干扰α烯醇化酶对耐药细胞株K562/A02耐药性的影响

目的肿瘤耐药的产生是肿瘤治疗失败的主要原因之一,α烯醇化酶(eno1)与肿瘤细胞耐药产生和发展密切相关。探究eno1对人慢性粒细胞白血病耐药细胞株K562/A02生长及耐药的影响。方法筛选3株稳定干扰eno1的细胞系K562/A02-sheno1和对照细胞系K562/A02-shcon;采用细胞计数法测定细胞生长速率,MTT法测定细胞增殖能力,细胞内罗丹明123含量测定细胞外排药物能力,real-time PCR反应测定基因mRNA表达水平,Western blot实验测定基因蛋白表达水平。结果与敏感性细胞株K562相比,eno1在耐药细胞株K562/A02中为高表达状态,其在mRNA水平和蛋白水平表达分别增高(2.85±0.56)倍和(1.43±0.05)倍;而K562/A02细胞生长速率与K562细胞相比差异无显著性。K562/A02-sheno1细胞系与对照组K562/A02-shcon相比生长速率降低,对抗肿瘤药物紫杉醇和阿霉素的敏感性均增强,且K562/A02-sheno1细胞系中罗丹明123含量也明显增高。K562/A02-sheno1细胞系中耐药相关基因MDR1表达水平降低。结论稳定干扰eno1表达能抑制K562/A02细胞生长,有效逆转K562/A02细胞耐药性,提高其对药物的敏感性,其机制与MDR1基因表达相关。     

微型双功能抗体在裸鼠体内介导人T细胞杀伤白血病细胞

目的:研究抗CD3/抗CD19微型双功能抗体介导人T细胞对白血病细胞的特异性靶向杀伤活性。方法:利用Ficoll-Hypaque法分离外周血淋巴细胞(PBL),流式细胞术从中分选T淋巴细胞,FACS检测T细胞表面标记CD25和CD69激活后的表达变化,实时定量PCR检测各组穿孔素(Perforin)和颗粒酶A(Granzyme A)的释放,建立BALB/c裸鼠Raji细胞移植瘤模型,测定该双功能抗体介导的体内靶向杀伤活性。结果:激活的T细胞,双功能抗体组CD25和CD69的表达以及释放Perforin和Granzyme A的量均明显高于对照组,在对人白血病裸鼠移植瘤模型的生物治疗中,抗CD3/抗CD19微型双功能抗体能有效抑制白血病移植瘤的生长。结论:抗CD3/抗CD19微型双功能抗体在体外及动物肿瘤模型实验中能介导人T细胞有效杀伤白血病细胞,具有潜在的临床应用前景。     

嵌合抗CD20 Fab‘对B淋巴瘤细胞Raji细胞生长的影响

目的：研究嵌合抗CD20基因工程抗体Fab‘的抗肿瘤活性。方法：利用MTT法以及^3H掺入法测定嵌合抗CD20 Fab‘对Raji细胞生长的影响。结果：MTT法测定结果显示嵌合抗CD20 Fab‘对Raji细胞的生长具有抑制作用，抑制作用成剂量依赖性，其IC50为24ug/ml；嵌合抗CD20 Fab‘对^3H-TdR掺入Raji细胞无抑制作用，表明抗CD20 Fab‘不影响Raji细胞DNA的合成；但嵌合抗CD20 Fab‘抑制^3H-UdR掺入Raji细胞，表明嵌合抗CD20 Fab‘对Raji细胞RNA合成具有抑制作用，其抑制作用成剂量相关性。结论：嵌合抗CD20 Fab‘抑制Raji细胞生长，嵌合抗CD20 Fab‘具有较好的抗肿瘤活性。     

疏水层析法和凝胶过滤法分离HI47抗CD20 F(ab'''')2之比较

目的　比较疏水层析和凝胶过滤两种方法分离纯化HI4 7抗CD2 0F(ab’) 2 的优缺点。方法　采用亲和层析柱protein G对发酵菌体裂解液进行粗纯化,分别采用疏水层析法和凝胶过滤法进行抗CD2 0F(ab’) 2 的分离纯化:疏水层析采用梯度洗脱,80 %B液洗脱2 0min ,10 0 %B液洗脱30min ;凝胶过滤以5 0mmol LPB缓冲液(pH 7.0 ) ,0 .8mL min洗脱4h。结果　粗纯化产物主要含F(ab’) 2 、Fab’,含量分别为19.6 %、5 9.7%。采用疏水层析法1h即可完成分离,F(ab’) 2 回收率为6 7% ,纯度为89.3% ;凝胶过滤4h完成分离,F(ab’) 2 回收率为6 5 % ,纯度为90 .5 %。FACS结果表明,两者结合Raji细胞的阳性率分别为99.93%和99.97%。结论　疏水层析分离纯化抗CD2 0F(ab’) 2 简单、快速、回收率高、纯度高,适用于大规模的工业化生产。     

上海市某区中药饮片供应链管理模式探讨*

本研究是在新形势下对上海市某区中药饮片供应链管理模式进行调查分析,深度挖掘中药饮片供应链管理模式存在的问题,结合当前供应链管理体系的发展需求,提出推进中药饮片国家标准编码落地、构建中药饮片供应链安全溯源体系、探索"互联网+"中药绿色供应链建设和完善政府监管部门工作职能等策略,为上海市某区的中药饮片供应链管理体系建设提供参考信息,同时也为我国其他地区中药饮片未来发展提供借鉴。     

IL-3-LDM融合蛋白对CD123+白血病细胞的靶向杀伤作用

目的：构建以IL-3为靶向、力达霉素（lidamycin,LDM）为弹头的融合蛋白IL-3-LDM,观察其对多种CD123+白血病细胞的靶向杀伤作用。 方法: 原核表达IL-3-LDP（interleukin 3-lidamycin）融合蛋白,组装活性烯二炔（active enediyne,AE）发色团得到IL-3-LDM。流式细胞术检测不同白血病细胞系（KG1-a、TF-1、M07e、HL-60、K562、Raji）表面CD123分子的表达,并检测融合蛋白IL-3-LDM与各白血病细胞的结合能力;CCK-8检测IL-3-LDM融合蛋白对不同CD123阳性率的白血病细胞的杀伤能力。 结果: 组装活性发色团得到的IL-3-LDM蛋白纯度可达90%以上。急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）KG-1a细胞表面CD123阳性率最高（88.9%）,其次为MO7e和TF-1细胞（＞75%）,再次为HL-60细胞（7.8%）,而K562、Raji细胞CD123表达呈阴性。体外IL-3-LDM融合蛋白对CD123+白血病细胞(KG-1a、MO7e、TF-1和HL-60细胞）的结合能力和杀伤效率与细胞表面CD123的阳性率成正比,对于CD123表达率最高的KG-1a细胞,LDM的杀伤强度是多柔比星（adriamycin, ADR)的1 415.8倍,而IL-3-LDM 的杀伤强度又是LDM的9.6倍。 结论: IL-3-LDM融合蛋白可以有效携带细胞毒药物LDM 并高效靶向杀伤CD123+白血病细胞。     

复方氨基比林治疗剧烈痛经80例疗效观察

复方氨基比林是临床最常用的解热镇痛药，主要用于急性高热时的紧急退热及发热时头痛症状起到缓解作用等。笔者自2007年9月～2010年6月在我校门诊部采用复方氨基比林注射液治疗剧烈痛经80洌，取得了显著疗效，现报告如下。     

老年人肾综合征出血热30例临床分析

我院于1996年～2000年收治老年人肾综合征出血热(HFRS)30例,现报告如下。 1 临床资料 1.1 一般资料本组30例,男性14例,女性16例,年龄60岁～69岁17例,70岁～79岁13例。 1.2 临床表现 30例均有发热,体温38.1℃～39.0℃6例(20％),39℃～40℃19例(63.33％),40℃以上5例     

重型霍乱1例报告

1 临床资料。患者，男，24岁，住院号：30248，因剧烈腹泻、呕吐9h于1999—06—18 9am收入院。患者为一个体工商户，由苍山县外出去重庆市，于入院前4日由重庆市返苍山，于6月17日11pm到家，1h后出现腹泻，始为稀水便，无腹痛，无腥臭，后为半泔样大便，先后达10余次，每次量达800～1000ml，继之出现呕吐达5～6次，为胃内容物及半泔样物，伴腓肠肌痉挛，     

抗癫一号对癫痫大鼠自由基代谢及海马神经元能影响

目的 探讨抗癫一号对慢性致痫大鼠自由基含量及海马神经元的影响.方法 腹腔注射戊四唑（PTZ）造成慢性癫痫大鼠动物模型,化学比色法测定其自由基含量,HE染色观察海马区神经元变化.结果 抗癫一号可减少癫痫大鼠血清内自由基含量,与模型组比较差异具有统计学意义（P ＜ 0.05或P ＜ 0.01）;可增加海马区神经元的数目,恢复神经元形态及结构.结论 抗癫一号通过增加抗氧化酶活性来阻止PTZ点燃后所产生的自由基对神经元的损害,从而起到神经保护作用.