三七总皂苷通过Notch3/Hes-1/p27Kip1信号通路抑制低氧性肺动脉高压大鼠肺血管重构

目的：探讨Notch3/Hes-1/p27^Kip1信号通路与低氧性肺动脉高压大鼠肺血管重构的关系及三七总皂苷(PNS)的干预作用。方法：将SPF级雄性SD大鼠采用随机编号分为3组：正常组(C组),低氧组(H组)和PNS组(P组),检测肺动脉压,称量右心室重量,HE染色和Masson染色观察肺血管重构情况,RT-qPCR检测大鼠肺组织中Notch3、Hes-1和p27^Kip1的mRNA表达水平,Western blot检测大鼠肺组织中Notch3、Hes-1、p27^Kip1,增殖细胞核抗原(PCNA)和caspase-3的蛋白水平。结果：与C组相比,H组大鼠的肺动脉压和右心室肥厚指数明显增加;肺血管重构现象明显;Notch3、Hes-1和PCNA的蛋白水平增加,p27^Kip1和caspase-3的蛋白水平降低;Notch3和Hes-1的mRNA表达增加,p27^Kip1的mRNA表达降低(P<0.05)。经PNS干预后,与H组相比,P组大鼠的肺动脉压和右心室肥厚指数降低;肺血...     

三七总皂苷调控SIRT1/FOXO3a/p27通路抑制大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖

目的 探讨三七总皂苷(PNS)通过SIRT1/FOXO3a/p27通路抑制大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的作用。方法 首先将PASMCs随机分为正常(Control)组和三七总皂苷(PNS)组、野百合碱(MCT)组和野百合碱+三七总皂苷(MCT+PNS)组,CCK8检测PNS对正常细胞的安全浓度,进一步检测PNS抑制增殖的最适浓度;为研究作用机制将PASMCs分为Control组、溶剂(DMSO组)组、MCT组、MCT+PNS组、MCT+PNS+SIRT1抑制剂(MCT+PNS+EX-527)组。造模结束,Edu检测细胞增殖;免疫荧光检测SIRT1、FOXO3a表达;qPCR检测细胞SIRT1、FOXO3a、p27、PCNA的表达。结果 CCK8显示：0～400 mg·L^-1的PNS对正常细胞无毒(P>0.05),100 mg·L^-1的PNS可显著抑制MCT诱导的细胞增殖(P<0.01);Edu显示：MCT组较Control组增殖增多;MCT+PNS组较MCT组增殖减少;MCT+PNS+EX-527组较MCT+PNS组增...     

类视黄醇X受体对缺氧/复氧诱导的大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞氧化应激反应的调控作用

目的：探讨类视黄醇X受体（RXR）在缺氧/复氧（HR）诱导的大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞（AECⅡ）氧化应激反应中的调控作用。方法：随机将细胞实验分成5组：对照（C）组、HR组、HR+溶剂二甲基亚砜（DMSO）组（HD组）、HR+RXR激动剂9-顺式维甲酸（9-RA）组（RA组）和HR+RXR抑制剂HX531组（HX组）。采用CCK-8法检测各组细胞活力;免疫荧光法进行AECⅡ特异性指标表面活性物质蛋白A(SP-A)的鉴定和RXRα表达的观察;试剂盒检测细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量;透射电镜观察细胞内超微结构的变化;Western blot检测核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白水平;RT-PCR检测Nrf2的mRNA表达水平。结果：与C组相比,HR、HD、RA和HX组细胞活力均显著降低（P<0.05）,SOD活性显著下降（P<0.05）,MDA含量显著增高（P<0.05）,Nrf2的mRNA和蛋白表达水平显著降低（P<0.05或P<0.01）,RXRα的免疫荧光表达显著增加（P<0.01）;与HR和HX组相比,RA组细胞活力增加...     

缺血预处理通过抑制铁死亡减轻大鼠肺缺血-再灌注损伤

目的：探讨铁死亡是否参与大鼠肺缺血-再灌注损伤（LIRI）,以及缺血预处理（I-pre-C）是否通过抑制铁死亡而减轻LIRI。方法：将SPF级雄性SD大鼠随机分成4组：对照组（control组）,缺血-再灌注（IR）30 min组（IR组）、铁死亡抑制剂去铁胺（DFO）组（IR+DFO组）和I-pre-C组,进行指标检测及肺脏病理观察。使用光镜、电镜和二氢乙啶（DHE）染色等评估大鼠肺组织的损伤程度;Western blot等方法检测缺血-再灌注肺组织铁死亡的相关指标。结果：与control组相比,IR组肺组织的活性氧（ROS）水平升高,丙二醛（MDA）和Fe水平升高,谷胱甘肽（GSH）水平下降,铁死亡相关蛋白酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)和转铁蛋白受体1(TFR1)水平升高,铁蛋白重链1(FTH1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和溶质载体家族7成员11(SLC7A11)下降（P<0.01）;与IR组相比,IR+DFO组肺组织的ROS水平显著下降,铁死亡的线粒体形态有所改善,MDA水平下降,GSH水平上升（P<0.01）;与IR组相比,I-pre-C明显改...     

缺血后处理通过抑制细胞焦亡减轻大鼠肺缺血/再灌注引发的肝损伤

目的：探讨细胞焦亡在大鼠肺缺血/再灌注（I/R）引发的肝脏损伤中的作用及缺血后处理（I-post-C对其干预的保护机制。方法：将32只SPF级SD雄性大鼠随机分为对照（control）组、I/R组、I/R+I-post-C组及I/R+INF39（细胞焦亡抑制剂）组,每组8只。普通光镜下观察肝脏组织形态;用相关化学试剂盒测定丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）和caspase-1活性;采用ELISA的方法检测血清中白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18水平;使用Western blot及免疫荧光法检测肝组织细胞焦亡相关蛋白的表达情况。结果：与control组相比,I/R组肝小叶结构紊乱,部分肝细胞出现水肿、空泡样变性和坏死,炎症细胞浸润,血清ALT和AST水平显著升高（P<0.01）;细胞焦亡相关指标核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(caspase-1)和gasdermin D N端片段（GSDMD-N）蛋白表达增加（P<0.05）;NLRP3的免疫荧光表达显著增强（P<0.01）;caspase-1活性显著上升（P<0...