梯度平衡法改善猪卵巢组织玻璃化保存效果

目的研究梯度平衡法对卵巢组织玻璃化冷冻后组织形态学及凋亡的影响。方法取新鲜猪卵巢切成小块,未进行任何处理的为对照组、采用梯度平衡法冷冻的为梯度平衡组、采用直接平衡法冷冻的为直接平衡组。HE染色观察3组组织形态,原位末端转移酶标记(TUNEL)技术检测细胞凋亡情况。结果与对照组相比,梯度平衡组和直接平衡组卵泡的正常率均下降(均P<0.05),但后两组比较无显著差异(P>0.05)。与对照组相比,梯度平衡组与直接平衡组的细胞凋亡率均显著增加(P<0.05),但梯度平衡组相对于直接平衡组,卵母细胞、颗粒细胞、基质细胞凋亡率(分别为14.8%vs.17.6%、13.8%vs.15.2%和15.7%vs.18.5%)均显著降低(P<0.05)。结论梯度平衡法可以减少玻璃化冻融卵巢组织过程中的细胞凋亡。     

人卵母细胞辅助激活研究进展

卵胞质内精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)是目前治疗男性不育最有效的方法,但在ICSI周期中仍然有1%~3%的受精失败发生。近年来逐渐发展起来的卵母细胞辅助激活(assisted oocyte activation,AOA)技术在改善ICSI后受精失败患者的妊娠结局方面取得了较为明显的效果,有望成为治疗男性不育的重要辅助手段。本文综述了卵母细胞激活机制领域的研究成果,揭示了精子中的PLCξ蛋白引起卵母细胞内Ca2+震荡进而触发激活的机制,介绍了目前对ICSI受精失败患者精子激活能力的检测与诊断方法,以及不同卵母细胞辅助激活技术如电激活,Ca2+载体和Sr Cl2等激活技术的研究现状,并总结了这些技术在安全性方面所获得的证据,在此基础上对AOA技术今后的发展方向和前景作了探讨。     

NIMA相关蛋白激酶7、Nod样受体蛋白3与多囊卵巢综合征炎症指标相关性研究

目的探讨卵巢颗粒细胞中NIMA相关蛋白激酶7(NEK7)和Nod样受体蛋白3(NLRP3) mRNA表达量与多囊卵巢综合征(PCOS)患者炎症指标的相关性及其预测价值。方法选取2018年8月至2019年3月来山西省儿童医院/山西省妇幼保健院生殖中心就诊的30例PCOS患者为研究组和同期由于男方因素或输卵管因素就诊的34例非PCOS不孕症患者为对照组。取卵日收集行IVF/ICSI-ET患者的卵泡液和颗粒细胞,检测卵泡液中炎症因子白介素(IL)-1β、IL-18的表达以及颗粒细胞中NEK7、NLRP3 mRNA的表达,并将NEK7、NLRP3的mRNA表达量与各指标进行相关性分析。最后应用受试者工作特征曲线(ROC)分析NEK7、NLRP3 mRNA对PCOS的预测价值。结果研究组体重指数(BMI)和获卵数显著高于对照组,且LH、LH/FSH、睾酮(T)水平亦显著高于对照组(P均<0.05)。研究组卵泡液中炎症因子IL-1β、IL-18的表达显著高于对照组,卵巢颗粒细胞中NEK7、NLRP3 mRNA的表达亦显著高于对照组(P均<0.05)。相关性分析结果显示,研究组患者卵巢颗粒细胞中NEK7和NLRP3 mRNA水平与血清基础LH、LH/FSH、炎症因子IL-1β、IL-18均呈显著正相关(P均<0.05)。ROC分析结果显示,NEK7是PCOS的有效预测因子,预测炎症的曲线下面积为0.741,临界值为1.154。结论 NEK7、NLRP3可能通过促进IL-1β、IL-18的释放影响PCOS炎症的发生及发展,且NEK7是PCOS的有效预测因子,可能为PCOS的临床治疗提供新思路。     

长方案促性腺激素启动时间对体外授精-胚胎移植结局的影响

黄体期长方案是体外授精-胚胎移植(in vitro fertility and embryo transfer,IVF-ET)的首选方案.其优势在于: 降低黄体生成素(LH)峰提前发生率; 降低周期取消率; 更为精确地调控卵泡发育; 便于患者的取卵安排.然而该方案在临床应用中还有不完善的地方,为了寻求更为完善的方法,生殖同仁们尝试着不同的改良方法,从长针长方案,到短针长方案,从月经来潮第3天统一启动促性腺激素(Gn),到现在根据卵泡大小酌情开始运用Gn,目的就是为了在提高妊娠率的同时尽可能降低患者的用药时间,用药总量及花费.     

体外受精-胚胎移植126例临床分析

体外授精-胚胎移植(IVF-ET)最近发展起来的一项辅助生育技术,我院从2005年4月开展此项工作,到2006年4月共进行了133个周期,现将结果总结如下。1资料与方法1·1临床资料:自愿进行IVF-ET的133对不孕症夫妇,女方年龄24~43岁,平均(31±34)岁,不孕年限(5±3)年。其中原发不孕76例,继     

卵母细胞激活技术在辅助生殖技术中的临床应用

目的观察辅助激活技术对辅助生殖技术中受精低下或失败患者成熟卵母细胞的激活效果及其胚胎发育情况。方法回顾性分析2014年10月至2016年10月在山西省儿童医院妇幼保健院生殖医学中心助孕治疗、至少有1次ICSI受精失败或受精低下(受精率30%),再次行ICSI助孕时采用成熟卵母细胞激活处理的12名患者资料。12名患者共收集105枚成熟卵母细胞,全部采用钙离子载体A23187联合6-甲基氨基嘌呤(6-DMAP)进行激活处理,观察卵母细胞激活后的原核形成及胚胎发育情况。结果激活周期的受精率及卵裂率分别为63.81%(67/105)和88.06%(59/67),较既往周期的受精率[23.96%(23/96)]和卵裂率[69.57%(16/23)]均显著升高(P0.05);激活周期中可移植胚胎及优质胚胎数量较既往周期均显著提高,分别为(3.02±2.51)vs.(1.41±0.58)枚和(1.70±1.36)vs.(0.31±0.52)枚(P0.05);既往ICSI受精低下或失败的12例患者中,卵母细胞激活处理后5例患者获得临床妊娠。结论辅助激活技术可以改善ICSI受精失败或受精低下患者的受精率及胚胎发育质量。     

神经管畸形的分子遗传学研究

神经管畸形(neural tube defects, NTDs)是一种由于在胚胎发育的第26-28d神经管未闭合而造成的头部至脊柱部位从无脑到轻度脊柱裂不同程度的畸形.包括无脑、露脑、小头畸形、大头畸形、脑积水、脑脊膜膨出、颅脊柱裂和脊柱裂.是常见的先天畸形之一,在出生缺陷性疾病中仅次于先天性心脏病居第二位,在世界各地均有发生,我国是神经管畸形的高发区,发病率约为2.74‰[1] ,其后果极其严重,是自然流产、死胎、死产及围产儿死亡的最主要的原因.一般认为NTDs是由环境因素和遗传因素共同作用造成的.其中认为同型半胱氨酸的代谢同神经管畸形的关系最为密切[2].     

多囊卵巢综合征大鼠雄激素、胰岛素抵抗及瘦素的关系

目的 研究多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠雄激素、胰岛素抵抗及瘦素之间的相互关系.方法 应用脱氢表雄酮(DHEA)注射法诱导23日龄雌性SD大鼠,建立PCOS动物模型.实验分PCOS组及对照组,每组各15只.采用放射免疫法测定大鼠血清胰岛素(INS)、瘦素(leptin)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、孕酮(P)水平;采用葡萄糖氧化酶法测定血清血糖(GS)水平.结果 两组间雄激素水平存在显著性差异(P＜0.05),胰岛素释放试验及葡萄糖耐量试验两组间各时点也均存在显著性差异(P＜0.01),PCOS组雄激素与空腹胰岛素之间呈高度正相关(r=0.889).PCOS组瘦素与空腹胰岛素、空腹血糖呈高度正相关(r分别为0.945,0.875).结论 PCOS的形成和发展主要与高雄激素血症及胰岛素抵抗相关,而PCOS大鼠血清瘦素水平的升高仅为PCOS大鼠肥胖后的一种伴随现象,瘦素可能通过胰岛素抵抗作用来调节生殖功能.     

体外操作对人卵母细胞线粒体膜电位影响的研究

目的 比较体外不同操作对人卵母细胞线粒体膜电位的影响。方法 利用JC-1试剂盒检测人卵母细胞在体外成熟培养、玻璃化冷冻解冻、卵胞质内单精子注射(ICSI)前后的线粒体膜电位变化,从而得出体外不同操作对线粒体膜电位的影响及卵母细胞质量与线粒体膜电位的关系。结果 卵母细胞在体外正常培养成熟、成熟卵母细胞玻璃化冷冻解冻及卵母细胞显微操作过程中线粒体膜电位均无统计学变化(P0.05)。体外成熟培养失败及单精子注射后受精失败的卵母细胞线粒体膜电位有明显下降(P0.05)。结论 体外常规操作对卵母细胞线粒体膜电位并无显著影响,但是线粒体膜电位与卵母细胞质量有密切关系,可以作为检验卵母细胞质量的一个重要指标。     

按不同肥胖标准诊断的肥胖多囊卵巢综合征患者内分泌和代谢特征的比较

目的:比较按不同肥胖标准诊断的肥胖多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者的内分泌和脂代谢情况,为PCOS患者的个性化诊治提供依据。方法:选择2012年1月—2013年1月诊治的98例PCOS患者,以体质量指数(BMI)≥24 kg/m2为肥胖标准,将PCOS患者分为肥胖A组(n=72)和非肥胖组A组(n=26);以腰臀比(WHR)≥0.8为肥胖标准,将PCOS患者分为肥胖B组(n=84)和非肥胖B组(n=14);以BMI≥24 kg/m2且WHR≥0.8为肥胖标准,将PCOS患者分为肥胖C组(n=64)和非肥胖C组(n=6,BMI24kg/m~2且WHR0.8)。记录各组PCOS患者的临床指标,并检测空腹血糖(FBS)、空腹胰岛素(FIN),测定基础性激素促卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)以及脂代谢相关指标甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)的水平。结果:肥胖A组的LH/FSH、FIN、HOMA-IR、TG显著高于非肥胖A组,并且肥胖A组月经初潮年龄提前(P0.05);肥胖B组FIN、HOMA-IR、TG、LDL-C显著高于非肥胖B组,但肥胖B组的HDL-C水平较低(P0.05);肥胖C组FIN、HOMA-IR显著高于非肥胖C组,且肥胖C组月经初潮年龄提前、HDL-C水平降低(P0.05)。多重线性相关性分析结果显示,WHR、BMI均与FBS相关。结论:按同肥胖标准诊断的肥胖PCOS患者的内分泌和脂代谢水平有差异,肥胖会加重患者的内分泌紊乱和脂代谢异常,从而增加远期并发症的风险。