K562／H20和K562／Mel细胞株对高三尖杉酯碱与马法兰耐药机制的比较研究

为比较高三尖杉酯碱和马法兰的耐药机制，对天然来源抗肿瘤药物高三尖杉酯碱耐药株Ｋ５６２／Ｈ２０与烷化剂马法兰耐药株Ｋ５６２／Ｍｅｌ耐药机制进行研究，发现前者对长春新碱、柔红霉素、阿霉素具有广泛交叉耐药，对马法兰耐药水平较低；后者对氮芥、噻替派有明显交叉耐药。在耐药机制上，前者主要由于多药耐药基因过度表达所致，谷胱甘肽－Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）π、α基因也参与部分耐药机制；后者主要由于ＧＳＴα基因及ＧＳＴ总活性所致。两者似乎均通过ＧＳＴα基因表达升高起作用。     

慢性乙型肝炎的抗病毒研究进展

慢性乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)引起的全球性传染病,HBV感染是我国肝硬化、原发性肝癌的重要原因。目前,干扰素类与核苷(酸)类似物抗病毒药物已广泛应用于临床,在一定程度上抑制了病毒的复制并控制了疾病的发展,但仍未从根本上清除病毒;各种治疗性疫苗在抗HBV方面也取得了一定疗效,但临床效果不佳。目前不少研究结果表明,生物免疫治疗可以成功清除体内的HBV,从而为乙肝的治疗带来新的希望。     

乙肝肝硬化并发皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤伴噬血细胞综合征的治疗分析

目的 探讨乙肝肝硬化并发皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤(SPTCL)伴噬血细胞综合征(HPS)的临床特征和治疗方法。 方法 回顾性分析2014年8月第二军医大学附属东方肝胆外科医院1例乙肝肝硬化并发SPTCL伴HPS病例的临床资料。 结果 T细胞受体(TCR)表型不同则该病的侵袭性、治疗反应性及预后明显不同,伴HPS者治疗效果不佳,生存期短。 结论 乙肝肝硬化并发SPTCL伴HPS罕见,早期骨髓形态学、病理学、免疫组化及基因重排检测对确诊有重要意义,及早有效控制乙肝病毒尤为重要。早期诊断及治疗对延长患者生存期有重要意义。     

含奥沙利铂化疗方案联合DC-CIK细胞治疗中晚期原发性肝癌的临床疗效

目的：探讨含奥沙利铂（oxaliplatin,OXA）化疗方案联合树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤（dendritic cells-cytokine-induced killer,DC-CIK）细胞治疗中晚期原发性肝癌的临床疗效和安全性。方法： 回顾性分析2013年1月至2015年6月上海东方肝胆外科医院肿瘤生物治疗科收治的11例中晚期原发性肝癌患者的临床资料,患者均接受以OXA为主的方案化疗,包括FOLFOX 4方案,即OXA＋亚叶酸钙（calcium folinatc,CF)＋5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU),或GEMOX方案化疗,即吉西他滨（gemcitabine,GEM)+OXA,化疗结束后2~3 d回输DC-CIK细胞。观察指标包括疾病控制率(disease control rate,DCR)、中位肿瘤进展时间(median time to tumor progression,mTTP)、中位生存期(median overall survival,mOS)和不良反应。结果：11例患者中,获得完全缓解（CR）0例,部分缓解（PR）2例,疾病稳定（SD）5例,疾病进展（PD）4例,总有效2/11例,DCR 7/11例;mTTP为4.1个月;mOS为11.3月;主要的不良反应为轻、中度消化道反应、骨髓抑制和轻度周围神经毒性等化疗毒性反应,经对症治疗后均恢复正常。结论：含奥沙利铂化疗方案联合DC-CIK细胞治疗中晚期原发性肝癌具有较好的临床疗效,不良反应较轻,患者耐受性较好,值得进一步研究。     

肿瘤精准细胞免疫治疗：梦想照进现实

精准医疗(precision medicine)作为一种全新的医学概念与医疗模式,已日益在恶性肿瘤临床治疗中显示其价值。精准细胞免疫治疗(precision cell immunotherapy,PCIT)是基于肿瘤患者基因检测,筛选可引起强烈免疫反应的新抗原(neoantigen),进而寻找并富集针对新抗原的精准T细胞(precision T cell for neo-antigen,PNA-T),扩增后回输患者的治疗新策略。相对于其他精准医学治疗方式,精准细胞免疫治疗具有比较独特的优势,有望成为中国肿瘤精准医学治疗的重要突破口。本文围绕肿瘤精准细胞免疫治疗面临的机遇与挑战,从概念、特点、流程、技术难点等方面进行了详细阐述,并对比了其与转基因嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen recepor T cell,CAR-T)的异同,勾勒出肿瘤精准细胞免疫治疗的美好前景。     

DC-CIK细胞免疫治疗肺癌脑转移病例报告一例

1病例资料患者王某,女,67岁,无吸烟史,2008年10月因发现左颈部肿块就诊于当地医院,同时伴咳少量白色泡沫痰、无痰中带血,全身无发热、胸闷、胸痛等不适症状。行胸部CT检查提示左下肺背段占位,伴纵膈、左肺门及左锁骨上窝多发淋巴结肿大。左锁骨上淋巴结穿刺活检病理诊断为转移性低分化腺癌,免疫组化结果考虑来源于肺。EGFR(epidermal     

以端粒酶为靶点的肿瘤诊断与基因治疗策略

细胞获得永生化,具有了无限增殖的能力,主要依赖于细胞内端粒酶的激活。自1994年Kim等[1]创立了端粒酶活性检测的端粒重复聚合酶链反应(TRAP鄄PCR)方法及在肿瘤组织中发现端粒酶活性以来,端粒酶已成为生命科学领域里研究热点。大量研究表明,各种类型的恶性肿瘤中都有不同程度地表达端粒酶的活性[2]。由于肿瘤诊断和治疗最理想的靶点就是找到一种肿瘤细胞所具有、在正常细胞中不存在的物质基础,而端粒酶在肿瘤细胞中的激活并维持细胞的无限增殖能力,是恶性肿瘤细胞区别于正常细胞的重要特征之一,具备了作为肿瘤诊断和治疗物质基础的条件…     

血管抑素K1-5腺病毒载体对血管内皮细胞增殖及趋化的抑制作用

目的 探讨携带血管抑素K1-5的腺病毒载体对血管内皮细胞增殖及迁移的抑制作用。方法采用直接感染台盼蓝染色排除法、MTT及体外趋化实验检测血管抑素K1-5对内皮细胞增殖及趋化的抑制作用。结果 直接感染台盼蓝染色排除法及MTT法检测表明，血管抑素K1-5的腺病毒能抑制血管内皮细胞增生，并对其具有杀伤力。趋化实验表明，血管抑素K1-5能使血管内皮细胞趋化能力减弱，抑制血管形成。结论 血管抑素K1-5能明显抑制血管内皮细胞增殖及迁移，为进一步体内实验研究其对血管形成的抑制作用奠定了基础。     

MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白的制备及其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用

目的：构建MDA-7/IL-24-HT7原核及真核表达质粒,制备MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白,研究该融合蛋白在肿瘤细胞内的定位及其对肿瘤细胞致凋亡作用。方法：PCR扩增MDA-7/IL-24基因,插入含有HaloTag (HT7)标签的载体中,构建MDA-7/IL-24-HT7原核及真核表达质粒;MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白经IPTG诱导表达后纯化。利用带有荧光标记的HT7配基观察MDA-7/IL-24-HT7在肿瘤细胞内的定位。MTT法及AnnexinV-PI染色法检测MDA-7/IL-24-HT7对肿瘤细胞生长和凋亡的影响。结果：成功构建了表达MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白的原核及真核表达质粒,MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白主要存在于E.coli BL21的包涵体内。MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白定位于肿瘤细胞的内质网上。MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白可抑制肿瘤细胞的生长,1 mg/ml MDA-7/IL-24-HT7 融合蛋白作用大肠癌HCT116细胞、肝癌SMMC7721细胞96 h后,细胞凋亡率分别为（34.7±1.3）% 和（22.1±0.9）%,显著高于未处理的肿瘤细胞（P<0.01）。结论：带有HaloTag标签的MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白可抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞凋亡。     

精准靶向肿瘤局部的免疫治疗有可能成为治愈癌症的关键性策略

[摘要]肿瘤免疫治疗的两大重要进展：（1）在体外激活或通过基因修饰的T细胞进行体内输注;（2）通过抗体使体内被抑制的免疫细胞激活并处于相对持续作用状态。前者的基因修饰的T细胞主要是指嵌合抗原受体T（CAR-T）细胞,其对部分血液肿瘤产生了明显的疗效;后者主要指免疫检查点抗体,其对基因突变较多的肿瘤产生了明显的疗效。对于肿瘤患者而言,其肿瘤局部微环境的免疫抑制状态往往明显高于全身的免疫抑制状态。要将肿瘤局部微环境的免疫状况调整到正常或增强,全身用药时可能引发其它正常组织免疫反应过强,甚至导致严重损害,如间质性肺炎、急性心肌炎及严重肝损伤。本文通过总结肿瘤免疫微环境的形成和分类、肿瘤治疗和免疫治疗的发展历程,阐述靶向肿瘤微环境的重要性,提出了用自分泌抗体的CAR-T 细胞（白泽T细胞）高效精准靶向肿瘤局部,迅速提高肿瘤局部微环境的免疫功能,且有可能成为治愈癌症的关键策略。