建立大鼠Parkinson’s病动物模型方法的改进

随着神经化学的发展,使得人们有可能应用某种神经毒素特异性地毁损某些神经元,Ungerstedt首先在大鼠黑质定位注射6-OHDA,成功地制备了Parkison's病(PD)动物模型,本文就如何进一步提高PD模型成功率进行一些探讨。 材料和方法 选用体重150～250 g的SD大鼠50只,雌雄不拘,45只为实验组,5只为对照组。术前用戊巴比妥钠(30 mg/kg)腹腔麻醉,头部固定于立体定向仪上(江湾Ⅰ型C),手术暴露前后囟,调整颅骨平面,使后囟低于前囟1 mm,同时测量前后囟之间的距离(后囟位置以人字缝尖为准,在实验中测得该间距为5.8～7.5 mm)。选取两个注射点,其坐标参数分别为:后囟向前0.33×前后囟间距     

大鼠神经系统发育过程中神经元特异性烯醇酶的出现和意义

用自行提纯的人脑和牛脑神经元特异性烯醇酶(NSE)分别免疫家兔,制备兔抗人和抗牛NSE血清(抗NSEh和抗NSEb)。以PAP免疫组织化学染色,系统观察3O只发育出SD大鼠的脑、脊髓与脊神经节。发现NSE最先出现于胚胎15d的脊神经节神经元,随后相继出现于三叉神经节、脊髓、嗅皮质、海马、扣带回和外侧皮质神经元。表明NSE先后出现于周围神经和中枢神经系统,由脊髓向大脑、原始皮质及新皮质发展的顺序,与神经系统发育过程中的头向发展规律相一致。     

人脑皮质中央前回的组织结构

选用我国成人正常大脑8个,利用Nissl、Golgi和Cox染色法,观察中央前回皮质的组织结构。在Nissl法切片上,中央前回皮质的特点是:在第3～5层之间无颗粒细胞层作分隔,在第五层下部有特征性的Betz巨锥体细胞。在Golgi法切片上,中央前回神经元可分为锥体细胞和颗粒细胞,后者又可分为梭形细胞和星形细胞。对第五层锥体细胞的顶树突小棘进行了计数,发现其密度在第三层下部最高。在Cox法切片上,中央前回的锥体细胞、星形细胞和梭形细胞三者的比例是64∶25∶11,以锥体细胞为最多。对以上结果结合文献进行了讨论。     

为脑移植建立培养的人胚胎脑细胞库的研究

我们用培养的大鼠胚胎中脑黑质多巴胺能神经元,移植于帕金森氏病(简称PD)大鼠模型脑内,可使损伤黑质所引起的异常行为得到纠正。在此基础上,试图建立培养的人胚中脑多巴胺能神经元库,可为PD患者随时提供移植用的神经元。特选用体外培养法,将吸刮流产或经水囊引产的中期人胎(2～4月)共10例,切成小块组织和分离细胞悬液培养。结果表明,其生长发育过程和大鼠胚胎中脑的相似。但是人胎个体差异较大,培养时间最长的达7周。水囊引产的比吸刮流产的成活时间长。两种培养方法的所见基本相同。培养4小时细胞全部贴壁,少数细胞已有突起。第2天起,见组织块中首先爬出成纤维细胞和胶质细胞,继而神经元沿胶     

甲胎蛋白在大鼠体内的分布与生理意义

作者用兔抗大鼠甲胎蛋白(AFP)血清,对胚胎期、出生、生后和老年大鼠以及新生小鼠脑用PAP免疫组织化学法系统检查主要脏器和神经系统内AFP的分布,发现许多器官组织中有AFP阳性反应细胞,它们的出现和存在各有迟早和久暂之别。除国外巳报道者外,作者还补充口腔上皮、颌下腺和软骨等新资料。对AFP在胚胎期的广泛分布与其生长发育之间的关系作了讨论。     

非神经组织肿瘤中神经元特异性烯醇酶的表达

取54例经手术切除的肿瘤组织标本,用HRP-SPA法作神经元特异性烯醇酶(NSE)免疫组织化学染色。结果表明:在37例各种癌组织切片中,32例NSE染色阳性;在17例各种肉瘤组织切片中,3例NSE染色阳性。两者经x~2检验P<0.001,有极显著差异。NSE在正常情况下主要分布于神经元、神经内分泌细胞及APUD系统的细胞。在肿瘤情况下,除神经元、神经内分泌与APUD系统肿瘤的NSE染色为阳性外,非神经组织来源的肿瘤阳性率较高的有:肺、胃腺癌;肺、食道鳞癌;乳腺浸润性导管癌;肝细胞癌等。可供诊断与鉴别诊断的参考。提示:在肿瘤组织中NSE已失去其在正常情况下的分布特异性。     

大鼠脑内乙酰胆碱酯酶的出现和变化

本文用组织化学技术对62个从胚胎早期到成体大鼠脑内乙酰胆碱酯酶(AChE)的出现和变化进行了观察,同时用Nissl法制作19个相应时期的标本作为对比检查,主要结果如下: 一、AChE的出现顺序是循脊髓→延脑、后脑和中脑→间脑→大脑。在大脑,由旧皮质向新皮质发展。这反映出AChE在大鼠神经系统发生中具有头向发展的趋向。二、大鼠脑内具有AChE阳性的神经元,包括胆碱能神经元和胆碱敏感细胞,它们都和神经递质乙酰胆碱(ACh)有关。二、以成体大鼠脑中AChE的分布与前人的工作进行对比,我们显示的阳性核团较多,如三叉神经中脑核、丘脑前背核、丘脑前腹核、丘脑外侧核、丘脑网状核、外侧缰核、视上核、室旁核、束旁核以及红核中,均能见到明显的含AChE的细胞。大脑皮质中亦有少数阳性细胞存在。     

改良快速高尔基法显示少突胶质细胞

我们曾用多种Golgi法试染神经细胞,有时也有较好的星状胶质细胞或少突胶质细胞出现。Vogt(1981)曾指出“用较稀浓度的固定液和浸染液可获得较少的神经元”。在此启示下,我们按照Peters等(1981)报导的Golgi电镜技术中介绍的固定液,并在浸染液和硝酸银的处理方面作了些改良,从而使显示少突胶质细胞取得了较为满意的效果。现将经过改良的方法介绍如下:1.材料:小猫或幼年大鼠或小鼠的大脑皮质、脑干等,材料宜新鲜。2.灌注固定:动物用36％水合氯醛进行腹腔内注射(0.1ml/100g体重)。从左心室心尖区先灌注生理盐水约200ml,再用     

大鼠颌下腺神经元特异性烯醇酶的免疫组织化学观察

近20年来在小鼠、大鼠等啮齿类动物的颌下腺中陆续发现并分离出20多种生物活性多肽,如神经生长因子、肾素、血管紧张素、淋巴样因子等,其含量以雄性小鼠最为丰富,主要定位于颌下腺的颗粒曲符细胞(简称GCT)内。有些研究工作提示颌下腺有内分泌样功能,可能属于弥散性神经内分泌系统的一部分,但至今尚未定论。鉴于神经元特异性烯醇酶(简称NSE)是神经元和神经内分泌系统的特异性标记物,也是这些细胞分化成熟的标记物之一,应用免疫组织化学方法,观察NSE在颌下腺内的分布与细胞内定位,无疑可为进一步弄清颌下腺的生理作用提供必要的形态学基础。 方法 成年SD大鼠各3～4只,分别进行光镜与电镜免疫组织化学(组化)的观察。光镜观察组制成厚度为7μm的石蜡切片,以兔抗牛和抗大鼠NSE血清(抗NSEb和抗NSEr)-PAP免疫组化染色,抗血清稀释分别为1:200和1:400。电镜观察组的动物先经4℃ 4％多聚甲醛-0.2％戊二醛混合液心脏