miR-29c真核表达载体构建及鉴定

目的构建pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-29c真核表达载体,为进一步研究miR-29c的功能和靶基因鉴定奠定基础。方法根据miR-29c成熟体序列设计合成1对miRNA寡聚单链DNA,经退火后克隆到真核表达载体pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR中,瞬时转染肺腺癌A549细胞后,经实时荧光定量PCR检测pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-29c在肺癌细胞中表达miR-29c。结果 A549转染pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-29c 24 h后,miR-29c表达量上升,明显高于阴性对照,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建真核表达载体pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-29c,并能有效表达miR-29c。     

血液的非牛顿性及其粘滞性的正确测量

粘 滞性是血液的基本生物物理性质之一 ,它的生理意义和病理意义已日益为临床工作者所认识和熟悉。它的变化机制 ,特别是微观机制研究仍然是许多研究者关注的领域。正如下面要讲到的 ,血液是非牛顿流体 ,能正确描述血液粘滞性的量应当是“表现粘度” ,如何能正确方便地检测到血液的表观粘度 ,成为众多临床工作者和研究者关注的问题。1　血液是非牛顿流体为了说明什么是非牛顿流体 ,让我们先简单说明什么是牛顿流体 ,而要明白什么是牛顿流体 ,先应认识切应力和切变率这二个重要的力学量。血液在血管中的流动 ,把它看作在圆截面管中的层流是一…     

蝙蝠呼肠孤病毒感染BHK-21和Vero-E6细胞形态发生的比较观察

目的通过对蝙蝠呼肠孤病毒在BHK-21和Vero-E6细胞形态发生的比较研究,筛选出该病毒的最佳宿主细胞。方法将感染呼肠孤病毒XJV株的BHK-21和Vero-E6细胞用戊二醛、锇酸固定,制成超薄切片,用透射电镜观察。同时测定病毒滴度。结果XJV在2种细胞中的适应程度不同,XJV更适于在BHK-21细胞中增殖。XJV在2种细胞中的形态发生不同,在BHK-21细胞中形成的包涵体呈典型的晶格状排列,在Vero-E6细胞中形成的包涵体呈杂乱的球状。XJV用BHK-21和Vero-E6细胞育传5代,病毒滴度分别为105.5TCID50/ml和104.5TCID50/ml。结论BHK-21细胞是蝙蝠呼肠孤病毒XJV株的最佳宿主细胞。     

海藻酸钙水凝胶微球悬浮液与全血的流变学性质比较

本文从红细胞形态以及红细胞压积(Hct约为45vol%)的角度出发,制备一种微球悬浮液来模拟全血的非牛顿流体性质,探索其在血液黏度质控物中的应用价值。我们采用乳液聚合法制备海藻酸钙水凝胶微球,并将其悬浮于0.9wt%的氯化钠溶液中,得到微球压积为45vol%的悬浮液样品。然后使用两种不同原理的黏度仪检测分析样品在不同切变率下的黏度变化。经显微镜观察,海藻酸钙水凝胶微球形态完整,直径近似服从正态分布,约90%的微球直径分布在6～22μm之间。用FASCO-3010型和LG-R-80c型血液黏度仪对同一样品进行检测,均显示出剪切稀化的性质。对样品进行连续5周的稳定性实验,两种仪器测得的对应样品黏度值变异系数分别为7.3%～13.8%和8.9%～14.2%。尽管样品在同一切变率下对应的结果之间存在一定差异,但不同切变率下结果的总体变化趋势是一致的,具备普遍适用于不同原理血液黏度仪校准的潜力。     

L型表观粘度快速测定仪的理论和设计

本文从理论上区分了两种不同的表观粘度的概念,阐明开发一类新的表观粘度仪的必要,提出了一种新的测定表观粘度的方法,并给出其主体、硬件和软件设计要点。     

H5N1亚型HPAIV人工感染家猫和小鼠的初步研究

WHO已经确认,H5N1亚型高致病性禽流感病毒HPAIV已经跨越种间屏障,可以使人类感染发病甚至死亡。为给人类该病毒感染建立动物模型,本研究应用经SPF鸡胚增殖的虎源HPAIVA/Tiger/Harbin/01/2003(H5N1)株,其对MDCK细胞的TCID50为10-7·36/0·1ml。分别经气管和鼻腔接种家猫和小鼠,进行该病毒的家猫和小鼠的初步人工感染实验。实验于BSLⅢ动物实验室中进行,观察期为21天。实验结果如下:1、家猫人工感染实验:选取对该病毒HI抗体小于1∶2的3月龄健康家猫6只,随机分为A、B两组,每组3只。A组为实验组,每猫气管内注射该病毒的稀释液1m…     

宫颈上皮内瘤变和宫颈癌患者的阴道微生态特点

  目的  研究宫颈上皮内瘤变和宫颈癌患者阴道微生态特点，为宫颈疾病预防和治疗提供参考。  方法  选取昆明医科大学第三附属医院（云南省肿瘤医院）2018年7月至2018年10月病理诊断为宫颈上皮内瘤变患者（n = 65）、宫颈癌患者（n = 51）和同期体检健康女性（n = 88）为研究对象，收集阴道拭子，通过显微镜镜检进行微生态评价。  结果  与健康组相比，宫颈上皮内瘤变组在菌群密集度构成上，差异有统计学意义（P < 0.05），在菌群多样性、优势菌、pH、Nugent评分构成上，差异无统计学意义（P > 0.05）。宫颈癌组与健康组在菌群密集度、优势菌、pH、Nugent评分构成上，差异均有统计学意义（P < 0.05），在菌群多样性构成上，差异无统计学意义（P > 0.05）。  结论  宫颈上皮内瘤变和宫颈癌患者阴道微生态失调，以宫颈癌失调最为显著。尽早发现阴道微生态失调，恢复阴道微生态平衡，有利于防治宫颈癌。     

基于病毒宿主相互作用的抗流感病毒宿主靶标的研究进展

流感病毒是严重危害人类健康与生命的主要病毒之一。流感病毒感染致病涉及到病毒与机体二者之间的相互作用，其复制和致病都需要宿主细胞因素的参与。病毒与宿主相互作用研究可为病毒性疾病的预防和治疗提供理论依据，有助于发现来源于宿主系统的抗流感病毒药物靶标。基于病毒与宿主相互作用，本文就流感病毒感染过程各环节中宿主细胞潜在药物靶标的研究进展做一综述。     

基于病毒宿主相互作用的抗流感病毒宿主靶标的研究进展

流感病毒是严重危害人类健康与生命的主要病毒之一。流感病毒感染致病涉及到病毒与机体二者之间的相互作用,其复制和致病都需要宿主细胞因素的参与。病毒与宿主相互作用研究可为病毒性疾病的预防和治疗提供理论依据,有助于发现来源于宿主系统的抗流感病毒药物靶标。基于病毒与宿主相互作用,本文就流感病毒感染过程各环节中宿主细胞潜在药物靶标的研究进展做一综述。     

酵母双杂交筛选与人巨细胞病毒US28相互作用的蛋白

目的利用酵母双杂交技术筛选与人巨细胞病毒US28蛋白相互作用的宿主蛋白,可为研究US28蛋白的作用机制提供依据。方法构建p GBKT7-US28诱饵重组载体,检测其在酵母细胞中的表达和自激活作用,然后利用酵母双杂交系统筛选人脑文库中与US28相互作用的蛋白质。对获得的阳性克隆进行PCR鉴定、测序及序列比对分析,并通过酵母共转化实验再次确认蛋白的相互作用。结果 p GBKT7-US28在酵母中成功表达US28融合蛋白;酵母双杂交筛选并验证,获得了5个与US28蛋白相互作用的宿主蛋白。结论初步鉴定得到5个与US28相互作用的细胞蛋白,为探索US28蛋白的新功能以及揭示巨细胞病毒的致病机理和疾病治疗奠定基础。