爆发性肝炎小鼠中髓系衍生抑制性细胞对NK细胞活性影响的研究

目的:利用爆发性肝炎小鼠模型,研究髓系衍生抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)在爆发性肝炎进展过程中对自然杀伤细胞(nature killer cell,NK cell)的作用及其相关机制,探讨急性爆发性肝炎的发病机制及可能的干预措施.方法:通过腹腔注射细菌脂多糖和D-半乳糖胺诱发建立爆发性肝炎模型,流式细胞仪分析爆发性肝炎模型不同时间不同组织中MDSCs和NK细胞的比例变化以及NK细胞活性.结果:在模型小鼠中随着肝炎的发展不同组织中的MDSCs的比例增加,肝脏中NK细胞的比例增加,同时,不同组织中NK细胞表达NK细胞活化受体NKG2D的细胞比例增加,NKG2D的平均荧光强度增强.结论:小鼠爆发性肝炎模型中MDSCs能促进NK细胞的活化与增殖,初步揭示了在爆发性肝炎机体中MDSCs及NK细胞参与肝脏损伤的作用机制.     

病毒载体与以树突状细胞为基础的肿瘤基因治疗

树突状细胞（DC）是迄今发现的抗原呈递功能最强的专职抗原呈递细胞，近年来以DC为基础的肿瘤基因免疫治疗研究倍受瞩目。病毒载体介导的基因转移以其高效和良好的靶向性已被广泛应用于肿瘤基因治疗，可用于基因治疗的病毒载体有多种类型，各种载体均有其自身的优势与不足。本文分别就腺病毒、痘苗病毒、单纯疱疹病毒、流感病毒、慢病毒、逆转录病毒等作为病毒载体用于基因转染DC作一述评。     

结肠癌富伴侣分子疫苗的制备及其抗癌作用研究

Objective To prepare the anticolon carcinoma vaccine with rich chaperone peptide and to examine its anticancer immunological efficacy. Methods CT26 colon carcinoma cells were cultured in 1 mg/L Trichosanthin 1640 medium at different temperatures to induce the chaperone expression and promote the synthesis of antigen peptides. Groups of these cells treated under the different condition were lysed by the sonic disintegration, and the lysates were centrifuged. The rawpurified proteins were obtained from the supernatants by precipitating with saturated ammonium sulfate and removing the molecules below 50 000 and above 300 000 in molecular weight via dialysis. Furthermore, the proteins with the molecular weights in 70 000, 90 000, 95 000, 110 000 and 170 000 were collected through gel filtration and SDS-PAGE. The purified proteins were analysed by Western blotting, and inspected on the anticancer immunological effects including lymphocyte proliferation and the activities of NK and CTL. Results Major of the chaperone peptides of anticancer effects in CT26 cells, including antigen peptides joining with HSP70, HSP90, gp96, HSP110 and HSP170, was satisfactorily extracted and condensed, and rich chaperone peptide composites were successfully obtained. The composites prepared under various condition could all enhance lymphocyte proliferation and the activities of CTL and NK (P<0.01). Conclusions The rich chaperone peptide composites are successfully prepared via dialysis, salt fractionation and gel filtration combined with SDS-PAGE. Both the heat stress and Trichosanthin can increase the composites, which treated by 42℃ heat stress and Trichosanthin are found to possess the strongest anticancer efficacy.     

伊贝沙坦对原发性高血压患者CD11b/CD18表达的影响

目的 观察伊贝沙坦对原发性高血压病患者多形核白细胞粘附分子CD11b/CD18 表达的影响及其保护肾脏的可能机制。方法 49例无临床肾病、非糖尿病的原发性高血压患者随机分成伊贝沙坦和氨氯地平治疗组 ,另设正常对照组。原发性高血压病患者治疗前后测定尿白蛋白排泄率、CD11b/CD18 的表达及肿瘤坏死因子-α水平等指标。结果 与正常对照组比较 ,原发性高血压病患者的CD11b/CD18 表达增高 ,肿瘤坏死因子 -α水平也明显增高 (P<0.01)。与氨氯地平治疗组比较 ,伊贝沙坦治疗3个月后 ,原发性高血压病患者的CD11b/CD18 表达、尿白蛋白排泄率和肿瘤坏死因子 -α明显降低 (均P<0.01)。尿白蛋白排泄率下降与肿瘤坏死因子 -α浓度降低和多形核白细胞粘附分子CD11b/CD18 表达的下降呈正相关 (r=0.55 ,0.64,均P<0.01)。结论 原发性高血压患者的多形核白细胞粘附分子CD11b/CD 18 表达增高 ;伊贝沙坦独立于降压作用外保护肾脏的机制可能与其抑制CD11b/CD18 表达有关。     

白细胞介素12单独或联合白细胞介素2对人脐血单个核细胞抗肿？…

目的 探讨白细胞介素１２（ＩＬ－１２）单独或联合白细胞介素２（ＩＬ－２）对人脐血单个核细胞（ＣＲＭＣ）抗肿瘤作用的影响。方法 采用＾３Ｈ－ＴｄＲ释放法测定经ＩＬ－１２和（或）ＩＬ－２刺激的ＣＢＭＣ和人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的抗肿瘤活性,及在电镜下观察激活的ＣＢＭＣ所杀伤的Ｋ５６２细胞的形态特征。结果 ①ＩＵ／ｍｌＩＬ－１２激活的ＧＢＭＣ即产生较强的杀伤活性,对Ｋ５６２及Ｒａｊｉ细胞的杀伤率分     

浙江省杭州市区无偿献血者梅毒螺旋体感染检测分析

目的 调查浙江省杭州市区无偿献血者梅毒螺旋体感染情况和流行因素。方法2002-2007年浙江省血液中心无偿献血者,总计754 293人次,经梅毒螺旋体明胶凝集确诊试验和甲苯胺不加热血清试验确认,梅毒螺旋体IgM阳性为新近感染者。结果杭州市区无偿献血者梅毒总感染率为0.13%。在1007例感染者中,889例为新近感染,118例为既往感染。结论杭州市无偿献血者梅毒总感染率高于欧洲国家,新近感染率逐年上升,需加强对献血者的持续监测和献血前咨询。     

1106例血培养与血浆降钙素原结果分析

血流感染包括菌血症和败血症,是由于致病菌进入血液后生长繁殖并释放毒素和代谢产物,引起急性重症感染性疾病,其发病率和致死率都较高,危害极大.血培养一直以来是血流感染诊断的金标准,但培养耗时较长,至少需要24 ～48 h,由于采样误差的关系,即使一次培养结果阴性也不能排除感染的可能,因此需要一种快速简便的检测方法帮助临床评估患者是否发生血流感染.降钙素原(procalcitonin,PCT)是降钙素的前体,在健康人的外周血中含量很低,当细菌感染时,血浆中的PCT会明显升高.本研究旨在通过回顾性分析1 106例住院患者血培养结果和血浆PCT水平,为临床应用PCT诊断血流感染时提供参考.     

牛膝多糖刺激的DC联合CIK细胞对SW480的杀伤作用研究

从中药材牛膝中提取牛膝多糖(ABPS),用ABPS和/或SW480肿瘤抗原刺激的树突状细胞(DC)联合细胞因子诱导的杀伤性细胞(CIK)对结肠癌细胞株SW480进行杀伤试验,研究ABPS刺激的DC联合CIK细胞的抗肿瘤效果.分离人外周血单个核细胞培养成DC和CIK细胞.①把DC分成4个组合:单纯DC组作为对照组,ABPS刺激DC实验组(ABPS刺激的质量浓度为50 mg·L-1),SW480肿瘤抗原刺激DC实验组,ABPS(50 mg·L-1)和SW480肿瘤抗原联合刺激DC实验组,流式检测比较各组DC细胞表面分子CD80,CD86,CD11c,CD40,HLA-DR的阳性率的差异(每组均为6例样本).②以上述4个组合的DC与CIK细胞以1∶5比例混合共同作为效应细胞;以SW480肿瘤细胞株为靶细胞,设置效靶比分别为30∶1,20∶1及10∶1,进行细胞杀伤活性试验,用CCK-8试剂盒检测、比较各组细胞杀伤活性的差异.③ELISA检测并比较上述细胞杀伤活性试验中效靶比为30∶1的实验组各反应孔(3个复孔)上清液中细胞因子IL-2,IL-12p70,IL-17及TNF-α的分泌水平的差异.结果显示:①ABPS和SW480肿瘤抗原联合刺激的DC表面CD80,CD11c,HLA-DR的阳性率显著高于其他实验组的DC(P＜0.05);CD86,CD40的阳性率显著高于单纯DC实验组(P＜0.05),与其他实验组无显著差异.②在效靶比分别为30∶1,20∶1及10∶1细胞杀伤活性试验中,ABPS刺激的DC+ CIK细胞组、SW480肿瘤抗原刺激的DC+ CIK细胞组对SW480肿瘤细胞株的杀伤活性显著高于DC+ CIK细胞组(P＜0.05);ABPS+ SW480肿瘤抗原+DC+ CIK实验组对SW480肿瘤细胞株的杀伤活性均显著高于其他实验组(P＜0.05).③效靶比为30∶1的细胞杀伤活性试验中,ABPS+ SW480抗原+DC+ CIK细胞组上清液中IL-12p70,TNF-α的分泌水平高于其他实验组,差异具有统计学意义(P＜0.05);IL-2,IL-17的分泌水平各组之间无显著差异.说明ABPS刺激的DC+ CIK细胞对SW480肿瘤细胞株的杀伤活性显著提高,ABPS和SW480肿瘤抗原共同刺激DC能协同CIK提高对SW480肿瘤细胞株的杀伤活性.     

六味地黄汤联合耐受性树突状细胞疫苗对哮喘小鼠的协同治疗作用研究

目的：研究六味地黄汤配合耐受性树突状细胞（DC）疫苗联合应用对哮喘小鼠的治疗作用。方法：以六味地黄汤（LW）和/或抗原特异性的耐受性DC疫苗作用于过敏性哮喘小鼠,观察小鼠支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数目及支气管肺组织病理学改变情况的影响进行研究。结果：本研究成功制备了耐受性DC,并发现六味地黄汤联合耐受性DC在抑制肺炎症细胞浸润尤其是嗜酸性粒细胞方面取得了与注射地塞米松相似的效果,但对减少肺部杯状细胞增生及黏液分泌的作用效果尚不如后者。     

CD4+CD25+调节性T细胞抑制自身免疫性糖尿病的作用机制探讨

1型糖尿病（Type 1 diabetes,T1D）是由于自身反应性T细胞持续活化并破坏胰岛β细胞,使胰岛素分泌功能受损引发的代谢紊乱综合征,属于自身免疫性疾病.在T细胞发育过程中,胸腺可通过阴性选择消除自身反应性T细胞克隆,从而避免自身免疫应答的发生,此即中枢耐受机制.然而,一些自身反应性T细胞能够逃避阴性选择,识别外周组织抗原,从而引起自身免疫病.事实上,所有个体体内都存在自身反应性T细胞,