人黄韧带细胞骨化发生过程中的自噬

文题释义： 黄韧带骨化症：是由于脊柱黄韧带发生骨向分化而形成的一种韧带骨化疾病,常导致椎管狭窄,造成脊髓受压,并产生不可逆损害,出现肢体感觉障碍,严重的将导致瘫痪。目前对黄韧带骨化病因学研究取得了一定的进展,但其具体的发病机制仍未完全明确。 自噬：因外界或自身环境的改变,细胞器和胞内蛋白通过溶酶体进行分解消化并重新利用,从而达到适应外界环境、维持细胞内环境稳定的过程,是真核细胞特有一种表现形式。 MAPK信号通路：是生物体内重要的信号转导系统之一,它可以被物理应激、炎性细胞因子、生长因子以及细胞复合物等一系列细胞外信号或刺激激活,从而参与介导细胞生长、发育、分裂以及分化等多种生理及病理过程。在哺乳动物细胞中MAPK信号通路的主要信号分子包括ERK1/2、JNK以及P38等。 背景：黄韧带骨化发生的病理机制尚不清楚,临床上无有效的药物或非手术治疗的方法。目前研究发现,骨桥蛋白与自噬在成骨过程中均发挥重要作用,二者在黄韧带骨化中的作用尚不清楚。 目的：通过对骨桥蛋白和自噬在黄韧带骨化发生机制的研究,尝试找出药物治疗的潜在作用靶点。 方法：①黄韧带骨化病、胸椎骨折或单纯腰椎间盘突出症患者行后路全椎板切除减压获取黄韧带,将标本分为骨化组和非骨化组,每组各取8例标本,通过免疫组化染色观察骨桥蛋白、骨钙素及自噬指标Beclin-1、LC3、P62的表达;②通过组织块贴壁法进行黄韧带细胞的分离培养,并用不同质量浓度的骨桥蛋白干预不同时间来构建体外黄韧带细胞骨化模型;③非骨化组黄韧带细胞用不同浓度的自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤干预后,再用100 μg/L骨桥蛋白诱导,应用Western blot检测骨化指标碱性磷酸酶、骨钙素的表达变化;④用100 μg/L骨桥蛋白干预非骨化黄韧带细胞,并在0,15,30,60,120 min终止骨化诱导过程,应用Western blot检测MAPK信号通路中重要分子ERK1/2、JNK、P38的磷酸化情况;⑤非骨化组黄韧带细胞用ERK1/2特异的磷酸化阻滞剂U0126阻断ERK1/2通路磷酸化后,再用100 μg/L骨桥蛋白诱导,应用Western blot检测碱性磷酸酶以及骨钙素的表达变化。 结果与结论：①骨化黄韧带和非骨化黄韧带组织骨钙素、骨桥蛋白的免疫组化均呈阳性表达;骨化黄韧带组织中Beclin-1呈阳性表达,而LC3及P62未见明显阳性结果;非黄韧带骨化组织中Beclin-1、LC3、P62均呈阳性表达;②与非骨化组比较,骨化组黄韧带细胞中碱性磷酸酶和骨钙素的表达增加;骨桥蛋白可诱导黄韧带骨化,骨桥蛋白的作用具有浓度相关性和时间相关性;③自噬强弱与骨化程度呈负相关,即自噬越明显,骨化作用越弱;④骨桥蛋白能使MAPK信号通路磷酸化,并具有一定的时间相关性;抑制MAPK磷酸化过程后,骨桥蛋白仍然能够诱导黄韧带细胞的骨化;⑤结果表明,黄韧带骨化发生过程中,信号通路上ERK1/2、骨桥蛋白、骨钙素、碱性磷酸酶分子的上下游关系为：ERK1/2→骨桥蛋白→骨钙素/碱性磷酸酶。 ORCID: 0000-0003-0008-9802(许国峰) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

二尖瓣狭窄外科闭式分离术后再狭窄的球囊扩张体会

二尖瓣狭窄经外科闭式分离术后发生再狭窄，伴有心力衰竭和（或）二失瓣关闭不全、主动脉瓣关闭不全，不能耐受外科再次闭式分离术或瓣膜置换术，是外科治疗的禁忌症。本研究表明仍可进行球囊扩张术，以改善病人的临床症状，提高生活质量。临床资料：9例施行经皮二尖瓣狭窄球器扩张术，有6例年龄为23～48岁，男2例，女4例，平均年龄35岁，心功能在Ⅰ～Ⅱ级之间，心前区都有舒张期杂音Ⅱ～Ⅲ级，左房42～51mm，二尖瓣口0．7～1．2cm2，胸片无肺瘀血，心胸比例＜50％，都有双房影，右心室饱满，肺动脉段稍突出，选择球翼直径25～27mm。3例经外…     

直接肽段结合方法(DPRA)在中药注射剂过敏反应预测中的应用

目的:采用直接肽段结合方法（DPRA）考察两种中药注射剂的过敏反应,评估该方法在中药注射剂过敏反应检测中应用的可能性。方法:运用HPLC法,通过测定两种中药注射剂对半胱氨酸多肽和赖氨酸多肽的消耗,来推测其产生过敏反应的可能性。结果:两种中药注射剂对半胱氨酸多肽和赖氨酸多肽均有不同程度的消耗,预示有潜在的致敏性。结论:该方法可以作为中药注射剂过敏反应的预测方法。     

胰岛素泵治疗妊娠期糖尿病35例

目的研究胰岛素泵治疗妊娠期糖尿病(GDM)临床疗效。方法回顾性分析我院2004年11月～2009年5月收治的妊娠期糖尿病患者65例,应用胰岛素泵(治疗组)35例,注射普通胰岛素(对照组)30例,比较两种治疗方式对母儿的影响。结果应用胰岛素泵治疗组血糖控制满意,母儿并发症明显少于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。结论胰岛素泵治疗妊娠期糖尿病,是一种方便、安全、有效的治疗模式。     

改良定喘汤治疗支气管哮喘急性发作期临床观察

目的观察在常规西医治疗基础上采用改良定喘汤治疗支气管哮喘急性发作期的临床疗效。方法将66例支气管哮喘急性发作期随机分为2组。均予西药常规治疗,治疗组予改良定喘汤,日1剂,水煎取汁300 mL,分2次口服;对照组予硫酸沙丁胺醇片2片,每日3次口服。2组均以10 d为1个疗程。结果治疗组和对照组的总有效率分别为100%和75.76%,治疗组疗效明显优于对照组（P〈0.05）。2组治疗后第1 s用力呼气容积（FEV1）、FEV1占预计值百分比（FEV1%）均升高,与本组治疗前比较差异均有统计学意义（P〈0.05）,组间比较差异亦有统计学意义（P〈0.05）,治疗组改善优于对照组。结论在常规西医治疗基础上采用改良定喘汤治疗支气管哮喘急性发作期疗效确切,能明显改善患者的肺功能指标。     

针刺治疗中风合并高血压疗效观察

高血压是中风发生的一种独立危险因素,也是最重要的危险因素之一。本文对天津中医学院第一附属医院2001年针灸科中风合并有高血压的住院患者505例进行分析,全部病例均以醒脑开窍针刺法为主要治疗手段,将其按轻、中、重3种程度进行疗效对比分析。     

胰岛素泵治疗妊娠期糖尿病疗效观察

目的观察胰岛素泵对妊娠期糖尿病(GDM)患者妊娠的影响。方法对67例GDM患者采用胰岛素泵治疗(治疗组),对62例GDM患者采用皮下注射胰岛素方法治疗,比较2组妊娠相关的并发症发生情况。结果治疗组母婴患病率明显低于对照组。结论胰岛素泵治疗GDM能减少母婴并发症。     

中西医结合治疗重症肩周炎疗效观察

目的观察活络除痹方联合臂丛阻滞粘连松解治疗重症肩周炎疗效。方法将80例患者随机为2组,每组40例,2组均口服中药活络除痹方,治疗组同时于治疗第1天采用臂丛阻滞粘连松解手术治疗,所有患者按照同一指导方法康复锻炼,3周后对疼痛、日常活动、运动范围及力量进行评分,判断疗效,观察不良反应。结果 2组治疗后各项指标评分均显著高于治疗前(P均0.05),治疗组治疗后日常活动及运动范围评分、力量评分显著高于对照组(P均0.05)。治疗组治愈率为80%,对照组为42%,2组比较有显著性差异(P0.05)。治疗组总有效率为100%,对照组88%,2组比较有显著性差异(P0.05)。2组均无严重不良反应发生。结论活络除痹方联合臂丛阻滞粘连松解治疗重症肩周炎可提高疗效,值得临床推广。     

大学生与中学生预防艾滋病生活技能教育效果的比较研究

目的 通过对两所试点学校进行生活技能教育前后的问卷调查的比较分析,了解大学生和中学生对预防艾滋病的相关知识行为现状及探讨生活技能教育的成效.方法 2007年6月～9月在山东潍坊某高校和山东菏泽某中学对240名学生开展以生活技能教育为基础的学校预防艾滋病(AIDS)专题教育,并在教育前后分别发放问卷了解相关的认知情况.结果 开展教育前中学生和大学生对于HIV/AIDS的认知情况有显著差异.教育前后的中学生和大学生的自我对比有统计学意义,生活技能教育取得较高成效,特别是对于共用杯子和厕所不传播HIV的认识由教育前的21.2%和26.3%的低正确率分别提升到了93.2%和92.4%.结论 在中学生和大学生中开展生活技能为基础的预防艾滋病教育非常有效,应推广这种教育模式,同时调动社会、学校、家庭的力量建立一个综合艾滋病防控网络.     

活络除痹汤治疗膝关节骨性关节炎46例疗效观察

膝关节骨性关节炎是一种以关节软骨变性、丢失及关节边缘和软骨骨质再生为特征的慢性关节炎疾病，临床以反复肿胀、疼痛、活动受限乃至行走困难为主要表现，其发病率随年龄增加而增高，是中老年人常见及多发的骨关节疾病，严重危害患者身体健康和生活质量。2005—2008年，我们采用活络除痹汤治疗膝关节骨性关节炎46例，