鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用

背景：胶原蛋白具有抗氧化作用,但既往在实验室主要将鼠尾胶原用于促进细胞贴壁和支架构建,对于其抗氧化作用目前尚无相关研究。目的：探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法：将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿（实验组）和普通培养皿（对照组）中,并且均用0,10,100μmol/L H2O2诱导。24 h后,以电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态,应用MTT 比色法检测心肌细胞存活率,TUNEL 法检测心肌细胞凋亡形态,流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法检测丙二醛水平,Western-Blot 检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果与结论：两组培养皿中,随着过氧化氢浓度的增高,均可见细胞凋亡状态明显加重,细胞存活率及细胞内过氧化氢活力明显下降,细胞凋亡率及细胞内丙二醛水平明显增高,Bcl-2/Bax比值显著降低,呈剂量依赖性。而在相同浓度过氧化氢诱导下,与对照组相比,实验组细胞凋亡状态明显减弱,细胞存活率、超氧化物歧化酶活力及Bcl-2/Bax比值增高,细胞凋亡率和丙二醛水平明显减低。表明鼠尾胶原对过氧化氢所致的心肌细胞氧化损伤具有保护作用,其机制可能与提高超氧化物歧化酶活力,减少丙二醛产生及提高Bcl-2的表达有关。     

S1P的心脏保护作用及相关信号通路的研究进展

一磷酸鞘氨醇(S1P)是一种具有生物活性的磷脂信使,在体内主要由血小板和肥大细胞分泌,其对细胞的生长、增殖以及迁移等具有重要作用。S1P对心脏具有保护作用,尤其是在心脏缺血再灌注时,其能够降低缺血再灌注的损伤程度,减少心肌梗死面积、降低心律失常的发生。S1P还具有调节血管通透性以及抗动脉粥样硬化的作用。S1P的生物学效应的发生涉及多种信号通路,包括Akt、ERK、Rho等。     

体外心肌细胞缺血后适应模型的建立及评价

目的建立心肌细胞缺血后适应（IPost）模型并观察IPost对心肌细胞再灌注（I／R）损伤的影响。方法体外培养新生SD乳鼠心肌细胞,随机分正常对照组（SH组）、缺血再灌注组（I／R组）及缺血后适应组（IPost组）,用烟酸己可碱（Hochest33342）及碘化丙啶混合溶液染色后观察细胞凋亡率情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,逆转录PCR（RT—PCR）方法和蛋白质印迹法（WesternBlot）方法检测Bcl-2／Bax基因表达。结果与I／R组比较,IPost组细胞凋亡率显著改善,Bcl-2蛋白表达上调,Bax蛋白表达下降,Bcl-2／Bax显著增加（P均d0．05）。结论IPost能通过抗心肌凋亡有效地减轻离体心肌细胞缺血再灌注损伤。     

鼠尾胶原对过氧化氢所致体外心肌细胞氧化损伤的影响

目的:探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致的离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿和普通培养皿中,均用0u M、100u M、200u M和300u M H2O2诱导。24h后,通过电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态,应用MTT比色法检测心肌细胞存活率,TUNEL法检测心肌细胞凋亡形态,流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率,Western-Blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果:铺有鼠尾胶原的培养皿和普通培养皿中,随着H2O2浓度的增高,电子显微镜下可观察到细胞凋亡状态明显加重,细胞存活率明显下降,细胞凋亡率明显增高,Bcl-2/Bax比值显著降低。而在相同浓度H2O2诱导的鼠尾胶原组与普通组中,铺有鼠尾胶原培养皿培养的细胞凋亡状态较普通培养皿培养的细胞明显减弱,且细胞存活率及Bcl-2/Bax比值增高,细胞凋亡率减低。结论:鼠尾胶原对过氧化氢所致的心肌细胞氧化损伤具有保护作用。