血吸虫毛蚴孵化实验最佳观察时间的探讨

目的针对目前血吸虫的低度流行状态,总结出血吸虫毛蚴孵化实验结果观察的最佳时间,从而提高血吸虫病病原学检测阳性检出率,为血吸虫病的诊断提供更好的依据。方法将实验样本分为阴性对照组、低含量实验组和高含量实验组,进行血吸虫尼龙绢集卵孵化实验,分别于不同时间点观察实验结果。在不同各时间段观察比较毛蚴孵出数和孵出率,总结毛蚴结果观察的最佳时间。结果阳性实验组中,在1 h、2 h、3 h时毛蚴孵出数量相对较多,实验结果更易观察,8 h后均急剧下降。结论血吸虫毛蚴孵化实验中毛蚴观察的最佳时间为1h、2 h、3 h,适当延长最佳时间点的观察时间,可以有效提高尼龙绢集卵毛蚴孵化实验的血吸虫卵阳性率。     

Twist基因逆转录病毒载体的构建及其诱导正常乳腺上皮细胞发生上皮间质转化

目的 构建Twist基因逆转录病毒载体,研究其对人正常乳腺上皮细胞MCF10A的影响.方法 酶切pcDNA3/myc-Twist获得myc-Twist,克隆到逆转录病毒载体pBABE-puro中,构建重组质粒pB AB E-myc-Twist.通过酶切、测序鉴定Twist基因正确后,在体外将质粒pBABE-myc-Twist和其对照分别与包装质粒pAmpho共同转染人胚肾上皮细胞系293T细胞,进行逆转录病毒的包装,并感染人正常乳腺MCF10A上皮细胞,用嘌呤霉素(puromycin)筛选,获得成功转入Twist的MCF10A-Twist细胞和MCF10A-Vector对照细胞.通过RT-PCR和Western blot法验证Twist细胞在MCF10A-Twist和MCF10A-Vector细胞内的表达.免疫荧光技术和Western blot法检测细胞内上皮间质转化(EMT)标志蛋白的表达.Transwell(R)法检测细胞的迁移和侵袭能力.结果 重组逆转录病毒载体质粒pBABE-myc-Twist经酶切和测序鉴定构建正确;Twist基因被逆转录病毒成功导入MCF10A细胞,并在靶细胞内稳定表达,RT-PCR检测到Twist mRNA在MCF10A-Twist细胞中表达,Western blot法检测发现myc-Twist蛋白在MCF10A-Twist细胞中表达;免疫荧光和Western blot法检测显示在MCF10A-Twist细胞中E-cadherin表达显著下调、vimentin表达明显上调;与MCF10A-Vector细胞相比,Transwell(R)法检测发现MCF10A-Twist细胞迁移和侵袭能力明显增加(P＜0.01).结论 Twist诱导MCF10A细胞发生EMT转化,并促进其迁移和侵袭.     

腹腔血HCG测定在异位妊娠诊断中的应用

目的 探讨腹腔血人绒毛膜促性腺激素(HCG)测定在异位妊娠中的临床应用.方法 对158例腹腔内出血患者盆腔积血及其静脉血HCG进行定量测定,同时定性检测其盆腔积血及尿HCG,并比较.结果 异位妊娠患者盆腔积血HCG浓度明显高于其静脉血,定性检测其盆腔积血HCG也明显优于尿液.结论 盆腔积血HCG的定性和定量检测对提高不典型异位妊娠的诊断及鉴别其他类型的腹腔内出血有实用价值,能及时为手术治疗提供理论依据.     

晚期血吸虫病患者外周血中Vα24自然杀伤T细胞水平观察

目的探讨晚期血吸虫病患者外周血中Vα24自然杀伤T细胞(NKT)水平及其与肝纤维化的关系。方法采用流式细胞术,检测41例晚期血吸虫病患者和48例健康体检者(对照组)外周血中的Vα24 NKT细胞占T淋巴细胞的比例;同时对晚期血吸虫病患者进行腹部超声检查,根据超声检查结果进行肝纤维化分级,比较各级间NKT细胞水平。结果 41例晚期血吸虫病患者的NKT细胞平均水平为(0.25±0.10)%,较健康对照组[(1.32±0.56)%]明显下降,差异有统计学意义(P0.01)。晚期血吸虫病患者肝纤维化越严重,NKT细胞减少越明显,1级、2级、3级患者NKT细胞水平分别为(0.38±0.03)%、(0.29±0.04)%、(0.16±0.03)%,各级患者比较差异均有统计学意义(P0.01)。结论晚期血吸虫病患者外周血中Vα24 NKT细胞水平明显下降,并随肝纤维化程度加重而减少,晚期血吸虫病患者发生及肝纤维化进展可能与Vα24 NKT细胞水平低下和/或功能缺陷有关。     

胶体金法和化学发光免疫法联合检测血HCG分析

目的 对胶体金试纸法和化学发光免疫法联合检测血人绒毛膜促性腺激素(HCG)的分析和探讨.方法 预先用胶体金试纸法对1 448份血清标本进行筛选,然后根据浓度级别选择合适的稀释倍数运用化学发光免疫法检测血清HCG的浓度.结果 胶体金试纸法和化学发光免疫方法之间存在一定的方法学差异,但联合检测效果好.结论 两种方法联合检测既大大节约了昂贵的试剂,又能快速且准确地发出检验报告.     

郑州铁路局1043例在职职工血脂水平调查研究

目的通过郑州铁路局在职职工血脂水平调查,了解其血脂异常流行率.方法检测1043名职工血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低度脂蛋白胆固醇(LDL-C).统计不同年龄、性别的血脂异常流行率.结果1043名职工血脂异常率50.87%,年龄、性别间差异有统计学意义(P<0.01).结论郑州铁路局职工也是血脂异常的高危人群,血脂异常检出率男性高于女性,随年龄增加而增高.     

糖尿病病人便秘防治对策的研究进展

糖尿病及其慢性并发症已经成为一种严重影响人类健康的病症.便秘是糖尿病病人常见的并发症之一,在慢性病变中, 自主神经病变时可出现神经性便秘, 糖尿病并发广泛神经病变的患者便秘发生率约90%[1],临床上常被医护人员所忽视.     

诺如病毒GⅡ.4亚型新变异株全基因组序列的研究

目的分析诺如病毒GⅡ.4亚型新变异株的全基因组序列,了解其变异特点。方法从264例患者腹泻物中提取RNA并进行cDNA合成,对阳性样本进行PCR鉴定,扩增片段进行测序。对测序结果显示为诺如病毒序列的进行全基因组测序并分析。结果分离到新的悉尼2012GⅡ.4变异株的类似株(荆州2013GⅡ.4株),全基因组序列测定发现新分离株出现了较大的变异,包括VP1基因高变区(P2区)的突变。结论悉尼2012GⅡ.4变异株的类似株已传播到中国,GⅡ.4变异株VP1进化较快。提醒应密切关注诺如病毒在中国的传播和进化情况,以助于疫苗的开发和治疗性单抗的制备。