颌下腺注射间充质干细胞治疗干燥综合征的机制研究

目的探索干燥综合征小鼠颌下腺局部注射间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)后的疗效和机制,为临床应用间充质干细胞治疗干燥综合征提供依据。方法选取公认的非肥胖性糖尿病(non-obese diabetic,NOD)小鼠作为干燥综合征模型,颌下腺部位注射5×10~5MSCs,1个月后,检测小鼠唾液流量,观察颌下腺淋巴细胞浸润情况,采用流式细胞术和TUNEL法检测颌下腺细胞凋亡。结果与对照组相比,颌下腺注射MSCs组小鼠唾液流量明显增加,颌下腺浸润淋巴细胞明显减少,颌下腺细胞凋亡明显减少。结论颌下腺局部注射MSCs可以治疗干燥综合征,其机制在于抑制颌下腺细胞凋亡和减少淋巴细胞浸润,为临床应用MSCs治疗干燥综合征提供了依据。     

系统性红斑狼疮患者巨噬细胞表型和功能初步研究

为了比较健康者与SLE患者巨噬细胞表型和吞噬功能的不同,收集性别、年龄匹配的健康对照者及SLE患者外周血,密度梯度离心法分离单个核细胞,磁珠分选CD14+单核细胞,巨噬细胞集落刺激因子诱导7d,分化为成熟巨噬细胞。FACS检测巨噬细胞表面CD163表达。取健康人CD4+T细胞标记CFSE,在抗CD3、CD28抗体刺激下,以5∶1比例分别与SLE和HC巨噬细胞共培养4d,FACS检测CD4+T细胞增殖比例。紫外辐照Jurkat T细胞株诱导人来源凋亡细胞,将pHrodo Green标记的凋亡细胞(5∶1)与SLE和HC巨噬细胞共培养2h,FACS检测pHrodo+CD14+巨噬细胞的百分率。结果显示,与HC相比,SLE巨噬细胞CD163表达量显著下降;SLE巨噬细胞对CD4+T细胞增殖抑制能力显著降低;SLE巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬功能显著下降。这些结果提示SLE患者巨噬细胞表型、免疫调节能力和吞噬功能存在异常,可能参与其发病。     

系统性红斑狼疮患者骨髓细胞培养上清对间充质干细胞衰老作用的研究

为了探讨SLE患者骨髓局部微环境对间充质干细胞(MSC)衰老的影响及机制。首先收集性别、年龄匹配的健康对照者及SLE患者骨髓各6例,留取上清液并灭活补体;以含10%骨髓上清的DMEM/F12培养基模拟机体骨髓局部微环境,培养脐带来源的MSC;SA-β-gal染色并计数阳性MSC比例;real time PCR及western blot法分别检测MSC的p53、p21基因及蛋白表达水平;荧光显微镜观察MSC核内DNA损伤标记53BP1的表达情况;CCK8检测细胞活力;流式细胞术检测Annexin V/PI评估细胞凋亡。结果显示,与正常对照相比,SLE患者骨髓上清可显著增加β半乳糖苷酶阳性MSC细胞比例,且上调p53和p21的表达量;在SLE患者骨髓上清处理的条件下,MSC细胞内与DNA损伤反应有关的标志性蛋白53BP1的表达水平显著增高;SLE患者骨髓上清还能够明显抑制MSC的增殖能力。这提示SLE患者骨髓上清促进MSC衰老,其机制可能在于诱导MSC细胞核内DNA损伤反应。     

急性输血反应的发生及对策

急性输血反应种类多、诊断复杂,安全和科学处理急性输血反应须遵循一系列原则.本文就急性输血反应的分类、发生及对策方面的进展进行综述.     

核酸扩增及微流芯片技术在献血者HCV筛查中的应用

目的 应用核酸扩增和微流芯片分析方法,用于献血者血液标本丙型肝炎病毒(HCV)的检测.方法 选取80份疑似HCV感染的血液标本,分别采用2种ELISA法、胶体金法、化学发光免疫分析(CLIA)法和核酸扩增后微流芯片法分析.结果 经过核酸扩增的HCV阳性血液经分析后皆出现预期大小片段的特异性条带,而阴性血液缺少相应的条带...     

双精子嵌合体致ABO血型正反定型不符1例简

目的 对1例正定型呈混合凝集的ABO正反定型不符样本进行鉴定.方法 采用微柱凝胶法进行ABO、RhD血型鉴定、直接抗球蛋白试验和不规则抗体筛查,PCR-SSP法进行ABO基因分型,并分析外周血染色体核型.结果 先证者ABO正定型为红细胞混合凝集,反定型检出抗-A1;母亲和父亲分别为O型和AB型.先证者ABO基因座位存在O1、A201和B三个等位基因,其中O1来自母亲,A201和B来自父亲.核型分析显示先证者血液中存在46,XX和46,XY两种细胞,而父母核型正常.结论 先证者为孤雌分裂产生的两个相同的卵子被两个精子受精后所产生的嵌合体.     

异体外周血干细胞移植研究进展

随着集落刺激因子用于外周血干细胞（PBSCs）的动员，使得PBSCs的采集变得容易，PBSCs已成为造血于细胞移植的主要干细胞来源。尽管PBSCs的确切分子标志尚不完全清楚，但是一般认为是外例血中的CD34阳性细胞。PBSCs与骨髓来源的干细胞之间的表型和生物学特征存在很大的差别。外周血干细胞表达更多的定向造血细胞抗原，但是增殖活力不如骨髓来源干细胞。PBSCs移植用于治疗白血病、骨髓瘤和非何杰金氏淋巴瘤等血液疾病，结果表明中性粒细胞和血小板重建时间短，但是移植物抗宿主病增加。移植物抗宿主病增加的原因主要是移植的供者T细胞数目增加的结果。PBSCs移植后的疾病复发率低，而且PBSCs移植后抗肿瘤效应强于骨髓移植，但是其具体机制不明。     

野战运输对红细胞保存的影响

为了研究野战运输条件对几种血液成份的影响，为战时伤病员救治的血液保障提供依据，将红细胞悬液、少白细胞的红细胞悬液和洗涤红细胞经过模拟野战公路（三级公路）运输（震荡）4小时，然后在4℃条件下继续保存15天；取震荡前、后及保存15天的3个时间点的血样，分别进行上清游离血红蛋白、血常规和血生化分析。结果表明：红细胞悬液和少白细胞的红细胞悬液组游离血红蛋白、乳酸脱氢酶和钾离子浓度在震荡前、后及保存15天后的改变没有明显差异，而洗涤红细胞在震荡后上述三项指标显著增加，继续保存15天后，进一步增高。3个组中其它一些血液学指标没有明显的改变。结论：野战运输条件下（三级公路），采取合理的保温和减震措施后，运输4小时内红细胞悬液和少白细胞的红细胞悬液仍然可以继续保存15天并应用于临床，而洗涤红细胞则不能。     

不同负载温度下红细胞内海藻糖和葡萄糖含量比较

目的探索适合海藻糖和葡萄糖联合负载红细胞的温度,为冷冻干燥红细胞提供基础。方法分别采用0mol／L、0．125mol／L、0．25mol／L、0．5mol／L和1mol／L的海藻糖联合葡萄糖在4℃、25℃和37℃负载红细胞6h。然后检测负载红细胞内海藻糖和葡萄糖的浓度。结果4℃和25℃下,海藻糖和葡萄糖联合负载红细胞后,进入红细胞的海藻糖和葡萄糖含量相差不大。37℃下负载红细胞后,负载入红细胞的海藻糖和葡萄糖含量均较4℃组明显增高。结论37℃下负载红细胞,更有利于海藻糖和葡萄糖进入细胞内,能够满足冰冻干燥红细胞的负载要求。