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目的 克隆食管癌组织和癌旁组织中HPV11型主要衣壳蛋白L1基因,并比较两个序列间的同源性。方法 以食管癌组织和癌旁组织纯化的总DNA为模板,根据HPV11型L1基因的保守区分段设计引物。分两段扩增HPV L1基因,克隆入质粒载体中,pGEM-3Zf(-)以双脱氧法双向测定目的片段的序列,并按接出该片段的全序列,比较两个序列间的同源性,以及与已知基因序列的差异性。结果 从4例食管癌患者食管癌组织和癌旁组织中,分别克隆到1株HPV11型L1的编码序列M1和M2,两序列间的同源性极高,仅在个别位点存在差异。与GenBank中登录的HPV序列NC001525.1(HPV-11)、M14119.1(HPV-11)和AF217526.1(HPV-11)相比较大部分相同。结论 成功地构建了HPV11型L1基因上游片段pGEM-3Gf(-)和下游片段pGEM-3Zf(-)的重组克隆,为深入研究HPV的感染与食管癌发病机制的关系奠定了基础。 相似文献
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目的 克隆食管癌组织和癌旁组织中 HPV11型主要壳蛋白 L 1基因 ,并比较两个序列间的同源性 .方法 以食管癌组织和癌旁组织纯化的总 DNA为模板 ,根据 HPV11型 L1基因的保守区分段设计引物 .分两段扩增 HPV L1基因 ,克隆入质粒载体中 ,p GEM- 3Zf(- )以双脱氧法双向测定目的片段的序列 ,并拼接出该片段的全序列 ,比较两个序列间的同源性 ,以及与已知基因序列的差异性 .结果 从 1例食管癌患者食管癌组织和癌旁组织中 ,分别克隆到 1株 HPV11型 L 1的编码序列 M1和 M2 ,两序列间的同源性极高 ,仅在个别位点存在差异 .与 Gen Bank中… 相似文献
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