SARS-CoV S蛋白全长基因克隆及其表达的初步研究

目的:克隆表达SARS-CoVS蛋白,构建SARS全长基因疫苗。方法:从SARS病毒的总cDNA中以PCR方法扩增编码人SARS-CoVS1和S2蛋白的编码序列,再将二者分别克隆入真核表达载体pVAX1,构建重组表达载体。然后进一步将S1和S2连接到pVAX1中。酶切和测序鉴定阳性克隆。采用脂质体法转染VeroE6细胞,用Western检测S蛋白的表达。结果:PCR方法分别扩增出了1900bp和1800bp左右的基因片段,两片段插入pVAX1构建重组表达载体后,经序列测定证实该插入片段为SARS病毒S蛋白编码序列。将重组子转染VeroE6细胞,收集细胞总蛋白,Western检测获得特异蛋白带。结论:成功克隆并表达了SARS-CoVS蛋白,为其作为SARS基因疫苗研究打下基础。     

做好重大任务卫勤保障的体会

在重大军事演习及军事训练任务中,我们认真把握卫勤保障的重点、难点、风险点,坚持强化组织举力推动,面向一线跟进服务,突出质效狠抓落实,为圆满完成重大任务提供了有力保障。现就我们做好重大任务卫勤保障的体会报告如下。     

搞好部队官兵健康体检工作的主要做法

随着社会经济的发展和人们生活水平的不断提高,人们身体健康状况越来越受到关注。军队是一个特殊群体,更强调军人健康水平的保持和军事作业能力的提升,而健康体检不仅是了解和掌握部队官兵健康水平,及早发现、预防和治疗疾病,降低疾病发生率、     

FSHR胞外区基因片段的原核表达及多克隆抗体的制备

目的 构建人卵泡刺激素受体(follicle stimulating hormone receptor,FSHR)胞外区的原核表达载体,并用纯化的重组蛋白免疫小鼠,制备抗血清.方法 采用RT-PCR克隆人FSHR胞外区,将其克降到原核表达载体pET32a(+),并通过IPTG诱导目的 基因在大肠杆菌中表达,所获得的包涵体蛋白通过Ni-NAT离子交换柱层析纯化重组蛋白,并用SDS-PAGE和蛋白印迹法鉴定.结果 PCR扩增出1 047 bp目的 基因片段,测序证实克隆的基因序列与GenBank中的FSHR序列相符.工程菌pET32 a(+)/FSHR胞外区经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE显示有新生的蛋白表达条带,Mr约为58 000,与预期的一致.其表达形式为不溶性包涵体,此包涵体蛋白通过Ni-NAT离子交换柱层析纯化,纯化的蛋白质经SDS-PAGE分析可见单一条带.该蛋白免疫小鼠制备抗血清,抗体效价为1:12 800,Western blot检测证实该抗体能与目的 蛋白发生特异性结合.结论 获得了人FSHR胞外区融合蛋白及特异性多克隆抗体,为进一步研究FSHR蛋白的功能奠定了基础.     

过继细胞治疗在癌症临床治疗中的进展

目前有很多应用于癌症的靶向药物,这些药物对于大多数癌症患者来说,只能起到短期的缓解作用,长期疗效十分有限,还会产生很多毒副作用。然而,过继细胞治疗（adoptive celltherapy,ACT）在经过短期的治疗后,能够产生长期的疗效。这一点已经在恶性黑素瘤的治疗中得到了证实。目前,基于肿瘤浸润淋巴细胞（turnout infiltrating lymphocytes,TIL）的ACT疗效最为显著,TIL是由肿瘤组织中分离出的T细胞在体外进行激活扩增得到的。,但是在很多癌症中并不能分离得到TIL,因此,通过基因修饰来使外周血T细胞获得TAA特异性就显得尤为重要。本文就过继细胞治疗在癌症临床治疗中的进展综述如下。     

可食性转基因植物疫苗的免疫学特性研究

转基因植物疫苗是疫苗研究的一个新热点,本文综述了转基因植物疫苗在体诱导的免疫学特点,包括实验动物和人免疫应答情况,讨论了未来转基因植物疫苗研究重点及将面临的问题和解决对策,并对其应用前景提出展望.     

鼠源轮状病毒vp7基因的表达载体构建及转基因植物的研究

目的：构建表达鼠源轮状病毒抗原基因vp7的植物表达载体及植物转化研究。方法：抗原基因vp7经PCR扩增后直接克隆到PUC－T载体，双酶切目的片断和植物表达载体，以T4连接酶将目的片断与载体相连接，电转化方式将重组质粒转入农杆菌。结果：以重组农杆菌为介导将靶基因转入到马铃薯外植体。成功地将目的基因定向克隆到表达载体，并转入到农杆菌中；以农杆菌为介导获得抗性转基因马铃薯植株。结论：通过PCR检测，初步确定轮状病毒外壳蛋白基因vp7已成功地整合到马铃薯植株中。     

介绍一种自制捕鼠工具--桶式毒鼠房

我部在创建文明卫生军营活动中发现 ,以往由于鼠药直接投放在地表 ,易受风吹、雨淋等气象条件以及无意践踏等人为因素的影响 ,致使灭鼠效果不佳。为此 ,我们自行研制了一种桶式毒鼠房 ,它既可以防潮又可以防止人为破坏 ,提高了鼠药的利用率 ,可不断地毒杀老鼠 ,作用持久 ,效果满意。1　材料及制作　可根据实际需要选用直径分别为 80、10 0、12 0mm的镀锌钢管以及 3 0mm× 3 0mm三角铁。切一段 3 0 0mm长的镀锌钢管 ,作为毒鼠房主体 ,再切一段 5mm宽的镀锌钢管作为毒鼠房的提手 ,然后将其焊接起来 ,再将 3 0mm×3 0mm的三角铁切成 10 0mm长的…     

紧密结合部队实际扎实开展卫生防病工作

目的总结部队卫生防病工作经验,进一步做好工作,保护和促进官兵身体健康,巩固和增强部队战斗力,保障各项任务顺利完成。方法分析部队卫生防病工作的特点、现状和实际工作情况。结果总结出了开展卫生防病工作的7点做法:(1)确定工作思路,明确工作重点;(2)细化标准制度,制定配套措施;(3)多方筹集经费,解决部队急需;(4)加强防疫机构建设和防疫人员的培训,促进工作质量提高;(5)加强传染病预防管理和饮食卫生工作,防止传染病和食物中毒发生;(6)加大卫生监督力度,及时发现和纠正问题;(7)大处着眼小处着手,突出重点兼顾一般,防微杜渐防患于未然。结论总结的卫生防病工作的做法是切实可行的,成效显著。     

Eppin抗原的二级结构分析B细胞表位预测

目的 分析Eppin抗原的二级结构并预测其B细胞表位.方法 联合运用多种方法对Eppin的二级结构和表面特性,如亲水性、理化性质、可及性、免疫原性和可塑性等方面进行分析,预测其抗原表位.结果 Eppin存在多个潜在的抗原表位位点,可能的蛋白质抗原表位区域:14～23,30～44,48～54,56～68,78～85,97～106,109～116,125～132.体外实验证明,所预测抗原表位区域基本能与免疫抗血清发生抗原特异性反应.结论 应用多参数成功预测了Eppin抗原的B细胞表位.