用硫氰酸胍自外周血快速抽提DNA

用硫氰酸胍自外周血快速抽提ＤＮＡ马维芳，张基增，徐湘民（第一军医大学分子生物学实验室，广州５１０５１５）用酚、氯仿、乙醇沉淀等提取和纯化ＤＮＡ的方法［１］，大多数临床实验室不能常规开展。比较简单的提取方法已有报道［２］，但效果如何尚未充分评价。本文介...     

监护设备对老年重症患者损伤的预防及护理

对于老年重症患者,代偿能力差,病情进展快,病情易变化,常需要进行监护治疗,在当前各项监护设备广泛应用于临床抢救治疗中。而监护可以实时动态检测患者各项生理病理体征,从而进一步了解病情,利于诊治。在监护使用的过程中,有多方面需要注意使用方法及操作,避免医源性损伤。     

恶性疟复合多价口服活菌苗候选株的实验研究

本课题根据减毒口服活菌苗能诱发全面免疫应答的机理,探讨了人恶性疟复合多价口服活菌苗的可行性。我们按照Patarroyo等报导的SPf66及SPf105多肽序列人工合成复合多价45肽基因A及58肽基因B,两个基因串联成113肽的基因AB,并都在大肠忏菌中获得高效表达,所表达的融合蛋白质具有较强的抗原性,其免疫抗血清对体外培养的恶性疟原虫具有显著的抑制作用。随后又利用减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261(△aroA),构建了三株含有     

用反向杂交法进行β地中海贫血的产前诊断32例

本文应用反向点杂交术(RDB)，进行β地中海贫血的产前诊断。根据中国人地贫的突变基因频率的分布情况，制备两种膜条，一种为“通用”膜条，上面结合了中国人7种常见突变的ASO探针；二为“稀少”膜条，结合了检测中国人少见的11种突变的ASO探针。用此方法进行产前诊断32例，只需一、二次杂交，就能准确区分β地贫不同突变类型的纯合子、杂合子、双重杂合子及正常等位基因。这一技术不依赖同位素、操作简便、检测范围广，可望在我国β地贫的大样本的人群基因调查和临床普及产前诊断起推动作用。     

恶性疟原虫杂合抗原基因的表达及其产物免疫功能的研究

化学合成的人恶性疟原虫杂合多肽抗原 AB 基因,编码子孢子 CSP重复序列 NANP、CSPTh2R和红内期spf35.1、spf83.1、spf55.1、spf83.18、pf155/RESA-5’端重复区共7个不同免疫功能表位,与大肠杆菌质粒pWR450-1重组,构建成pWR450-1/AB表达载体。在乳糖操纵子调控下以β-半乳糖苷酶-恶性疟原虫杂合多肽抗原融合蛋白形式,在大肠杆菌中高效表达。表达产物经SDS-PAGE电泳分离纯化后,加福氏佐剂免疫家兔,诱导产生较高滴度的抗血清。抗血清对人恶性疟原虫体外生长有明显的抑制作用,24h抑制率为65.92％;72h的抑制率为72.63％。对照血清无抑制作用。分离纯化的表达产物能与鼠抗恶性疟原虫和疟疾患者抗血清起免疫反应。这些结果表明合成基因的表达产物具有较好的免疫原性。     

用反向点杂交术快速检测中国人18种β—地中海贫血基因突变

β-地中海贫血(简称β-地贫)的分子基础主要是点突变。目前全球范围已发现100种以上此类突变。中国人群中有18种。随着PCR技术的应用,以等位基因特异性寡核苷酸(ASO)探针杂交为代表的多种点突变检测技术已被广泛采用,但对于像β-地贫这样有很大异质性的遗传病,采用这些技术进行基因诊断仍较困难,因现有的方法是以逐一“过筛”的策略来     

应用巢式聚合酶链反应在唾液中检出幽门螺杆菌

用互补于幽门螺杆菌(HP)尿素酶A基因的两对引物行巢式聚合酶链反应(N-PCR),检测1株HP标准菌株、20株HP临床分离株均阳性,而12种肠道菌均阴性,特异性100%。该法敏感性好可检测0.1fg细菌DNA.57例因上消化道症状行胃镜检查者,取粘膜分别做细菌培养、尿素酶试验、组织学检查和N-PCR检测,其中27例在行胃镜前收集其唾液标本做N-PCR。19例胃粘膜HP阳性者中有11例唾液中检出HP,而8例胃粘膜HP阴性者中有1例唾液N-PCR阳性。作者认为口腔中确实存在HP,该菌可能通过口—口途径传播。     

胰岛素注射过程中常见的问题分析及护理对策

胰岛素的应用是糖尿病治疗的主要方法,长期以来,注射胰岛素给患者带来困惑及不良反应,如何有效减少这些问题和不良反应,现将临床注射胰岛素过程中常见不良反应、注射过程中常见的问题总结如下:注射部位疼痛,皮肤青肿,过敏反应,局部皮下脂肪萎缩,皮肤感染,胰岛素性水肿,低血糖反应,胰岛素漏,应用胰岛素笔注射后针头有药水流出,胰岛素笔杆推不动或很难推动,笔芯变色或有絮状物等。护士只有掌握了正确的注射方法,正确的给药剂量,正确的给药时间,掌握常见问题及不良反应的正确处理方法,才能给患者正确的指导,促进胰岛素的合理使用,才能减少注射胰岛素给患者带来的不良反应,使患者减少对胰岛素的恐惧,提高患者对胰岛素治疗的依从性,及时有效获得最佳的血糖控制。     

小儿手背静脉穿刺时手指位置探讨

<正> 小儿头皮静脉是儿科静脉穿刺常用的部位,由于头皮静脉是网状结构,对于住院时间较长的患儿,头皮静脉较易发生渗漏,故手背静脉成为静脉输液的最重要部位,在临床实践中我们发现,手部静脉穿刺时,手指位置的不同,静脉穿刺的成功率亦不同,现就体会报告如下。     

A rapid reverse dot blot assay for all 18 β-thalassemia mutations in Chinese population

A set of allele-specific oligonucleotide (ASO) probes used for detecting all 18 β-tha-lassemia mutations found in Chinese was immobilized on two strips of Biodyne C membrane;one containing 7 pairs of oligonucleotide probes specific for the most commonly found mutant al-leles,and the other containing the remaining 11 pairs of ASO_s specific for the less commonlyfound.The membranes were hybridized with β-globin sequences amplified by polymerase chainreaction (PCR) with biotinylated primers,and then treated with Streptavidin-POD conjugateand substrates for color development.The method has been applied successfully to the detectionof all 18 Chinese β-thalassemia mutations and prenatal diagnosis of two high-risk pregnancies ofβ-thalassemia.Patients with homozygous,heterozygous and compound heterozygous alleles ofthese mutations and normal individuals could be easily distinguished by the present method.Us-ing the immobilized-probe format (reverse dot blot),it was able to screen simultaneously multi-ple β-thalassemia mutations of a DNA sample by performing hybridization only once.This assayis simple,rapid and independent of radio-isotopes and can be appplied for all 18 β-thalassemiamutations so far found in Chinese population.It is considered that this method may be usefulfor gene frequency investigation of large numbers of β-thalassemia DNA samples and used as aroutine method in the clinic laboratory.