD99(-)、 CD30(-)、LCA(-)及Vimentin(-).结论:纵膈畸胎瘤较为常见,但以肝组织为主的成熟型囊性畸胎瘤极为罕见.     

HOXA9基因与恶性肿瘤关系的研究进展

HOXA9基因是同源盒（HOX）基因家族中的一员,其编码产物是一种重要的转录调节因子,在控制胚胎发育和调节细胞分化过程中发挥重要作用。近年来的研究发现,HOXA9基因的异常表达与急性白血病、恶性胶质瘤、卵巢癌、肺癌、乳腺癌等多种肿瘤密切相关。在不同类型肿瘤或肿瘤的不同阶段,HOXA9通过参与肿瘤细胞的增殖、凋亡或分化过程而具有双重作用（促癌作用或抑癌作用）,产生这种差异的具体机制尚不清楚。本文对 HOXA9的结构、功能及其与肿瘤关系的研究做一综述。