不同方法移植骨髓间充质干细胞治疗急性心肌梗死效果比较

目的:比较经心外膜、静脉移植骨髓间充质干细胞(MSCs)治疗大鼠急性心肌梗死(AMI)的效果,为临床选择移植方法提供依据。方法:体外获取、培养大鼠骨髓MSCs。建立AMI模型,分别经心外膜、静脉移植5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记的MSCs。移植3周后超声测算左心室射血分数(LVEF)、短轴缩短率(FS);右颈总动脉插管检测血流动力学指标;免疫组化分析心肌内MSCs。结果:静脉移植组、心外膜移植组LVEF、FS较对照组均升高(P<0.05),心外膜移植组比静脉移植组升高更明显(P<0.05)。静脉移植组、心外膜移植组左心室收缩压、压力变化上升及下降速率最大值升高,左心室舒张末期压降低,心外膜移植组的变化比静脉移植组更明显(P<0.05)。心外膜移植组梗死心肌内BrdU阳性的MSCs数多于静脉移植组。结论:经心外膜移植MSCs治疗AMI的效果优于静脉移植途径。     

复康片对卡马西平致大鼠消化系统损害的防护作用

目的:研究中药复康片对卡马西平所致大鼠消化系统损伤的防护作用。方法:将48只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、中药预防组、中药治疗组共4组,每组12只。正常对照组正常喂养,每天灌胃蒸馏水,其余不做任何处理。其余3组制备CBZ致消化系统损伤模型,预防组在造模同时灌服复康片,治疗组造模第30天开始灌服复康片,剂量均为1500mg.kg-1.d-1,1次/d。90d后,处死所有大鼠,检查肝功能,观察肝、胃、回肠组织病理学变化。结果:与正常对照组比较,模型对照组肝功能异常,AST、ALT、ALP升高,ALB降低,线粒体、内质网水肿。肝细胞弥漫性水肿、点状坏死明显,胃、肠粘膜上皮细胞水肿,浅表溃疡形成,炎性细胞浸润,中药预防组核膜结构清晰完整,粗面内质网结构正常,含有丰富的核糖体,线粒体形态结构正常。中药治疗组线粒体仍有轻度肿胀,中药预防组和治疗组AST、ALT、ALP活性均显著降低,ALB升高,可使卡马西平所导致的肝脏、胃、肠组织学的损伤减轻,防止肝细胞水肿、减轻胃、肠粘膜上皮细胞的水肿和间质炎细胞浸润,结论:复康片可对卡马西平致消化系统的损害有一定的防护作用。     

不同细胞移植对大鼠心肌梗死后修复的影响

目的 观察骨髓间充质干细胞(MSCs)和MSCs诱导后分别移植对急性心肌梗死(AMI)修复的影响,比较不同细胞移植的作用.方法 获取、培养大鼠骨髓MSCs;5-氮胞苷(5-aza)诱导MSCs,免疫细胞化学法和RT-PCR检测诱导后MSCs特性.结扎大鼠左冠状动脉前降支,建立急性心肌梗死模型,分三个组.对照组:梗死部位中央及四周移植磷酸盐缓冲液(PBS),50μl/点;MSCs移植组和MSCs诱导组:在上述部位分别移植MSCs、诱导的MSCs,2×106个/50μl/点.3周后,超声观察心室腔大小、室壁厚度及运动幅度,检测左室射血分数(EF%)、短轴缩短率(FS%);血流动力学测定左室收缩压(LVSP)、舒张末压(LVEDP)、压力变化最大速率(±dp/dtmax)等指标;免疫组化分析心肌组织中移植细胞情况.结果 诱导的MSCs对心肌肌钙蛋白T(cTnT)、连结蛋白43(Cx-43)表达阳性.MSCs移植组、MSCs诱导组与对照组相比,左室前壁运动增强,FS%、LVSP、±dp/dtmax均升高、LVEDP降低(P＜0.05),MSCs诱导组改变更明显(P＜0.05).MSCs移植组、MSCs诱导组心肌组织中移植细胞对cTnT、Cx-43表达阳性.结论 MSCs移植、MSCs诱导后移植对大鼠AMI均有修复作用,MSCs诱导后移植对AMI心功能的改善作用更明显.     

适量运动和甲状腺激素对大鼠肝脏氧化应激反应的影响

目的观察适量运动和甲状腺激素对大鼠肝脏H₂O₂含量和抗氧化能力的影响。方法将64只Wistar大鼠随机分为8组:对照组（C）、轻度甲亢组（T₁）、重度甲亢组（T₂）、甲减组（J）、运动对照组（E）、轻度甲亢运动组（ET-1）、重度甲亢运动组（ET-2）、甲减运动组（EJ）。C组生理盐水灌胃,T₁和T₂组分别给予左旋甲状腺素钠100和200μg/d灌胃,J组给予甲巯咪唑10 mg/d灌胃,运动为负重6%体重游泳训练30 min/d。喂养14 d后,检测肝组织匀浆中的H₂O₂含量、谷胱甘肽过氧化酶（GPx）活力、超氧化物歧化酶（SOD）活力以及丙二醛（MDA）含量。结果非运动条件下,甲亢组与对照组比较,H₂O₂、GPx、SOD和MDA水平均增高,差异有统计学意义（P<0.05）;甲减组与对照组比较,H₂O₂、GPx、SOD和MDA水平均降低,差异有统计学意义（P<0.05）;甲亢运动组和甲减运动组与运动对照组比较,H₂O₂、GPx、SOD和MDA水平均增高,差异有统计学意义（P<0.05）;甲状腺激素水平异常的运动组与对应非运动组比较,H₂O₂、GPx、SOD和MDA水平均增高,差异有统计学意义（P<0.05）;而甲状腺激素水平正常的运动对照组与对应非运动组比较,MDA差异无统计学意义（P>0.05）。结论运动和甲亢均可诱发大鼠肝脏H₂O₂含量和抗氧化酶活力增高,二者有一定的协同作用;甲亢、甲亢合并运动和甲减合并运动均会诱发失代偿性氧化损伤,单纯的适量运动不会诱发氧化损伤。     

他汀类药物干预后细胞再移植对梗死心肌的影响

目的 观察在应用阿托伐他汀基础上进行间充质干细胞(MSCs)移植对梗死心肌修复的影响及其治疗急性心肌梗死(AMI)的可行性.方法 体外获取、培养大鼠骨髓MSCs;结扎左冠状动脉前降支,建立AMI模型.存活大鼠随机分为4组:应用阿托伐他汀并行MSCs移植组(A组)、阿托伐他汀组(B组)、MSCs移植组(C组)、AMI对照组(D组).A、B组术后给予阿托伐他汀10 mg/(kg·d)溶水2 ml,灌喂10 d;C、D组正常喂养.10 d后再次开胸,A、c组分别在梗死部位5个点移植MSCs,每点2×106/50μl;B、D组于相同部位注射同剂量磷酸盐缓冲液.3周后,检测左心室射血分数(LVEF)以及左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)、压力变化最大速率(±dp/dtmax)等指标;免疫组化检测细胞和组织学变化.结果 A、C组与B、D组相比,左心室前壁运动增强,LVEF、LVSP、±dp/dtmax均升高(均P＜0.05),LVEDP降低(P＜0.05),A组较C组改变更明显(P＜0.05).A、C组的梗死心肌内可见5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记阳性细胞.对心肌肌钙蛋白T(cTnT)、连接蛋白43(Cx-43)呈现阳性表达.结论 应用阿托伐他汀基础上进行MSCs移植对AMI大鼠心功能有明显的改善作用.     

适量运动和甲状腺激素对大鼠心脏氧化应激反应的影响

目的 观察适量运动和甲状腺激素对大鼠心脏H2O2含量和抗氧化能力的影响.方法 将64只Wistar大鼠随机分为8组:对照组(C)、轻度甲亢非运动组(T1)、重度甲亢非运动组(T2)、甲减非运动组(J)、运动组(E)、轻度甲亢运动组(ET1)、重度甲亢运动组(ET2)、甲减运动组(EJ).C组生理盐水灌胃,T1和T2组分别给予左旋甲状腺素片100和200 μg/d灌胃,J组给予甲巯咪唑10 mg/d灌胃,运动为负重6％体重游泳训练30 min/d.喂养14d后,检测心脏组织匀浆中的H2O2含量、谷胱甘肽过氧化酶(GPx)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力以及丙二醛(MDA)含量.结果 甲亢组和甲亢运动组与相应对照组比较,H2O2有升高趋势而GPx有降低趋势(P＞0.05),MDA含量增高,差异有统计学意义(P＜0.05).甲减非运动组和甲减运动组与相应对照组比较,GPx和SOD活力均升高,差异有统计学意义(P＜0.05).与相应对照组比较,甲减非运动组MDA含量降低,而甲减运动组MDA含量升高,差异有统计学意义(P＜0.05).甲状腺激素水平异常的运动组与对应非运动组比较,心肌组织的H2O2含量、GPx活力和MDA含量均升高,但SOD活力降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 甲亢非运动、甲亢运动和甲减运动均会诱发失代偿性氧化损伤,适量运动不会诱发氧化损伤.     

儿茶素对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用及机制

目的探讨儿茶素对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用及机制。方法40只大鼠随机分成5组,假手术组、模型组和儿茶素低、中、高剂量(50,100,200mg·kg-1)组。采用改良的线栓法制备大鼠局灶性脑缺血(2h)/再灌注(24h)损伤模型,儿茶素各组于缺血前30min和缺血后2h腹腔注射儿茶素溶液,假手术组和模型组给与等体积的NS。再灌注24h,用改良的Bederson评分法对大鼠进行神经功能缺损评分后,进行海马组织形态学观察及MPO和NOS活性测定。结果儿茶素可降低大鼠脑缺血/再灌注损伤的神经功能缺损评分,能不同程度地改善脑组织学损伤,并且降低脑组织中MPO和NOS的活性。结论儿茶素对大鼠脑缺血/再灌注损伤有保护作用,作用机制之一可能与抗炎、抗氧化有关。     

骨髓间充质干细胞不同移植方法对急性心肌梗死心功能的改善作用比较

目的:观察不同方法移植骨髓间充质干细胞对心功能的影响,分析移植方法与心功能改善的关系。方法:实验于2004-02/2005-10在郑州大学医学院干细胞中心和机能中心完成。体外获取、培养大鼠骨髓间充质干细胞。结扎左冠状动脉前降支制备大鼠急性心肌梗死模型,结扎后观察前壁心肌颜色变苍白、收缩力减弱、心电图相应导联ST段弓背向上抬高,确定心肌梗死模型建立。将建模成功的大鼠分成4组,每组10只,2周后进行细胞移植。静脉对照组:尾静脉注射L-DMEM0.6mL;静脉移植组:尾静脉注射5溴脱氧尿嘧啶标记骨髓间充质干细胞悬液0.6mL;心外膜对照组:在大鼠心肌梗死区分8点注射L-DMEM0.6mL;心外膜移植组:在大鼠心肌梗死区分8点注射5溴脱氧尿嘧啶标记的骨髓间充质干细胞悬液0.6mL。移植4周后检测大鼠左室射血分数、短轴缩短率、血流动力学指标评价心功能,采用免疫组织化学检测大鼠心肌组织中骨髓间充质干细胞对心肌肌钙蛋白T的表达。结果:40只大鼠均进入结果分析。①与移植前比较,静脉对照组与心外膜对照组心脏功能逐渐恶化,左室射血分数及短轴缩短率降低。静脉移植组与心外膜移植组左室射血分数及短轴缩短率均较移植前升高,并且心外膜移植组高于静脉移植组[移植前:左室射血分数:(27.09±2.46)%,(26.62±2.31)%,短轴缩短率:(24.09±3.13)%,(24.52±3.01)%;移植后:左室射血分数:(35.12±2.68)%,(46.31±3.15)%,短轴缩短率:(28.32±3.68)%,(32.38±2.35)%,P<0.05]。与静脉移植组相比,心外膜移植组左心室收缩压、左室压力变化最大上升速率、左室压力变化最大下降速率升高、左室舒张末期压降低[静脉移植组:(105.27±5.56)mm Hg,(18.02±3.63)mm Hg,(4595±389)mm Hg/s,(3768±525)mm Hg/s;心外膜移植组:(123.89±9.64)mm Hg,(13.79±3.92)mm Hg,(4988±513)mm Hg/s,(4193±563)mm Hg/s,P<0.05]。②心外膜移植组和静脉移植组梗死心肌内均可见5溴脱氧尿嘧啶阳性移植细胞,对心肌肌钙蛋白T呈阳性表达。结论:心外膜移植细胞和静脉移植细胞对急性心肌梗死心功能均有改善作用,并且心外膜途径移植对急性心肌梗死心功能改善程度强于静脉移植途径。     

间充质干细胞移植联合阿托伐他汀治疗大鼠急性心肌梗死

目的:观察间充质干细胞与阿托伐他汀联合应用对大鼠急性心肌梗死心功能的疗效,并与单纯间充质干细胞移植作比较。方法:实验于2005-02/2005-10在郑州大学基础医学院完成。①剥离6周龄、体质量60～80g SD大鼠股骨和胫骨获取间充质干细胞,置于培养瓶中培养。在培养瓶中加入5-溴脱氧尿嘧啶,调整浓度至10μmol/L,孵育72h,调整细胞密度为4×1010L-1,移植备用。②选取体质量280～300g成年SD大鼠建立急性心肌梗死模型。结扎大鼠左冠状动脉前降支,观察前壁心肌颜色变苍白,收缩力减弱,心电图相应导联ST段弓背向上抬高,确认心肌梗死模型建立成功。将建模成功40只大鼠分成4组。对照组:梗死部位分4点注射L-DMEM培养液;阿托伐他汀组:梗死部位分4点注射L-DMEM培养液,阿托伐他汀10mg/(kg.d)溶入生理盐水2mL,灌喂2周。间充质干细胞组:梗死部位分4点移植间充质干细胞,每点2×106个/50μL。联合组:梗死部位分4点移植间充质干细胞,每点2×106个/50μL,阿托伐他汀10mg/(kg.d),灌喂2周。③术后4周,应用超声检测大鼠左室射血分数和短轴缩短率,生理记录仪测定大鼠左室收缩压、舒张末压、压力变化最大上升与最大下降速率,采用免疫组织化学方法检测细胞组织学变化。结果:建模成功的40只大鼠全部进入结果分析。①大鼠心功能超声检查:间充质干细胞移植组与联合组左室射血分数、短轴缩短率均明显高于对照组和阿托伐他汀组,联合组升高更明显[左室射血分数:(20.87±2.25)%,(30.12±2.17)%,(43.40±3.57)%,(52.78±3.18)%;短轴缩短率:(17.74±1.77)%,(22.46±2.29)%,(29.89±2.50)%,(37.31±3.78)%,P均<0.05]。②大鼠血流动力学检测:与对照组、阿托伐他汀组相比,间充质干细胞移植组与联合组左室收缩压、压力变化最大上升与最大下降速率均明显升高,舒张末压明显降低,联合组改善程度更明显[左室收缩压:(89.43±2.06),(97.58±3.13),(121.11±2.65),(129.84±3.46)mm Hg;舒张末压:(20.48±1.71),(17.37±1.17),(13.99±1.38),(9.89±1.74)mm Hg;压力变化最大上升速率:(3599±301),(4043±216),(5022±218),(5515±408)mm Hg/s;压力变化最大下降速率:(3188±345),(3226±387),(4013±537),(4657±401)mm Hg/s,P均<0.05]。③大鼠心脏组织学检测:对照组、阿托伐他汀组大鼠梗死区心肌纤维化明显,细胞排列紊乱,无新生心肌细胞。间充质干细胞移植组、联合组大鼠梗死心肌内可见5-溴脱氧尿嘧啶标记阳性细胞,对心肌肌钙蛋白T呈现阳性表达。结论:间充质干细胞联合阿托伐他汀应用治疗大鼠急性心肌梗死有协同提高疗效作用,其效果优于单纯间充质干细胞移植。     

复康片对卡马西平致大鼠消化系统损害的防护作用

目的：研究中药复康片对卡马西平所致大鼠消化系统损伤的防护作用。方法：将48只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、中药预防组、中药治疗组共4组，每组12只。正常对照组正常喂养，每天灌胃蒸馏水，其余不做任何处理。其余3组制备CBZ致消化系统损伤模型，预防组在造模同时灌服复康片，治疗组造模第30天开始灌服复康片，剂量均为1500mg·kg^-1·d^-1，1次／d。90d后，处死所有大鼠，检查肝功能，观察肝、胃、回肠组织病理学变化。结果：与正常对照组比较，模型对照组肝功能异常，AST、ALT、ALP升高，ALB降低，线粒体、内质网水肿。肝细胞弥漫性水肿、点状坏死明显，胃、肠粘膜上皮细胞水肿，浅表溃疡形成，炎性细胞浸润，中药预防组核膜结构清晰完整，粗面内质网结构正常，含有丰富的核糖体，线粒体形态结构正常。中药治疗组线粒体仍有轻度肿胀，中药预防组和治疗组AST、ALT、ALP活性均显著降低，ALB升高，可使卡马西平所导致的肝脏、胃、肠组织学的损伤减轻，防止肝细胞水肿、减轻胃、肠粘膜上皮细胞的水肿和间质炎细胞浸润，结论：复康片可对卡马西平致消化系统的损害有一定的防护作用。