烟曲霉感染时NADPH氧化酶通过诱导活性氧活化巨噬细胞自噬

目的研究NADPH氧化酶(NOX)参与烟曲霉孢子诱导巨噬细胞自噬及其作用机制。方法取对数生长期的RAW264.7细胞,随机分为3组:以烟曲霉孢子刺激的处理组、烟曲霉孢子联合NOX抑制剂氯化二亚苯基碘鎓(DPI)的处理组和无处理的空白组。细胞作用2 h后荧光显微镜观察细胞内二氯荧光黄亮度以检测活性氧(ROS)水平,免疫印迹法检测微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达量,免疫荧光技术观察LC3的表达与定位。结果烟曲霉孢子刺激后RAW264.7细胞的ROS与LC3BⅡ表达水平显著升高,同时LC3呈斑点状聚集并与烟曲霉孢子共定位;以DPI抑制后ROS与LC3 BⅡ表达量与空白组相比无明显变化,并且LC3在细胞内弥散分布。结论烟曲霉感染时NOX通过产生ROS活化巨噬细胞自噬。     

pET28a-Streptag I-SbpA-Ag85B重组质粒的表达与鉴定

目的 应用分子克隆技术获得纳米级Ag85B蛋白并对其进行鉴定和免疫学特性检测.方法 利用S-layer/Streptag I这一具有自我组装能力的纳米模式嵌合结核杆菌分泌的Ag85B蛋白基因,将其克隆到原核表达载体pET28a（＋）中,并在大肠杆菌中表达Ag85B蛋白,表达后的蛋白经SDS-PAGE和Western blotting鉴定.结果 原核表达重组质粒pET28a-Streptag I-SbpA-Ag85B成功构建,并可在大肠杆菌中诱导表达,得到的Streptag I-Sbpa-Ag85B蛋白经SDS-PAGE和Western blotting鉴定正确,重组蛋白能被结核患者血清识别.结论 重组后的Ag85B蛋白具有较强的免疫反应性.所建立的原核表达体系为新型结核疫苗研制提供了一个新的思路.     

普外科手术切口感染的相关因素分析

目的 探讨引起普外科手术切口感染的相关因素,并分析相应的干预措施.方法 收集普外科住院并行手术治疗患者679例,根据手术切口感染的诊断标准评价患者是否发生手术切口感染,收集这类患者的一般资料和临床资料,并对其资料进行统计分析.结果 入选679例患者中,共发生手术切口感染23例,发生率为3.39%;其中发生手术切口感染常见的手术包括：乳腺肿物手术（6.41%）、胆道手术（2.30%）、肠道手术（7.23%）、阑尾手术（7.54%）、剖腹探查手术（5.12%）、其他（5.05%）;年龄、手术性质、手术时间、围手术期抗生素使用情况、住院时间、切口类型均与患者发生手术切口感染存在一定的相关性（χ^2=4.624,32.643,17.628,12.657,11.623,14.629,均P＜0.05或P＜0.01）.结论 缩短手术时间、合理使用抗生素对于减少患者术后出现切口感染具有显著的临床意义.     

pCMV-LC3-Ag85B重组质粒DNA疫苗对结核的免疫保护作用

目的构建结核分枝杆菌Ag85B抗原基因与微管相关蛋白轻链3(LC3)基因融合的DNA疫苗,探究其抗结核分枝杆菌保护效应。方法构建pCMV-LC3-Ag85B重组质粒并转染RAW264.7细胞,Western blot法检测目的蛋白的表达水平。分别以pCMV、pCMV-Ag85B、pCMV-LC3-Ag85B质粒免疫BALB/c小鼠。末次免疫2周后,Ag85B刺激下培养各组小鼠脾脏淋巴细胞,ELISA检测IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10分泌水平。末次免疫3个月后,用H37Rv标准株尾静脉注射感染小鼠,计数肺和脾脏结核分枝杆菌载量。结果 pCMV-LC3-Ag85B在RAW264.7细胞的表达水平与质粒浓度呈剂量依赖性。与pCMV-Ag85B免疫组相比,pCMV-LC3-Ag85B免疫组的IL-2、IFN-γ分泌显著增加,而肺和脾脏内结核分枝杆菌载量降低。结论 pCMV-LC3-Ag85B可显著增强Th1型免疫应答,并显示较好的抗结核分枝杆菌免疫保护效应。     

罗伯逊易位型21三体永生淋巴细胞株的建立

目的建立并鉴定13／21易位与21／21罗伯逊易位21三体永生淋巴细胞株,为21三体罗伯逊易位的遗传学研究提供实验材料。方法筛查获得易位型21三体患者并收集外周血,培养B95-8细胞制备EB病毒感染液,采用EB病毒转化法获得永生淋巴细胞株,对第10、15、20代细胞进行G显带染色体分析。结果筛检出1例罕见的13／21易位与4例121／21罗伯逊易位型21三体患儿并成功建立永生淋巴细胞株,传代至第10、15、20代细胞的核型无显著差异。结论明病毒转化法可用于易位型21三体永生淋巴细胞株的建立,早期转化的细胞可为该病的研究提供实验基础。     

TACE联合毒痰瘀脾虚方治疗原发性肝癌患者临床疗效研究

目的 探讨采用肝动脉化疗栓塞术(TACE)联合毒痰瘀脾虚方治疗原发性肝癌(PLC)患者的近期疗效,以及对血清血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)和凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)水平的影响。方法 2020年6月～2022年1月我院收治的68例PLC患者被随机分为对照组34例和观察组34例,分别给予以顺铂、表阿霉素和氟尿嘧啶为主的TACE治疗,观察组在对照组治疗的基础上联合毒痰瘀脾虚方辅助治疗12周。使用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞亚群,采用COBAS E601电化学发光分析仪检测血清甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、CA19-9和CA125,采用 ELISA 法检测血清VEGF、b-FGF和TSP-1水平。结果 在治疗后3个月末,观察组部分缓解、疾病稳定和疾病进展发生率分别为14.7%、61.7%和23.5%,与对照组的11.7%、52.9%和35.2%比,无显著性差异(P＞0.05);观察组外周血CD3⁺、CD4⁺、NK细胞百分比和CD4⁺/ CD8⁺细胞比值分别为(66.1±5.4)%、(39.8±4.2)%、(14.7±2.8)%和(1.5±0.2),与对照组【分别为(60.2±5.3)%、(35.5±3.4)%、(10.2±2.4)%和(1.4±0.2)】比,无显著性差异(P＞0.05);观察组血清AFP、CEA、CA19-9和CA125水平分别为(284.7±29.4)μg/L、(13.2±3.4)ng/mL、(36.1±10.7)U/mL和(26.4±13.7)U/mL,显著低于对照组【分别为(334.4±27.6)μg/L、(17.7±3.4)ng/mL、(44.6±11.2)U/mL和(35.8±14.4)U/mL,P<0.05】;观察组肝功能指标改善也显著优于对照组(P<0.05);观察组血清VEGF、b-FGF和TSP-1水平分别为(126.3±52.1)pg/mL、(32.1±8.3)pg/mL和(68.3±31.2)μg/mL,均显著低于对照组【分别为(194.3±62.2)pg/mL、(44.7±9.5)pg/mL和(91.9±32.4)μg/mL,P＜0.05】。结论 加用毒痰瘀脾虚方辅助TACE治疗PLC患者近期疗效不明显,但可能有助于改善肝功能和肿瘤指标,并可能通过调节血管生成因子水平而抑制肿瘤进展。     

血清学检测在21，18-三体综合征筛查中的应用价值

目的探讨了孕中期孕妇外周血中甲胎蛋白（AFP）、游离β人绒毛膜促性腺激素（free—β—HCG）和游离雌三醇（uE3）联合检测在21,18-三体综合征临床诊断中的价值。方法采用时间分辨免疫荧光分析法（DELFIA）对我院10624例15～20周孕妇血清中AFP,free—β—HCG和uE3的水平进行检测,并根据孕妇的年龄、孕周、体质量、胎数等因素采用配套软件对胎儿21-三体综合征（DS）和18-三体综合征（ES）进行风险评估,并对高危产妇行羊膜腔穿刺羊水细胞培养或脐血管穿刺脐血细胞培养染色体分析。结果10624例孕妇中,DS风险率高于临界值者513例,阳性率为4．83％,阳性者行染色体核型分析确诊6例;DS风险率低于临界值者胎儿分娩后检出2例,假阳性率为14．28％。ES风险率高于临界值者89例,阳性率0．84％,染色体分析确诊2例;ES风险率低于临界值者分娩后未检出ES患儿。结论血清学指标可有效预测胎儿三体综合征,是临床预防和降低先天性染色体异常疾病的主要手段。     

自然戒断期成瘾药物依赖者CD4^+CD25^+CD127^(low)调节性T细胞的变化特征及意义北大核心CSCD

目的研究自然戒断期成瘾药物依赖者外周血CD4+CD25+CD127low调节性T细胞(Treg)及外周血单个核细胞(PBMC)中转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA表达水平的变化,探讨成瘾药物对成瘾药物依赖者体内Treg的影响。方法采集自然戒断6个月和18个月半的成瘾药物依赖者各40例及30例健康人的外周血,使用流式细胞仪检测Treg,用RT-PCR检测PBMC中TGF-β1 mRNA表达水平。结果与对照组比较,戒断18个月组Treg、TGF-β1 mRNA含量显著增高,而戒毒6个月组未发现显著性变化。结论成瘾药物对依赖者Treg的影响是长期性的,其介导的Treg异常,可能是引起成瘾药物依赖者免疫功能紊乱的原因之一。     

中药有效成分治疗脑出血的研究概况

在我国,脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)的发病率为每年60~80/10万,急性期病死率为30%~40%[1]。近年来,很多学者应用中药单药有效成分治疗脑出血取得了良好的效果,改善了ICH患者的预后。现将中药单药有效成分的实验研究进行综述。1β-七叶皂苷钠1.1概述β-七叶皂苷钠是从     

多重PCR快速鉴定19种致病真菌

摘要:目的：建立快速鉴定致病真菌的多重PCR体系。 方法：选取19种致病真菌的rDNA内部转录间隔区（ITS）序列设计引物,建立两个多重PCR体系,扩增临床与环境分离真菌菌株、人类细胞及9种常见细菌DNA,检测体系的特异性;以浓度梯度的DNA模板检测体系的灵敏度。 结果：对氟康唑天然耐药的克柔念珠菌、光滑念珠菌以及对两性霉素B耐药的土曲霉、镰刀菌、尖端赛多孢、根霉在该体系中可扩增出特异性条带,其他真菌可同时进行种属鉴定。74株被测真菌菌株的鉴定结果与常规鉴定的符合率为95.9%。两个多重PCR体系对人类基因组及9种常见细菌DNA的扩增结果均为阴性;扩增阳性的最低模板浓度均为10 fg/μL。 结论：建立的两个多重PCR体系可对致病真菌进行检测和种属鉴定。