四物汤药理及临床研究进展

<正>四物汤（Siwu tang,SWT）广泛用于治疗妇科疾病,被后世医家称为"妇科第一方"、"调理一切血证"的"妇女之圣药"。现代医家普遍使用SWT作为基础方,配合其他中药共同治疗相关疾病,并可见有诸多药理及临床相关文献报道,但因所用方剂中还包含其他药材,因此并不能准确判断SWT所含4味药材配伍使用后的具体疗效及机制。为探究SWT具体的成分、药理作用、临床疗效,以及SWT目前的研究进展,笔者搜寻了近5年针对SWT的临床及药理研究,并作此综述。     

针刺对多囊卵巢综合征大鼠卵巢TGF-α、EGFR表达的影响

目的:研究针刺对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢转化生长因子α(TGF-α)、表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响,探讨针刺促排卵的作用机制。方法:24日龄雌性大鼠颈背部皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)的油溶液制作(PCOS)模型,对照组同期皮下注射油剂。PCOS大鼠随机分为模型组和针刺组。模型组不作处理,针刺组大鼠从80日龄起针刺关元、中极、双侧三阴交、双侧子宫穴,1次/天,15min/次,连续6周。治疗结束后各组大鼠断头处死,迅速取血并分离血清,-20℃冰箱保存,待测性激素水平。摘取双侧卵巢,称重,4%多聚甲醛固定,作HE染色和免疫组织化学染色。结果:与模型组相比,针刺组卵巢湿重、卵巢TGF-α、EGFR表达及血清睾酮(T)、雌二醇(E2)水平均显著降低(P<0.01),而卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、孕酮(P4)水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:针刺能显著降低PCOS大鼠卵巢TGF-α及EGFR的表达,抑制TGF-α对卵巢和激素合成的作用,改善PCOS大鼠多囊样变和高雄激素血症,促进排卵。     

健胎液对人脐静脉内皮细胞分泌血管活性物质的影响

采用血清药理学方法观察健胎液对缺氧人脐静脉内皮细胞（HUVEC）分泌血管活性物质——内皮素（ET）、前列环素（PGI2)、一氧化氮（NO)的影响,以及对缺氧HUVEC形态结构的保护作用,旨在探讨健胎液防治胎儿宫内生长迟缓（IUGR）的机理。结果表明健胎液可显著提高缺氧HUVEC合成分泌PGI2、NO（P<0.05,P<0.01）,同时减少ET的释放(P<0.05);从超微结构上观察,健胎液能明显减轻缺氧对HUVEC细胞器和细胞核的损伤。结果提示健胎液通过增强HUVEC对缺氧的耐受性,调节血管活性物质的分泌是其防治胎儿宫内生长迟缓的机制之一。     

胚泡着床不全的实验动物模型

目的　建立胚泡着床不全的实验动物模型及观测指标。方法　妊娠动物皮下注射米非司酮或利洛司酮 ,皮下注射吲哚美辛 (消炎痛 ) ,皮下注射催产素 ,给避孕药酒灌胃 ,宫腔注射纤连蛋白抗体或层粘蛋白抗体 ,皮下注射卵泡刺激素抗血清等。结果　上述方法处理后着床动物明显减少 ,着床位点数减少 ,着床率降低 ,卵巢组织上黄体数目减少 ,血清孕激素水平下降 ,绒毛膜促性腺激素水平降低。结论　上述方法均可选用来建立胚泡着床不全的动物模型     

研究经络本质的新途径

目的:探索经络的物质本质的新途径.方法:回顾分析了国内外近20年经络实质研究概况,并详细介绍了缝隙连接(GJ)、半通道的结构特点及其与经络的某些相似之处.结果:针刺效应的产生与神经系统、内分泌系统、免疫系统以及结缔组织等密切相关;同一组织内和不同组织间相同和不同细胞间的GJ、半通道可能是机械性刺激信号(针刺)在体内转变为生物电信号或化学信号的结构基础.结论:针刺效应是在腧穴接受刺激的条件下,以高密度的GJ、半通道作为物质基础,以细胞间液、组织间液为缓冲系统的神经、血管、内分泌、免疫等多个系统的综合反应.     

活血化瘀中药对大鼠异位子宫内膜细胞增殖的影响

目的 探讨子宫内膜异位症（EMT）模型大鼠异位子宫内膜细胞的增殖特性及活血化瘀中药对其的影响，为临床用药提供实验依据。方法 制备活血化瘀中药含药血清，干预体外原代培养的大鼠异位内膜和在位内膜细胞，应用噻唑蓝（MTT）比色法比较二者增殖率及活血化瘀中药含药血清对其增殖的影响。结果 异位内膜与在位内膜基质细胞的增殖活性相当（P＞0.05）；活血化瘀中药对异位内膜的增殖有显著抑制作用（P＜0.01），而对在位内膜的增殖无明显抑制作用（P＞0.05）。结论 活血化瘀中药含药血清对EMT模型鼠异位内膜的增殖有显著抑制作用而对在位内膜的增殖无明显影响。     

穴位和非穴位氧分压和钙离子浓度在体实时监测比较

目的:比较穴位与非穴位中氧分压和钙离子浓度的差异。方法:利用自制的传感针,在体监测8只山羊的大肠俞、肝俞和关元俞及其对应的非穴位点的钙离子浓度;并监测肝俞和后三里及其对应非穴位点的氧分压。用方差分析方法对穴位和非穴位钙离子浓度和氧分压的差异和变化趋势进行统计分析。结果:穴位的钙离子浓度和氧分压在整个监测过程中都高于非穴位,差异均有显著性意义。结论:传统的针灸穴位具有高氧分压和高钙离子浓度特性。     

沉默穴位Cx43的表达后针刺镇痛的实验研究

目的：研究沉默痛经大鼠穴位局部Cx43的表达对针刺效应的影响和针刺治疗原发性痛经大鼠的镇痛机制。方法：利用己烯此酚造成原发性痛经的大鼠模型，应用RNAi技术沉默穴位局部Cx43的表达。将50只雌性大鼠随机平均分为5组：正常组（对照），模型组（己烯雌酚），针刺组（己烯雌酚＋针刺），针刺＋干扰组（己烯雌酚＋针刺＋pSilencer—Cx43-shRNA）和针刺＋干扰对照组（己烯雌酚＋针刺＋pSilencer—Con—shRNA）。末次注射催产素后，观察痛经大鼠30min的扭体数。半定量RT—PCR和免疫组织化学检测大鼠子宫内膜催产素（OTR）和加压素（VPR）mRNA和蛋白的表达。结果：①干扰组穴位处的Cx43显著低于针刺组（P〈0．05），针刺组和干扰对照组之间无明显差别（P〉0．05）。②与模型组、干扰组比较，针刺组能显著延长痛经大鼠的扭体潜伏期，减少扭体数。③与正常组比较，模型组OTR和VPR mRNA和蛋白水平显著增高（P〈0．05）。与模型组比较，针刺组和干扰对照组的OTR和VPR mRNA和蛋白水平显著降低（P〈0．05）。模型组和干扰组之间OTR和VPR mRNA和蛋白水平无显著性差异（P〉0．05）。结论：局部注射Cx43特异性shRNA真核表达载体有效地沉默了穴位Cx43的表达，并显著地影响了针刺效应，表明Cx43可能与针刺疗效有密切关系。针刺通过调节子宫内膜OTR和VPR的表达来有效治疗原发性痛经．     

补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜P21表达的影响

目的：观察补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠着床部位子宫内膜中周期素依赖的蛋白激酶抑制物P21和增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响。方法：采用免疫印迹法观察胚泡植入 ［即妊娠第6天(pregnancy day 6,Pd6),Pd7和Pd8］时P21在整个子宫中的表达,采用免疫组化法进一步定位观察着床部位子宫内膜中PCNA和P21的表达。结果：与对照组相比,模型组子宫内膜PCNA和P21的出现和消失在时间和空间上均明显滞后；补肾益气和血方能促进PCNA和P21及时有序地表达或消失,从而改善胚泡着床障碍小鼠子宫内膜的蜕膜反应。结论：补肾益气和血方可通过促进子宫内膜的蜕膜反应来改善胚泡着床,其作用机制与其促进子宫内膜PCNA和P21时空有序地表达和消失密切相关。     

小檗碱与梓醇及其配伍对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞Glut-4、IRS-1、IRS-1 Ser307磷酸化蛋白表达的影响

目的：观察梓醇与小檗碱及其配伍对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗及这一过程中葡萄糖转运子-4（Glut-4）、胰岛素受体底物-1（IRS-1）和胰岛素受体底物-1丝氨酸307（IRS-1Ser307）磷酸化蛋白表达的影响。方法：采用高糖联合高胰岛素诱导3T3-L1脂肪细胞产生胰岛素抵抗，分别给予小檗碱、梓醇、小檗碱＋梓醇、盐酸罗格列酮进行干预，以葡萄糖氧化酶法检测培养液中葡萄糖消耗量，以WesternBlot法检测蛋白的表达。结果：与模型组相比，小檗碱能增加培养液中葡萄糖的消耗（P〈0．01），但对Glut，4蛋白的表达无影响；梓醇、小檗碱＋梓醇均能显著增加培养液中葡萄糖的消耗（P〈0．01），并使细胞中Glut-4蛋白的表达增强（P〈0．05），且小檗碱＋梓醇组的效应优于梓醇组及小檗碱组；与模型组相比，小檗碱与梓醇及其配伍对IRS-1的表达没有显著性影响，但能降低IRS-1 Ser307磷酸化蛋白表达。结论：小檗碱、梓醇及其配伍能改善胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞的胰岛素敏感性，其作用机制与罗格列酮不同。