赛沛Xpert Xpress Flu/RSV Assay在儿童急性呼吸道感染病原学检测中的应用评价

目的评价赛沛Xpert Xpress Flu/RSV Assay(后简称Xpert)在儿童流感病毒和呼吸道合胞病毒感染实验室检测的效果。方法2018年10月—2019年2月,在北京儿童医院门诊采集急性呼吸道感染儿童的鼻咽拭子,所有样本均采用Xpert和测序方法进行检测,不一致结果样本使用第三方检测方法进行验证,比较Xpert和测序方法的灵敏度和特异性、阳性预测值和阴性预测值。结果本研究共分析388份儿童急性呼吸道感染病例的鼻咽拭子样本的Xpert和测序法方法的检测结果。两种方法检测对FluA、FluB和RSV的结果具有较高的一致率,分别为:FluA 93.81%(364/388)、FluB 94.85%(368/388)和RSV 91.75%(356/388)。Xpert检测FluA、FluB和RSV相比测序方法具有较高的灵敏度,分别为99.21%(125/126)vs.92.86%(117/126)、100.00%(109/109)vs.84.40%(92/109)和100.00%(52/52)vs.40.38%(21/52)。Xpert检测FluA、FluB和RSV的特异度均低于测序方法,95.42%(250/262)vs.99.24%(260/262)、99.28%(277/279)vs.99.64%(278/279)和99.70%(335/336)vs.100.00%(336/336)。Xpert检测FluA、FluB和RSV的阳性预测值均低于测序方法,分别为91.30%(126/138)vs.98.33%(118/120)、98.18%(108/110)vs.98.92%(92/93)和98.11%(52/53)vs.100.00%(21/21)。Xpert检测FluA、FluB和RSV的阴性预测值均高于测序方法,99.60%(251/252)vs.96.67%(261/270)、99.64%(279/280)vs.94.27%(280/297)和100.00%(337/337)vs.91.60%(338/369)。结论赛沛Xpert Xpress Flu/RSV Assay是一种快速、准确、可靠的可以适用于儿童检测流感病毒和RSV的分子诊断方法。     

多种受体酪氨酸激酶抑制剂舒尼替尼减轻流行性乙型脑炎病毒感染的研究

目的 评价多种受体酪氨酸激酶抑制剂舒尼替尼（sunitinib）在体内和体外治疗流行性乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus, JEV）感染的效果。方法 4周龄BALB/c小鼠腹腔注射JEV。感染小鼠以两种给药策略进行治疗,分别为连续5 d和连续10 d给与舒尼替尼治疗,后观测其体重变化和生存率;通过qRT-PCR技术检测小鼠脑内病毒RNA载量的变化;利用免疫组织化学染色技术检测小鼠脑内CD4⁺T淋巴细胞和CD8⁺T淋巴细胞的数量及分布;利用免疫荧光染色技术观察药物治疗前后小鼠脑内JEV病毒E蛋白的表达。此外,通过JEV体外感染Vero细胞并给与一定浓度舒尼替尼进行干预,观察细胞存活状态;采用间接免疫荧光染色观察治疗前后细胞内JEV病毒E蛋白的表达。 结果 小鼠感染JEV后连续给与舒尼替尼可显著提高其生存率,并且连续给药5 d的生存率和体重变化结果优于连续给药10 d。舒尼替尼治疗后减少了脑内CD4⁺T淋巴细胞和CD8⁺T淋巴细胞浸润,小鼠脑内血管套袖样改变减轻;但治疗前后小鼠脑内的JEV病毒载量和脑内E蛋白的表达变化不太明显;感染JEV的Vero细胞在给与舒尼替尼后细胞病变效应稍有减轻,E蛋白表达少量变化。结论 舒尼替尼治疗能够显著降低JEV感染小鼠死亡率,并且连续给与舒尼替尼5 d的治疗效果更好,JEV感染小鼠接受舒尼替尼治疗后可减少脑内CD4⁺T淋巴细胞和CD8⁺T淋巴细胞浸润,改善脑内血管袖套样炎性炎症状,延长小鼠生命。     

2017—2020年我国儿童急性下呼吸道人腺病毒感染流行病学特征分析

目的 了解我国儿童急性下呼吸道人腺病毒(human adenovirus,HAdV)感染的流行病学特征及优势基因型别。方法 收集2017年6月—2020年4月我国南北方6家医院的急性下呼吸道感染(acute lower respiratory tract infection,ALRTI)住院儿童的呼吸道样本,使用多重呼吸道病毒检测试剂对常见呼吸道病毒进行检测。对HAdV阳性样本进行基因分型,并收集患儿的临床信息进行临床特征及流行病学分析。结果 本研究共纳入2 793例ALRTI患儿,其中143例HAdV阳性,检出率为5.12%。南北方检出率分别为6.37%(91/1 429)和3.81%(52/1 364),差异有统计学意义(χ²=9.384,P=0.002),北方3～<6岁年龄组检出率最高,为5.94%;南方1～<3岁年龄组检出率最高,为9.37%。南方2019年春季和北方2019年夏季HAdV检出率最高,分别为10.43%(12/115)和13.70%(10/73)。92例HAdV阳性样本被成功分型,以B种的3型(35例)和7型(33例)居多;北方...     

基于733例择期手术患儿的EB病毒感染血清流行病学调查

目的 了解不同年龄段儿童EB病毒(EBV)感染现状及流行病学特点。方法 以首都医科大学附属北京儿童医院2010年行外科择期手术住院患儿为研究对象,并排除临床EBV感染的病例。以患儿生化检测后剩余血清,采用酶联免疫吸附法检测血清EBV-CA-IgG、EBV-NA-IgG和EBV-CA-IgM抗体。计算EBV累计感染率和新发感染率,分析各年龄组EBV感染的性别和城乡特征。结果 733例患儿进入分析,男414例,女319例。<1岁306例,~5岁193例,～10岁147例,～17岁87例。①CA-IgG、NA-IgG和CA-IgM抗体的总阳性率分别为70.4%（516例）、68.4%（501例）和0.7%（5例）;CA-IgG、NA-IgG的阳性率随年龄增长呈增高趋势;②<1、～5、～10和～17岁组EBV累计感染率分别为54.2％、74.6％、85.0％和90.8％;新发感染率分别为2.1％、2.4％、0和11.1％;③各年龄组男女性累计感染率差异无统计学意义;④各年龄组CA-IgG抗体阳性率和累计感染率均呈现城区高于郊区的趋向,但差异无统计学意义。结论 儿童EBV原发感染的年龄较早,10岁时近90%的儿童血清EBV-CA-IgG抗体阳性,年龄较20世纪80年代有所延迟。     

甲型H7N9禽流感病毒的病毒学特征

自2013年2月开始,中国东部省市陆续新发现了由甲型H7N9禽流感病毒引起人感染的病例。研究表明甲型H7N9病毒是一个单纯禽类来源的三元重配体,它的HA和PB2蛋白存在多个特征性突变（包括G186V、Q226L和E627K氨基酸替换）,这些突变可能促进了该病毒与人细胞受体的结合以及病毒的复制。目前尚未发现H7N9禽流感病毒发生稳定的人与人间的传播,但不能排除有限人传人的可能。应加强对H7N9病毒的监测,进一步了解该病毒的来源、传播以及可能造成的威胁。     

2005-2010年北京地区儿童原发性EBV感染流行株EBNA1与LMP1基因特征分析

目的 分析2005-2010年北京地区儿童原发性EBV感染流行株EBNA1与LMP1基因特征,为研究EBV变异株与疾病临床表型间是否存在相关性提供背景资料.方法 应用PCR方法扩增EBV的EBNA3C、EBNA1和LMP1基因片段,测序后应用BioEdit 7.0.9和Mega 4.0.2软件进行序列分析.结果 62例进行了EBV分型,以EBV-Ⅰ型为主,检出率为98％.62例EBNA1基因扩增阳性,其中V-val亚型(均是Vvv1变异株)为98％.50例LMP1基因羧基段扩增阳性,以China 1为主,其检出率为90％.Vvv1变异株和China 1变异株在EBV-IM与EBV-HLH中的检出率差异均无统计学意义(P=1.00).40例进行了多基因连锁分析,其中EBV-Ⅰ型、EBNA1-Vvv1变异株和LMP1-China 1变异株高度连锁,其连锁检出率为90％.35例患儿LMP1基因全长扩增阳性,CG1-CG4的检出率分别为85％、6％、6％和3％.结论 北京地区儿童原发性EBV感染疾病中,EBV亚型以EBV-Ⅰ型为主,Vvv1变异株和China 1变异株分别是EBNA1和LMP1变异株中的优势变异株,且二者高度连锁.儿童原发性EBV感染流行株可以分为CG1-4组,其中以CG1为主.     

EB病毒亚型/变异株及其与疾病关系的研究进展

Epstein-Barr病毒(Epsteir-Barr virus,EBV)属于疱疹病毒科γ亚科,与鼻咽癌、地方性伯基特淋巴瘤和霍奇金淋巴瘤等相关,是重要的肿瘤相关病毒.EBV基因组中存在多个多态性区域,根据这些区域中氨基酸的变异,可将EBV分为不同的亚型/变异株.目前,关于不同EBV亚型/变异株与疾病间是否相关尚无定...     

婴幼儿呼吸道合胞病毒和人鼻病毒急性下呼吸道感染临床特征及随访研究

目的：比较婴幼儿呼吸道合胞病毒（RSV）和人鼻病毒（HRV）急性下呼吸道感染的临床特征,探讨婴幼儿期RSV急性下呼吸道感染患儿后期哮喘和反复喘息的发生与HRV感染患儿是否存在差异。方法采用 RT-PCR 或 PCR 方法检测住院患儿咽拭子或鼻咽吸取物中常见的呼吸道感染病毒,选取单一RSV和HRV感染病例,回顾性比较两组患者的临床特征并进行随访。结果 RSV感染组纳入病例80例, HRV感染组纳入32例。两组患儿的临床特征相似,但RSV感染组患儿年龄偏小（P＝0.004）,有喘息表现者明显多于 HRV 感染组（P＝0.000）。在与哮喘和反复喘息发生的关系上,两组间的差异无统计学意义（P值均为1.000）。结论婴幼儿RSV和HRV急性下呼吸道感染的临床特征相似,但在平均年龄、临床喘息的发生率等方面存在统计学差异。未发现婴幼儿期 RSV 感染患儿后期哮喘和反复喘息的发生与HRV感染患儿间存在差异。