靶向瘦素基因的siRNA对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的 通过构建慢病毒介导的靶向瘦素基因的小干扰RNA(siRNA),探讨瘦素对A549细胞增殖和凋亡的影响.方法 建立siRNA-a组、siRNA-b组及其各自阴性对照组和空白对照组(A549)5组细胞,分别于荧光显微镜下观察细胞5d和11d的生长情况.噻唑蓝(MTT)比色法测定空白对照组、siRNA-a组及其阴性对照组细胞1～6 d的生长情况,绘制生长曲线,比较各组细胞增殖差异.流式细胞仪分析各组细胞凋亡率,观察瘦素的siRNA对A549细胞凋亡的影响.RT-PCR和Western bloting方法检测各组细胞瘦素mRNA和蛋白表达水平.结果 siRNA-a细胞镜下形态基本正常,5d后荧光效率仍较高,感染稳定,但生长较阴性对照组及空白对照组细胞缓慢.siRNA-b细胞感染48 h后,镜下见细胞肿胀、变形,空泡出现,5d后见多量细胞碎片,凋亡小体形成,呈现凋亡状态,11d后可见细胞碎片,已近完全凋亡.MTT实验siRNA-a组细胞从第3天起生长比其他各组均缓慢(P＜0.01).流式细胞仪检测细胞凋亡率结果:siRNA-a组、siRNA-b组细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组.RT-PCR和Western bloting结果 显示干扰组细胞瘦素mRNA和蛋白表达水平较阴性对照组和空白对照组明显下调.结论 慢病毒介导的siRNA能下调肺腺癌A549细胞瘦素基因的表达,从而抑制A549细胞增殖,促进其凋亡.由此可见,瘦素的siRNA有望成为肺腺癌基因治疗的新手段.     

脓毒症患者血清IL-6和NT—proBNP的变化及其临床意义

目的：探讨脓毒症患者白细胞介素-6（IL-6）和N末端前体脑钠肽（NT—proBNP）在脓毒症患者体内变化规律及临床意义。方法：选取2010—01—2011—12在我院ICU住院的脓毒症患者60例,脓毒症组根据28日生存与否分为生存组和死亡组,检测外周血IL-6和NT—proBNP的浓度。选取同期体检健康者50例为非脓毒症对照组,入院的24h内检测血清IL-6和NT-proBNP浓度。结果：与非脓毒症组比较,脓毒症组血清IL-6和NT—proBNP的浓度均明显升高（P〈O．01）;IL-6、NT—proBNP浓度、APACHEⅡ评分三者之间均呈正相关。与生存组比较,死亡组的血清IL-6和NT—proBNP的浓度均明显升高（均P〈0．01）。结论：脓毒症患者血清IL-6和NT-proBNP水平升高反映脓毒症的严重程度,与预后有较好的相关性。     

大黄牡丹汤对脓毒症急性肠功能障碍大鼠肠道髓系细胞触发受体-1表达的影响

目的:研究大黄牡丹汤对脓毒症大鼠急性肠功能障碍的治疗作用是否与调控肠道髓系细胞触发受体-1(TREM-1)表达有关。方法:雄性SD大鼠100只,腹腔注射4. 5 mg·kg~(-1)的脂多糖(LPS)进行造模,造模成功后随机分为5组:模型组,谷氨酰胺组(3. 75 g·kg~(-1)),大黄牡丹汤低、中、高剂量组(7. 5,15,30 g·kg~(-1)),另设正常大鼠10只作为正常组。每日1次。7 d后所有大鼠灌胃混悬液2 m L(乳果糖100 mg,甘露醇50 mg)。留取24 h尿液,运用带电化学检测器的高压液相色谱仪分析尿中乳果糖(lactulose)与甘露醇(mannitol)比值(L/M)。取血和回肠组织,运用高效液相色谱法检测血清瓜氨酸浓度;酶联免疫吸附法检测血清髓系细胞触发受体-1(TREM-1),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),肠型脂肪酸结合蛋白(iFABP),D-乳酸浓度;实时荧光定量PCR检测回肠组织TREM-1,Toll样受体2(TLR2),Toll样受体4(TLR4),髓样细胞分化蛋白(MyD88),核转录因子-κB(NF-κB) mRNA的表达水平;电镜观察肠黏膜损伤的病理变化。结果:与正常组比较,模型组血清TREM-1,TNF-α浓度明显升高(P 0. 05,P 0. 01);回肠组织TREM-1,TLR2,TLR4,MyD88,NF-κB mRNA表达水平明显升高(P 0. 05,P 0. 01); i FABP,D-乳酸浓度,尿L/M明显升高(P 0. 05);血清瓜氨酸浓度明显降低(P 0. 05);回肠黏膜厚度、绒毛长度明显下降(P 0. 05)。与模型组比较,各给药组血清TREM-1,TNF-α浓度明显下降(P 0. 05,P 0. 01);回肠组织TREM-1,TLR2,TLR4,MyD88,NF-κB mRNA表达水平明显下降(P 0. 05,P 0. 01),4组之间无差异;谷氨酰胺组,大黄牡丹汤中、高剂量组血清i FABP,D-乳酸浓度,尿L/M明显下降(P 0. 05,P 0. 01);血清瓜氨酸浓度明显升高(P 0. 05,P 0. 01);绒毛长度及黏膜层厚度明显升高(P 0. 05);肠黏膜Chiu氏评分明显下降(P 0. 05),3组之间无差异。结论:大黄牡丹汤能有效治疗脓毒症大鼠急性肠功能障碍,其作用机制可能与通过调控肠道髓系细胞触发受体-1表达,减轻肠道炎症反应有关。     

以弥漫性肺泡出血为主要表现的多发性肌炎伴多脏器功能障碍综合征1例

弥漫性肺泡出血是由肺泡毛细血管炎症所导致的持续的肺出血,病因多为毒物吸入、感染、凝血功能异常及自身免疫性疾病,在自身免疫性疾病中又常见于系统性红斑狼疮、抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)相关性血管炎、Good-Pasture综合征等[1],而在多发性肌炎患者中并发肺泡出血者很罕见.现报道我科于2020年成功救治的1例以弥...     

ICU感染性休克患者动脉血糖与末梢血糖的比较

ICU感染性休克患者血糖水平波动范围较大,需要进行频繁的监测。同时,该类患者存在微循环障碍,毛细血管低灌注及组织摄取葡萄糖增加,末梢血糖的检测值可能偏低。因此,其末梢血糖检测值可能是不准确的。     

感染性休克患者血肌钙蛋白I水平与疾病严重程度及预后的关系

研究[1]表明,c Tn I水平的升高在ICU感染性休克患者中较常见。近10年来统计数据显示,脓毒症患者中40%～50%可发生心肌抑制,7%发生心力衰竭,脓毒症伴心肌抑制的病死率高达70%～90%[2]。也有报道[3]称脓毒性休克患者心肌运动功能减退率（心脏射血分数〈45%）高达60%。血肌钙蛋白Ⅰ（c TnⅠ）作为心肌细胞损伤的特异性标志物,理论上可以代表脓毒症心肌损害的程度。本研究探讨感染性休克患者血肌钙蛋白I与疾病严重程度及预后的关系,现报告如下。     

大黄牡丹汤对危重症病人急性肠功能障碍的临床观察

目的观察大黄牡丹汤对危重症病人急性肠功能障碍的临床疗效。方法将入院的危重症患者,按AGI分级、胃肠功能障碍评分及APACHEII评分随机分为常规治疗组与大黄牡丹汤组。观察两组病人治疗前及治疗3、5、7 d后胃肠功能障碍评分的变化;观察两组病人治疗前及治疗7 d后,血清中超敏C反应蛋白(h CRP)、白蛋白(ALB)、前白蛋白(PALB)、血清肌酐(Cr)、瓜氨酸(Citrulline)、脂肪酸结合蛋白(i FABP)、D-乳酸水平(D-lactate)、可溶性髓系细胞触发受体-1 (s TREM-1)水平的变化。结果治疗3、5、7 d后,大黄牡丹汤治疗组能显著降低胃肠功能障碍评分(P 0. 05),治疗5、7 d后,常规治疗组能显著降低胃肠功能障碍评分(P 0. 05);治疗7 d后,两组均能显著降低血清中h CRP、i FABP、D-lactate、s TREM-1水平(P 0. 05),升高血清中Citrulline水平(P 0. 05);与常规治疗组比较,大黄牡丹汤治疗组患者血清中h CRP水平、s TREM-1水平显著降低,Citrulline水平显著升高(P 0. 05)。治疗前后血清中ALB、PALB、Cr水平无显著变化(P 0. 05)。结论常规治疗组可以显著改善危重症病人急性肠功能损伤,常规治疗组与大黄牡丹汤联用时,对危重症病人急性肠功能损伤改善作用更为显著。     

γ-氨基丁酸与哮喘的关系

γ-氨基丁酸(GABA)是哺乳动物中枢神经系统重要的抑制性神经递质之一,也存在于气道平滑肌细胞及气道上皮细胞等周围组织。研究表明,GABA系统与哮喘有密切关系。GABA受体主要分为A型和B型两类。GABAA受体激动剂蝇蕈醇能松弛由速激肽、组胺引起的气道平滑肌的收缩,并能减轻乙酰胆碱引起的气道通气压力增大;而GABAA受体抑制剂能抑制小鼠过敏性哮喘时杯状细胞增生及黏液过度分泌;GABAB受体激动剂可抑制神经诱导的胆碱能和速激肽介导的气道平滑肌收缩,微血管渗漏及过敏反应。由此可见,GABA系统可影响哮喘疾病发病过程中一些病理生理过程,因此GABA系统对治疗哮喘疾病具有重要价值。     

不同剂量黄芪对脓毒症患者免疫功能和血小板活化因子的干预研究

目的 观察不同剂量黄芪对脓毒症患者免疫功能和血小板活化因子的干预作用,探讨黄芪改善脓毒症患者免疫状态的作用机制。方法 选择南京中医药大学无锡附属医院重症医学科收治的脓毒症患者60例,随机分为常规治疗组（20例,常规西医治疗）、低剂量黄芪组(20例,在常规西医治疗基础上加用黄芪颗粒1.5 g,每日1次）、高剂量黄芪组（20例,在常规西医治疗基础上加用黄芪颗粒3.0 g,每日1次）,5 d为1个疗程。比较3组患者治疗前后急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、序贯器官衰竭（SOFA）评分、外周血淋巴细胞亚群、血小板活化因子（PAF）水平及28 d病死率。结果 治疗后不同剂量黄芪组病人的总T细胞、T辅助淋巴细胞、CD4+/CD8+、B淋巴细胞回升(P<0.05~0.01),而T抑制淋巴细胞、NK细胞下降(P<0.05~0.01),疗效优于常规组（P<0.05）,高剂量组变化较低剂量组差异更显著(P<0.05)。3组患者PAF水平在治疗后均有下降(P<0.05),两黄芪组均优于常规组（P<0.05）,高剂量组PAF较低剂量组下降更明显(P<0.05)。3组患者APACHEⅡ评分、SOFA评分较治疗前明显下降(P<0.05),两黄芪组均优于常规组（P<0.05）。低剂量及高剂量组28 d死亡率较常规组低(P<0.05),两中药组之间无差异（P>0.05）。结论 黄芪颗粒剂能调节脓毒症患者免疫失衡,改善死亡率,并呈剂量依赖性,其作用机制可能是通过调节PAF来实现的。