吴门调脂颗粒对大鼠平滑肌细胞自噬的干预研究

目的:探究吴门调脂颗粒对大鼠平滑肌细胞(VSMCs)的自噬在细胞、蛋白质、基因等水平的影响。方法:运用血清药理学方法,以调脂颗粒含药血清、6-氨基-3-甲基嘌呤(3-MA)、雷帕霉素(Rapamycin)诱导处理VSMCs,通过MTT检测调脂颗粒含药血清对细胞生长增殖的影响,Western blotting检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的相对表达量变化,免疫荧光法检测细胞内自噬小体的数目变化,Real time PCR检测自噬相关基因表达变化。结果:调脂颗粒含药血清处理VSMCs后,细胞生存率无明显改变,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的相对表达上调,自噬小体数量增多,自噬相关基因表达上调(P0.05)。雷帕霉素联合调脂颗粒含药血清处理VSMCs后,细胞生存率下降,较雷帕霉素组LC3-Ⅱ的相对表达下降,自噬小体数量显著减少,自噬相关基因表达下调(P0.05或P0.01)。结论:吴门调脂颗粒可以通过多个层面抑制平滑肌细胞的异常增殖及过度自噬,促进平滑肌细胞适度自噬。     

自噬在心血管疾病中的影响及中药的干预作用

<正>自噬是一种通过促进溶酶体消化分解受损或衰老的蛋白质、大分子和细胞器,从而调节细胞内的平衡,避免细胞凋亡和损伤的自体机制。在心血管疾病如心肌缺血、心衰和动脉粥样硬化等疾病的进程中,自噬均产生一定的影响。结合现代医学研究,较多学者发现,自噬与中医也存在着相关性。中医学不仅可以从理论上阐述自噬,中药提取物及方剂也能调节自噬,从而改善心血管功能。本文将近年来的相关研究做一综述。现报告如下:     

吴门调脂颗粒对内皮细胞自噬的干预研究

目的研究调脂颗粒对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)在细胞、蛋白质、分子水平自噬的影响。方法运用血清药理学方法,以调脂颗粒含药血清、6-氨基-3-甲基嘌呤(3-MA)、雷帕霉素(Rapamycin)诱导处理HUVECs,通过MTT比色法检测调脂颗粒含药血清对细胞生长的影响,Western blot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的相对表达量变化,免疫荧光法检测细胞内自噬小体的数目变化。结果调脂颗粒含药血清处理HUVECs后,细胞活力无明显改变,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的相对表达上调,自噬小体数量显著增加(P0.05)。调脂颗粒含药血清联合雷帕霉素处理HUVECs后,细胞活力无明显改变,较雷帕霉素单独处理自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的相对表达显著下降,自噬小体数量显著减少(P0.05或P0.01)。结论调脂颗粒能抑制内皮细胞的过度自噬,促进内皮细胞适度自噬。     

培补二天膏对老年自发性高血压大鼠血管形态及一氧化氮、血管紧张素Ⅱ的影响

【目的】 观察培补二天膏对老年自发性高血压大鼠（SHR）血压及血管的影响。【方法】 将50只SHR大鼠随机分为模型组,西药对照组,膏方低、中、高剂量组,每组10只;另将10只Wistar京都大鼠（WKY）作为正常对照组。膏方低、中、高剂量组给予培补二天膏混悬液（对应剂量分别为0.58、1.15、3.46 g·kg-1·d-1）灌胃;西药对照组给予厄贝沙坦混悬液（剂量为10.13 mg·kg-1·d-1）灌胃;模型组与正常对照组给予同体积蒸馏水灌胃。共4周,期间每周监测收缩压（SBP）。给药结束后,测血清一氧化氮（NO）、血管紧张素II（AngⅡ）含量,苏木素-伊红染色（HE）观察胸主动脉组织病理改变。【结果】（1）实验过程中,模型组SBP始终高于正常对照组（P＜0.01）;膏方各剂量组及西药对照组干预1 ~ 4周后均能降低SBP;与模型组比较,膏方中剂量组治疗 4 周降压明显（P＜0.01）,膏方高剂量组与西药对照组治疗 1 周即出现明显的降压效果（P＜0.05）。（2）与正常对照组比较,模型组血清NO含量明显下降,AngⅡ含量明显升高（均P＜0.05）;与模型组比较,膏方高剂量组NO含量明显升高,AngⅡ含量明显降低（均P＜0.05）,西药对照组AngⅡ含量降低明显（P＜0.05）。（3）胸主动脉组织病理HE染色结果显示：SHR 大鼠胸主动脉形态学明显改变;膏方各剂量组及西药对照组均可改善 SHR 大鼠胸主动脉形态学变化。【结论】 培补二天膏可有效降压及保护血管,其作用可能是通过调节血液中AngⅡ和NO的水平来实现。     

培补二天膏对老年自发性高血压大鼠血管形态及一氧化氮、血管紧张素Ⅱ的影响

【目的】观察培补二天膏对老年自发性高血压大鼠(SHR)血压及血管的影响。【方法】将50只SHR大鼠随机分为模型组,西药对照组,膏方低、中、高剂量组,每组10只;另将10只Wistar京都大鼠(WKY)作为正常对照组。膏方低、中、高剂量组给予培补二天膏混悬液(对应剂量分别为0.58、1.15、3.46 g·kg^-1·d^-1)灌胃;西药对照组给予厄贝沙坦混悬液(剂量为10.13 mg·kg^-1·d^-1)灌胃;模型组与正常对照组给予同体积蒸馏水灌胃。共4周,期间每周监测收缩压(SBP)。给药结束后,测血清一氧化氮(NO)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量,苏木素-伊红染色(HE)观察胸主动脉组织病理改变。【结果】(1)实验过程中,模型组SBP始终高于正常对照组(P<0.01);膏方各剂量组及西药对照组干预1~4周后均能降低SBP;与模型组比较,膏方中剂量组治疗4周降压明显(P<0.01),膏方高剂量组与西药对照组治疗1周即出现明显的降压效果(P<0.05)。(2)与正常对照组比较,模型组血清NO含量明显下降,AngⅡ含量明显升高(均P<0.05);与模型组比较,膏方高剂量组NO含量明显升高,AngⅡ含量明显降低(均P<0.05),西药对照组AngⅡ含量降低明显(P<0.05)。(3)胸主动脉组织病理HE染色结果显示:SHR大鼠胸主动脉形态学明显改变;膏方各剂量组及西药对照组均可改善SHR大鼠胸主动脉形态学变化。【结论】培补二天膏可有效降压及保护血管,其作用可能是通过调节血液中AngⅡ和NO的水平来实现。     

培补二天膏对自发性高血压大鼠血压及心脏重构的影响

[目的]观察培补二天膏对老年自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)血压、炎性细胞因子和心脏重构的影响,探讨其降压疗效及改善心脏重构的可能机制。[方法]选取12月龄雄性SHR共50只,基础血压测定达标后随机分为5组:阴性对照组,膏方低、中、高剂量组,厄贝沙坦组;另选取同月龄Wistar Kyoto(WKY)大鼠9只作为WKY组。膏方组分别予0.58g/(kg·d)、1.15g/(kg·d)和3.46g/(kg·d)培补二天膏膏方灌胃,厄贝沙坦组以厄贝沙坦10.13mg/(kg·d)灌胃,阴性对照组及WKY组予温蒸馏水灌胃,各组灌胃均为4周。采取尾动脉搏动测量法,测定给药后每周大鼠尾动脉收缩压(systolic blood pressure,SBP),4周后检测各组大鼠血清白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-2、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平,同时测定各组大鼠心脏重量指数(heart mass index,HMI)。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色后镜下观察心室肌切片的病理学形态改变。[结果]灌胃4周后,阴性对照组血压高于WKY组(P＜0.01);膏方中剂量及高剂量组血压较阴性对照组降低(P＜0.01)。阴性对照组血清IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α水平均高于WKY组(P＜0.01、P＜0.05);膏方各剂量组SHR血清IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α水平均低于阴性对照组(P＜0.01)。灌胃4周后,阴性对照组HMI高于WKY组(P＜0.01);膏方高剂量组及厄贝沙坦组HMI低于阴性对照组(P＜0.05)。镜下观察发现,膏方高剂量组及厄贝沙坦组心肌细胞肥大减轻,间质炎性细胞浸润较阴性对照组及膏方低剂量组明显减少。[结论]中、高剂量培补二天膏降低SHR血压的疗效确切,高剂量还能够改善SHR心脏重构。培补二天膏的降压疗效可能与炎性细胞因子的降低有关,并可通过降压及降低炎性细胞因子的作用改善心脏重构。