地塞米松治疗重症急性胰腺炎大鼠胰性脑病的研究

【目的】探讨地塞米松治疗重症急性胰腺炎（SAP）大鼠胰性脑病的治疗效果。【方法】将实验用大鼠随机分成3组，采用改良AhoS法制作SAP模型。A组为地塞米松治疗组：SAP制模后3h给予大鼠地塞米松治疗；B组为SAP大鼠空白对照组、C组为假手术组。分别检测各组模型制作成功后24h的血清髓鞘碱性蛋白（MBP），血清淀粉酶（AMS）、白细胞介素-6（IL-6）水平及脑水含量和脑组织细胞超微结构的变化。【结果】B组中大鼠血清AMS、MBP、IL-6、脑水含量水平显著高于C组与A组，且差异均有显著性（P均〈0．05）。C组大鼠脑细胞超微结构正常，无病变；B组大鼠神经元细胞核出现明显的边集现象，线粒体、内质网均出现不同程度的变性；A组大鼠脑细胞线粒体有轻度肿胀，细胞核、内质网无异常。【结论】地塞米松可有效的控制SAP炎症的发生扩散，降低胰性脑病发生率。     

肺源性一氧化氮过度表达在急性坏死性胰腺炎肺损伤中的作用

目的 探讨肺源性一氧化氮（NO）过度表达对急性坏死性胰腺炎（ANP）肺损伤的影响。方法 将72只成年SD大鼠随机分为三组各24只。ANP组、ANP预处理组（预处理组）逆行性胰胆管注射5％牛磺酸钠建立ANP大鼠模型，对照组注射等量生理盐水。造模前30min，预处理组腹腔注射N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）10mg／kg。造模后1、3、6、12h分别处死大鼠各6只，取肺泡巨噬细胞（AM）检测NO水平及诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）mRNA表达情况及TNF-a水平，并行肺组织病理学检查。结果 ANP组肺损伤随时间延长而逐渐加重；AM分泌TNF-a，NO水平逐渐升高，至6h达到高峰，12h回落。AMiNOS mRNA的表达情况与NO的变化趋势相似。预处理组各指标变化趋势与ANP组相似，但各指标均低于ANP组（P均〈0．05）；肺组织髓过氧化物酶（MPO）、支气管肺泡灌洗液（BALF）蛋白含量、肺组织湿／干重值逐渐升高，12h达最高值．动脉血氧分压值逐渐降低。结论 ANP发生后肺泡AM的iNOS表达增强，肺源性NO过量表达，并促进TNF-a大量分泌，加重肺损伤，应用iNOS抑制剂则能减轻肺损伤。     

抗TNF—α治疗对重症急性胰腺炎肺损伤NF—κBB信号通路的影响

目的 探讨抗肿瘤坏死因子α(TNF-α)治疗对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺泡巨噬细胞(AM)细胞核因子κB(NF-κB)信号通路的影响.方法 SD大鼠随机分为对照组、SAP组、抗TNF-α抗体治疗组.每组再分为术后1,3,6,12 h 4个时相组,每时相6只.逆行性胰胆管注射5 %牛磺酸钠建立SAP大鼠模型.从支气管肺泡灌洗液(BALF)获取AM,检测AM分泌TNF-α水平,并检测BALF中蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶(MPO)水平.以RT-PCR法测定AM TNF-αmRNA的表达.行肺组织病理学检查及免疫组化检查NF-κB的表达.结果 对照组肺组织较少有NF-κB活化的AM,SAP各组肺组织均可见NF-κB活化,且随时间进展NF-κB由细胞质逐渐进入细胞核.TNF-α抗体治疗组仍有少量NF-κB活化.ANP大鼠肺损伤随病情进展而加重.肺组织MPO及BALF蛋白含量随时间延长而升高,12 h达最高值,分别为(10.78±0.58) U/g和 (2 011.0±105.5)μg/mL.AM分泌TNF-α水平也逐渐升高,至6h达高峰[(1 624.2±149.2) pg/mL],12 h回落.TNF-αmRNA 的表达与TNF-α的变化趋势相似.SAP大鼠上述各组指标与正常对照组相比均有统计学差异(P＜ 0.05).TNF-α抗体治疗组各指标仍显著高于正常对照组(P＜0.05),但低于SAP组(P＜0.05).AM分泌TNF-α活性与MPO及BALF蛋白含量呈正相关(r=0.65, 0.76, P＜0.01).结论 抗TNF-α治疗可抑制SAP大鼠的TNF-α对AM NF-κB活化的反馈激活作用,并可直接减少TNF-α,进而减轻肺损伤.     

N-乙酰-L-半胱氨酸对急性胰腺炎大鼠脑保护作用的实验研究

目的探讨N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)对急性胰腺炎(AP)大鼠脑组织损坏的保护作用,为临床应用NAC治疗胰性脑病(PE)提供实验依据。方法将90只SD大鼠随机分成正常对照组,经胰胆管逆行注射5%牛黄胆酸钠复制AP模型组和AP伴NAC处理组。AP伴NAC组在注射牛黄胆酸同时静脉注射NAC。造模后第24 h,处死所有实验组大鼠检测脑组织水含量、肿瘤坏死因子α和丙二醛(MDA)的含量以及微血管内白细胞聚集附壁,在电镜下观察海马CA1区结构。结果经NAC干预后,脑组织含水量、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、丙二醛量以及微血管内白细胞聚集附壁现象显著降低。结论 NAC对大鼠急性胰腺炎时的脑损伤有明显的保护作用。     

TLCK对急性出血坏死性胰腺炎大鼠肺损伤的影响

目的:探讨盐酸 对甲苯磺酰 L 赖氨酸氯甲基甲酮(TLCK)对急性出血坏死性胰腺炎（AHNP）肺损伤的保护作用。方法:将SD 大鼠随机分为7组，每组10只：①组为注射生理盐水的正常对照组；②组为生理盐水静脉注射的AHNP对照组；③组为5 μg/kg TLCK干预AHNP组；④组为10 μg/kg TLCK干预组；⑤组为20 μg/kg TLCK干预AHNP组。②～⑤组均于AHNP模型制成后立即静脉给予干预药物； ⑥组为制AHNP模型30min前TLCK干预组；⑦组为制AHNP模型30 min后TLCK干预组（后2组TLCK均以10 μg/kg剂量给药）。上述7组动物检测7d生存率，用于筛选TLCK的最佳给药时间和剂量。AHNP模型采用逆行性胰胆管注射5%牛磺胆酸钠建立。根据筛选结果再将实验动物分为：假手术对照组（N组），AHNP组（P组），TLCK干预组（于AHNP模型制成后立即静脉给予TLCK 10 μg/kg）（ T组）。每组大鼠6只。后3组手术后6 h处死动物，行支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞（AM），并测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中蛋白含量；检测AM中NF κB活化情况及AM分泌TNFα水平。测定肺组织髓过氧化物酶（MPO）的变化，并行组织学检查。结果:①～⑦组 7d生存率分别为100％，0％，70％，100％，80％，0％和90％。N组肺组织MPO活性较低，BALF蛋白含量亦低；P组和T组显著高于N组（P＜0.05）， 而T组显著低于P组（P＜0.05）。N组AM可检测到低水平TNFα活性，P组AM分泌TNFα活性明显高于N组及T组（P＜0.05）N组亦显著低于T组（P＜0.05）。NF κB在N组不表达，P组高表达，T组低表达。结论:TLCK可通过抑制NF κB表达，减少炎症细胞因子的分泌，明显减轻AHNP所致肺损伤。TLCK干预的最佳剂量为10 μg/kg,最佳时间为AHNP发生后即时给药。     

抗TNF-α治疗对重症急性胰腺炎肺损伤NF-κB信号通路的影响

目的 探讨抗肿瘤坏死因子α(TNF-α)治疗对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺泡巨噬细胞(AM)细胞核因子κB(NF-κB)信号通路的影响.方法 SD大鼠随机分为对照组、SAP组、抗TNF-α抗体治疗组.每组再分为术后1,3,6,12 h 4个时相组,每时相6只.逆行性胰胆管注射5 %牛磺酸钠建立SAP大鼠模型.从支气管肺泡灌洗液(BALF)获取AM,检测AM分泌TNF-α水平,并检测BALF中蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶(MPO)水平.以RT-PCR法测定AM TNF-αmRNA的表达.行肺组织病理学检查及免疫组化检查NF-κB的表达.结果 对照组肺组织较少有NF-κB活化的AM,SAP各组肺组织均可见NF-κB活化,且随时间进展NF-κB由细胞质逐渐进入细胞核.TNF-α抗体治疗组仍有少量NF-κB活化.ANP大鼠肺损伤随病情进展而加重.肺组织MPO及BALF蛋白含量随时间延长而升高,12 h达最高值,分别为(10.78±0.58) U/g和 (2 011.0±105.5)μg/mL.AM分泌TNF-α水平也逐渐升高,至6h达高峰[(1 624.2±149.2) pg/mL],12 h回落.TNF-αmRNA 的表达与TNF-α的变化趋势相似.SAP大鼠上述各组指标与正常对照组相比均有统计学差异(P＜ 0.05).TNF-α抗体治疗组各指标仍显著高于正常对照组(P＜0.05),但低于SAP组(P＜0.05).AM分泌TNF-α活性与MPO及BALF蛋白含量呈正相关(r=0.65, 0.76, P＜0.01).结论 抗TNF-α治疗可抑制SAP大鼠的TNF-α对AM NF-κB活化的反馈激活作用,并可直接减少TNF-α,进而减轻肺损伤.     

诱导型一氧化氮合成酶在大鼠坏死性胰腺炎肺泡巨噬细胞的表达

目的通过研究诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)在急性坏死性胰腺炎(ANP)肺泡巨噬细胞(AM)中的表达,明确其在ANP所致肺损伤中的作用。方法72只成年SD大鼠随机分为正常对照组、ANP组、N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)组,每组24只。逆行性胰胆管注射3%牛磺酸钠建立ANP大鼠模型。经支气管肺泡灌洗获取AM,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶(MPO)水平,AM分泌iNOS水平及iNOSmRNA表达情况,并行肺组织学检查。结果ANP大鼠AM iNOS的表达随时间进展而增强,同时肺损伤也逐渐加重。L-NAME组则恰好相反,与ANP组相比有显著性差异(P<0.05)。结论ANP发生后,肺泡巨噬细胞iNOS表达增强,并促进肺损伤。     

核因子κB活化对急性坏死性胰腺炎肺泡巨噬细胞炎症介质表达的影响及意义

目的探讨核因子κB（NF-κB）活化对急性坏死性胰腺炎（ANP）肺泡巨噬细胞（AM）分泌炎症介质的影响和对肺损伤的影响。方法30只成年SD大鼠随机分为正常对照组、ANP后1、3、6、12h组，每组6只。逆行性胰胆管注射5％牛磺酸钠建立ANP大鼠模型，正常对照组大鼠自胆胰管内逆行注入生理盐水。经支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞，检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶（MPO）水平、肺泡巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α（TNFα），一氧化氮（N0）水平，测定肺泡巨噬细胞TNFαmRNA、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达情况。行肺组织的病理学检查并评分，同时行免疫组化检查肺组织中NF-κB的表达。结果正常肺组织较少见到NFκB活化的AM，ANP各组肺组织均可见到NF-κB活化，并且随时间进展NF-κB逐渐由细胞质更多进入细胞核。ANP大鼠肺损伤随着病情进展而逐渐加重，肺组织MPO及支气管肺泡灌洗液中蛋白含量逐渐升高；肺泡巨噬细胞分泌TNFα，NO水平逐渐升高，至6h达到高峰，12h又回落。ANP发生后，肺泡巨噬细胞TNFαmRNA、iNOSmRNA的表达情况与TNFα，NO的变化趋势相似。ANP大鼠各组指标与正常对照组相比均有统计学差异（P〈0．05）。结论ANP形成后，NF-κB发生活化，使AM炎症介质表达增强，并促进肺损伤。     

结直肠癌初治患者外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值与临床病理特征的关系及其预后价值分析

目的 探讨结直肠癌初治患者外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)与临床病理特征及预后的关系.方法 选取结直肠癌患者387例,观察患者术前NLR与临床病理特征及预后的关系.结果 不同性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移、浸润程度和分化程度结直肠癌患者的NLR比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);血小板≥350×109/L结直肠癌患者的术前NLR高于血小板﹤350×109/L的患者(P﹤0.05);TNM分期为Ⅲ、Ⅱ期结直肠癌患者的术前NLR均高于Ⅰ期患者(P﹤0.05);高NLR组患者的中位生存时间为35.41个月(95%CI:25.93~46.03),低于低NLR组的42.81个月(95%CI:33.39~58.10)(P﹤0.05);低NLR组TNM分期为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者的中位生存期分别为42.65个月、42.01个月和41.04个月,差异无统计学意义(χ2=2.382,P﹥0.05);高NLR组TNM分期为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者的中位生存期分别为37.03个月、36.52个月和35.02个月,差异无统计学意义(χ2=3.082,P﹥0.05).结论 结直肠癌初治患者术前NLR与患者的临床病理特征及预后有一定关系,值得进一步研究.     

N-乙酰半胱氨酸对重症急性胰腺炎大鼠血-脑屏障及脑组织损害的保护作用

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠血-脑屏障(BBB)及脑组织损害的保护作用.方法 30只SD大鼠随机分为假手术组(SO组)、SAP组、NAC干预组(NAC组),每组10只大鼠.从胰胆管逆行注入5％牛磺酸钠(0.1 ml/100 g)制作SAP模型.分别于造模后3h、6h、12h将大鼠处死,取脑.采用光镜、电镜观察大鼠脑组织病理变化,免疫组化染色检测与BBB有关的3种细胞骨架蛋白:胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、凋亡相关基因(Bcl-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达.结果 NAC组各时间点大鼠脑组织病理评分明显低于SAP组(均P＜0.01).SAP组和NAC组各时间点Bcl-2、GFAP、MMP-9阳性细胞数均明显多于SO组(均P＜0.01).NAC组各时间点Bcl-2、GFAP阳性细胞数均明显多于SAP组(均P＜0.01),MMP-9阳性细胞数明显少于SAP组(均P＜0.01).结论 NAC能调节SAP大鼠的炎症因子表达,明显减轻其BBB的损害,对脑组织具有保护作用.