结肠癌富伴侣分子疫苗的制备及其抗癌作用研究

Objective To prepare the anticolon carcinoma vaccine with rich chaperone peptide and to examine its anticancer immunological efficacy. Methods CT26 colon carcinoma cells were cultured in 1 mg/L Trichosanthin 1640 medium at different temperatures to induce the chaperone expression and promote the synthesis of antigen peptides. Groups of these cells treated under the different condition were lysed by the sonic disintegration, and the lysates were centrifuged. The rawpurified proteins were obtained from the supernatants by precipitating with saturated ammonium sulfate and removing the molecules below 50 000 and above 300 000 in molecular weight via dialysis. Furthermore, the proteins with the molecular weights in 70 000, 90 000, 95 000, 110 000 and 170 000 were collected through gel filtration and SDS-PAGE. The purified proteins were analysed by Western blotting, and inspected on the anticancer immunological effects including lymphocyte proliferation and the activities of NK and CTL. Results Major of the chaperone peptides of anticancer effects in CT26 cells, including antigen peptides joining with HSP70, HSP90, gp96, HSP110 and HSP170, was satisfactorily extracted and condensed, and rich chaperone peptide composites were successfully obtained. The composites prepared under various condition could all enhance lymphocyte proliferation and the activities of CTL and NK (P<0.01). Conclusions The rich chaperone peptide composites are successfully prepared via dialysis, salt fractionation and gel filtration combined with SDS-PAGE. Both the heat stress and Trichosanthin can increase the composites, which treated by 42℃ heat stress and Trichosanthin are found to possess the strongest anticancer efficacy.     

浙江省杭州市区无偿献血者梅毒螺旋体感染检测分析

目的 调查浙江省杭州市区无偿献血者梅毒螺旋体感染情况和流行因素。方法2002-2007年浙江省血液中心无偿献血者，总计754 293人次，经梅毒螺旋体明胶凝集确诊试验和甲苯胺不加热血清试验确认，梅毒螺旋体IgM阳性为新近感染者。结果杭州市区无偿献血者梅毒总感染率为0.13%。在1007例感染者中，889例为新近感染，118例为既往感染。结论杭州市无偿献血者梅毒总感染率高于欧洲国家，新近感染率逐年上升，需加强对献血者的持续监测和献血前咨询。     

病毒载体与以树突状细胞为基础的肿瘤基因治疗

树突状细胞（DC）是迄今发现的抗原呈递功能最强的专职抗原呈递细胞，近年来以DC为基础的肿瘤基因免疫治疗研究倍受瞩目。病毒载体介导的基因转移以其高效和良好的靶向性已被广泛应用于肿瘤基因治疗，可用于基因治疗的病毒载体有多种类型，各种载体均有其自身的优势与不足。本文分别就腺病毒、痘苗病毒、单纯疱疹病毒、流感病毒、慢病毒、逆转录病毒等作为病毒载体用于基因转染DC作一述评。     

爆发性肝炎小鼠中髓系衍生抑制性细胞对NK细胞活性影响的研究

目的:利用爆发性肝炎小鼠模型,研究髓系衍生抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)在爆发性肝炎进展过程中对自然杀伤细胞(nature killer cell,NK cell)的作用及其相关机制,探讨急性爆发性肝炎的发病机制及可能的干预措施.方法:通过腹腔注射细菌脂多糖和D-半乳糖胺诱发建立爆发性肝炎模型,流式细胞仪分析爆发性肝炎模型不同时间不同组织中MDSCs和NK细胞的比例变化以及NK细胞活性.结果:在模型小鼠中随着肝炎的发展不同组织中的MDSCs的比例增加,肝脏中NK细胞的比例增加,同时,不同组织中NK细胞表达NK细胞活化受体NKG2D的细胞比例增加,NKG2D的平均荧光强度增强.结论:小鼠爆发性肝炎模型中MDSCs能促进NK细胞的活化与增殖,初步揭示了在爆发性肝炎机体中MDSCs及NK细胞参与肝脏损伤的作用机制.     

伊贝沙坦对原发性高血压患者CD11b/CD18表达的影响

目的 观察伊贝沙坦对原发性高血压病患者多形核白细胞粘附分子CD11b/CD18 表达的影响及其保护肾脏的可能机制。方法 49例无临床肾病、非糖尿病的原发性高血压患者随机分成伊贝沙坦和氨氯地平治疗组 ,另设正常对照组。原发性高血压病患者治疗前后测定尿白蛋白排泄率、CD11b/CD18 的表达及肿瘤坏死因子-α水平等指标。结果 与正常对照组比较 ,原发性高血压病患者的CD11b/CD18 表达增高 ,肿瘤坏死因子 -α水平也明显增高 (P<0.01)。与氨氯地平治疗组比较 ,伊贝沙坦治疗3个月后 ,原发性高血压病患者的CD11b/CD18 表达、尿白蛋白排泄率和肿瘤坏死因子 -α明显降低 (均P<0.01)。尿白蛋白排泄率下降与肿瘤坏死因子 -α浓度降低和多形核白细胞粘附分子CD11b/CD18 表达的下降呈正相关 (r=0.55 ,0.64,均P<0.01)。结论 原发性高血压患者的多形核白细胞粘附分子CD11b/CD 18 表达增高 ;伊贝沙坦独立于降压作用外保护肾脏的机制可能与其抑制CD11b/CD18 表达有关。     

白细胞介素12单独或联合白细胞介素2对人脐血单个核细胞抗肿？…

目的 探讨白细胞介素１２（ＩＬ－１２）单独或联合白细胞介素２（ＩＬ－２）对人脐血单个核细胞（ＣＲＭＣ）抗肿瘤作用的影响。方法 采用＾３Ｈ－ＴｄＲ释放法测定经ＩＬ－１２和（或）ＩＬ－２刺激的ＣＢＭＣ和人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的抗肿瘤活性,及在电镜下观察激活的ＣＢＭＣ所杀伤的Ｋ５６２细胞的形态特征。结果 ①ＩＵ／ｍｌＩＬ－１２激活的ＧＢＭＣ即产生较强的杀伤活性,对Ｋ５６２及Ｒａｊｉ细胞的杀伤率分     

慢性丙型肝炎的细胞凋亡调节蛋白、白细胞分化抗原54和白介素18的水平及意义

丙型肝炎易演变为慢性或发展为肝硬化或肝癌 ,其发病机制主要为免疫病理损害。我们对可溶性细胞凋亡调节蛋白 (ｓＦａｓ)、白细胞分化抗原 5 4 (ｓＣＤ5 4 )、白介素 18(ＩＬ 18)在慢性丙型肝炎致病过程中的作用进行了探讨 ,并分析其与血清丙氨酸转氨酶 (ＡＬＴ)活性和丙型肝炎病毒核糖核酸 (ＨＣＶ ＲＮＡ)拷贝数的关系及抗病毒治疗疗效考核中的意义。一、材料和方法1 对象 :观察 1998年 7月至 2 0 0 0年 4月期间我院附属第一医院收治的慢性丙型肝炎患者 3 0例 ,男 18例 ,女 12例 ,年龄 17～ 5 4岁 ,均符合 1995年第 5次全国传染病与寄生虫…     

三尖杉酯碱通过下调Mcl-1蛋白诱导NB4细胞凋亡

目的:考察三尖杉酯碱(HT)对人急性早幼粒白血病(APL)细胞株NB4细胞的生长抑制作用和凋亡诱导作用,并探讨其杀伤白血病细胞的作用机制。方法:采用台盼兰染色法,细胞计数,考察HT对NB4细胞的生长抑制作用和细胞毒性作用;采用AO-EB荧光染色法和细胞形态学观察,考察HT对NB4细胞的凋亡诱导作用;采用PI染色的流式细胞术,考察HT对NB4细胞的凋亡诱导作用;采用Western Blotting技术,考察HT对NB4细胞凋亡相关蛋白的影响;采用siRNA干扰技术,沉默目的蛋白证明推论;提取APL患者血液样本,验证HT的凋亡诱导作用及作用机制。结果:HT能够呈剂量依赖和时间依赖地抑制NB4细胞生长并杀伤NB4细胞,HT处理72h后GI50为(32.0±2.5)nmol/L;HT能够呈现剂量依赖和时间依赖的诱导NB4细胞凋亡,HT处理6h后其诱导凋亡百分率为66%;HT诱导NB4细胞凋亡,引起PARP蛋白裂解,并不下调Bcl-2,不影响Bax和Bak的表达,但显著下调Mcl-1蛋白水平;siRNA沉默Mcl-1的蛋白表达可以显著提高HT对NB4细胞的凋亡诱导作用;HT诱导APL患者白血病样本细胞凋亡,并下调Mcl-1蛋白。结论:HT通过抑制细胞生长和诱导细胞凋亡杀伤NB4细胞,HT可能通过下调Mcl-1蛋白发挥诱导NB4细胞凋亡的抗白血病作用。     

六味地黄汤联合耐受性树突状细胞疫苗对哮喘小鼠的协同治疗作用研究

目的：研究六味地黄汤配合耐受性树突状细胞（DC）疫苗联合应用对哮喘小鼠的治疗作用。方法：以六味地黄汤（LW）和/或抗原特异性的耐受性DC疫苗作用于过敏性哮喘小鼠,观察小鼠支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数目及支气管肺组织病理学改变情况的影响进行研究。结果：本研究成功制备了耐受性DC,并发现六味地黄汤联合耐受性DC在抑制肺炎症细胞浸润尤其是嗜酸性粒细胞方面取得了与注射地塞米松相似的效果,但对减少肺部杯状细胞增生及黏液分泌的作用效果尚不如后者。     

CD4+CD25+调节性T细胞抑制自身免疫性糖尿病的作用机制探讨

1型糖尿病（Type 1 diabetes,T1D）是由于自身反应性T细胞持续活化并破坏胰岛β细胞,使胰岛素分泌功能受损引发的代谢紊乱综合征,属于自身免疫性疾病.在T细胞发育过程中,胸腺可通过阴性选择消除自身反应性T细胞克隆,从而避免自身免疫应答的发生,此即中枢耐受机制.然而,一些自身反应性T细胞能够逃避阴性选择,识别外周组织抗原,从而引起自身免疫病.事实上,所有个体体内都存在自身反应性T细胞,