嵌合抗CD20抗体片段F(ab'')2的表达及活性

目的 :为了简化生产步骤 ,提高抗体蛋白的生物活性 ,探索在工程菌体内直接进行抗CD2 0F(ab’) 2 的高效率分泌性表达。方法 :采用单因素考察法优化培养条件 ,使蛋白G柱和S2 0 0 HR分子筛柱分离纯化目的蛋白 ,用MTT法检测抗CD2 0F(ab’) 2 抑制Daudi细胞体外生长的活性。结果 :发现用论文所选定的最适培养条件 ,抗CD2 0F(ab’) 2 的产量有了明显提高 ,从1 9～ 2 .2mg L达到了 3 7～ 4 3mg L ,F(ab’) 2 在表达产物中所占的比例也从 9 7%～ 13 2 %提高到了 38 1%～ 4 6 8% ;使用S2 0 0 HR分子筛柱对蛋白G柱亲和纯化后的产物进一步分离纯化 ,可以使F(ab’) 2 的纯度达到 85 %以上 ;MTT法检测结果证明F(ab’) 2 抑制Daudi细胞生长的IC50 值为 14 6 μg ml,而Fab’为 39 5 μg ml。 结论 :实现了抗CD2 0F(ab’) 2 在工程菌体内的高效率分泌性表达 ,而且所表达的抗CD2 0F(ab’) 2 比抗CD2 0Fab’具有更强的抑制Daudi细胞体外生长的能力     

大肠杆菌工程的高密度培养

本文列举了大肠杆菌工程的高密度培养技术在重组异源蛋白的工业大生产中所处的重要地位，阐述了大肠杆菌进行高密度培养所需克服的主要障碍及其成原因，总结了高密度培养技术在近年来所取的一些进展。     

基因工程抗体的设计和应用

目的 综述基因工程抗体的研究进展，为此领域的研究提供参考。方法 根据国内外文献，结合作者近年的研究，较全面地介绍基因工程抗体的各种设计思路，总结各种设计方法的特点，并分析基因工程抗体的临床应用现状。结果和结论 基因工程抗体药物的研究正方兴未艾，已有一批抗体药物进入临床应用，并呈现出广阔的市场前景。     

大肠杆菌工程菌的高密度培养

本文列举了大肠杆菌工程菌的高密度培养技术在重组异源蛋白的工业化大生产中所处的重要地位;阐述了大肠杆菌工程菌进行高密度培养所需克服的主要障碍及其形成原因;总结了高密度培养技术在近年来所取得的一些进展.     

铵离子抑制a—vermectin生物合成的机理

实验中发现铵离子（NH4^ )对avermectin 的生物合成具有强烈的抑制作用,并对其机理进行了研究,。结果表明：铵离子对avermectin生物合成的抑制作用是通过同时作用于avermectin产生菌（Streptomyces avermitilis)糖代谢过程中的多个位点而实验的,发酵培养基中含有的少量铵离子,造成了avermectin链霉菌胞外淀粉酶的总活力降低;发酵液中的丙酮酸积累量明显降低。菌丝体内葡萄糖－6－磷酸脱氢酶活力降低;琥珀酸脱氢酶活力显著提高,最终造成了糖代谢过程中产生的可用于avermectin生物合成的短链脂肪酸数量减少,进而抑制抗生素的生物合成。