Fractalkine 参与肾脏疾病发病机制研究进展

肾脏疾病作为全球性的临床和公共健康问题,近年来发病率呈持续增高趋势,早发现、早诊断、早治疗则是控制肾脏疾病发生发展的关键。趋化因子Fractalkine(FKN)通过趋化白细胞,黏附单个核细胞及介导免疫反应参与细胞分化、发育、增殖、凋亡,并与多种肾脏疾病的发病机制密切相关。本文就FKN参与狼疮性肾炎(LN)、糖尿病肾病(DN)、肾移植急性排斥反应、IgA肾病、肾脏纤维化、肾肿瘤疾病发病机制等方面作一综述。     

长链非编码RNA调控巨噬细胞功能的作用机制研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一类本身不编码蛋白、转录本长度超过200 bp的RNA。lncRNA最初被认为是RNA聚合酶Ⅱ转录的副产物,是一种“噪音”,不具有生物学功能。但近年研究证实,lncRNA参与X染色体沉默、染色体修饰和基因组修饰、转录激活、转录干扰、核内运输等过程,其调控作用被越来越多研究者关注。多个研究表明lncRNA在机体炎症反应过程中发挥重要作用。作为免疫细胞的巨噬细胞在机体免疫功能发挥和炎症反应过程中居主导地位,本文就lncRNA对巨噬细胞的调控作用及机制进行综述。     

Fractalkine 通过激活 Wnt/β-catenin 信号通路抑制脂多糖诱导的巨噬细胞M1型极化

目的 研究Fractalkine（CX3CL1,FKN）对脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7巨噬细胞免疫应答的作用机制。方法 体外培养RAW264.7细胞,使用慢病毒技术构建过表达FKN的稳定细胞珠。细胞分为8组：（1）空白对照组;（2）LPS组,细胞给予脂多糖（1 μg/mL,12 h）;（3）ICG-001组,细胞给与Wnt/β-catenin信号通路抑制剂ICG-001（10 μmol/mL,48 h）;（4）过表达FKN组;（5）ICG-001+LPS组,细胞给与ICG-001（10 μmol/mL预处理36 h）后,加入脂多糖（1 μg/mL,12 h）;（6）过表达FKN+LPS组,过表达 FKN细胞给与脂多糖（1 μg/mL,12 h）;（7）过表达FKN+ICG-001组,过表达FKN细胞给予ICG-001（10 μmol/mL,48 h）;（8）过表达 FKN+ICG-001+LPS 组,过表达 FKN 细胞给与 ICG-001（10 μmol/mL 预处理 36 h）后,加入脂多糖（1 μg/mL,12 h）;应用 CCK-8细胞增殖实验检测ICG-001作用于巨噬细胞中的安全浓度;应用酶联免疫吸附（ELISA）实验检测巨噬细胞上清液中M1型极化因子TNF-α和IL-6的含量;应用蛋白质免疫印记（WB）实验检测巨噬细胞中FKN、Wnt/β-catenin通路关键因子Wnt-4和β-catenin、M1型极化因子iNOS、TNF-α和IL-6的蛋白表达水平;应用免疫荧光（IF）实验检测巨噬细胞中M1型极化因子IL-6蛋白的定位。结果 过表达FKN的RAW264.7细胞中FKN的蛋白水平较空白对照组明显升高（P<0.01）。CCK-8实验显示ICG-001作用于RAW264.7细胞48 h的IC50为10 μmol/mL。与LPS组相比,ICG-001+LPS组上清液中TNF-α和IL-6的分泌量以及细胞内TNF-α、IL-6和iNOS蛋白含量均升高（P<0.05）,而细胞内FKN、Wnt-4和β-catenin蛋白含量均显著降低（P<0.01）;EXFKN+LPS组上清液中TNF-α和IL-6的分泌量以及细胞内TNF-α、IL-6和iNOS蛋白含量均显著降低（P<0.01）,而细胞内FKN、Wnt-4和β-catenin蛋白含量均显著升高（P<0.01）。与LPS组相比,ICG-001+LPS组中IL-6在细胞质中的定位增强,而EXFKN+LPS组中IL-6在细胞质中的定位受到抑制。结论 过表达FKN通过激活Wnt/β-catenin信号通路抑制脂多糖诱导的巨噬细胞M1型极化。     

抑制Smad7的表达对肾小管上皮细胞的影响

目的:本研究旨在观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导肾小管上皮细胞Smad7表达变化,以及对其凋亡及增殖的影响。方法:大鼠肾小管上皮细胞株NRK-52E分别与终浓度为0(对照组)、10-6mol/L、10-7mol/L、10-8mol/L、10-9mol/LAngⅡ共培养24h。通过AnnexinV-FITC/PIKit用流式细胞仪检测细胞凋亡指数,用免疫组化的方法检测增殖性细胞核抗原(PCNA)和Smad7蛋白的表达,RT-PCR检测Smad7mRNA的表达水平。结果:随着AngⅡ浓度的增加,10-6mol/LAngⅡ组与对照组相比凋亡指数显著增加,分别为(27.06±1.14)%vs(3.09±0.73)%(P<0.001)。与对照组相比,Smad7的表达在含有AngⅡ组中均呈现出低表达水平,并在一定范围内随AngⅡ浓度的增加而逐渐受到抑制,并与细胞凋亡指数成负相关(r=-0.82,P<0.05)。结论:AngⅡ可以抑制肾小管上皮细胞Smad7的表达,同时促进细胞凋亡,二者具有密切关系。     

双氢青蒿素对狼疮模型MRL/lpr小鼠肾皮质Fractalkine表达的调节作用研究

目的通过研究双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对狼疮模型MRL/lpr小鼠肾脏病变和肾皮质Fractalkine(FKN)、NF-κB表达的作用,并与泼尼松的作用进行比较,以探讨青蒿素治疗狼疮性肾炎的可能作用机制,试图明了双氢青蒿素对狼疮性肾炎FKN表达的调节作用。方法选取32只12周龄的雌性MRL/lpr小鼠,随机分为4组:DHA组,每天给予DHA灌胃;泼尼松组,每天给予泼尼松(prednisone,P)灌胃;DHA+泼尼松组,每天给予DHA和泼尼松灌胃;正常对照组,每天给予生理盐水灌胃;共8周。通过光镜观察肾组织病理改变,通过RT-PCR检测肾皮质FKN和NF-κB p65 mRNA的表达,免疫组织化学染色法检测肾皮质FKN及NF-κB p65蛋白的表达。结果 MRL/lpr小鼠肾皮质中检测到FKN、NF-κB p65 mRNA和蛋白的表达,DHA可减少MRL/lpr小鼠的蛋白尿、改善肾功能、减轻肾脏病变。DHA下调MRL/lpr小鼠肾皮质中FKN、NF-κB p65 mRNA和蛋白的表达。结论双氢青蒿素可通过调节FKN和NF-κB的表达实现其对狼疮性肾炎的治疗作用,与泼尼松联用效果更佳。     

Fractalkine在狼疮性肾炎患者血液和肾组织中的表达及其意义

目的研究Fractalkine（FKN）在狼疮性肾炎（lupus nephritis, LN）患者血液和肾组织中的表达及其意义。方法选取48例
LN患者,根据病理分型分为轻型组22 例、重型组26 例,采用RT-PCR 检测患者血液中FKN mRNA的表达、酶联免疫吸附法
（ELISA）检测患者血液中FKN蛋白的表达,并与26例正常对照比较;同时通过免疫组织化学染色法测定LN患者肾组织FKN
的定位与表达情况。结果与正常对照组相比,LN中轻型组和重型组患者血液中FKN的mRNA和蛋白的表达均明显升高,且重
型组升高更为显著（P<0.01）,重型组FKN mRNA和蛋白的表达也明显高于轻型组。在LN患者肾组织中,FKN主要表达于肾
小球足细胞和肾小管上皮细胞的胞浆中,重型组肾小球FKN阳性细胞数较轻型组明显增多（P<0.01）,但皮质间质的FKN阳性
细胞数无差异（P>0.05）。结论FKN在LN患者血液和肾小球中的表达与LN的肾组织病理损伤表现的程度有关。
     

姜黄素的抗炎特性及其在肾脏疾病中作用机制的研究进展

<正>姜黄素(curcumin)是一种在传统医学中广泛应用的天然多酚,是从姜黄根茎中提取的姜黄磺胺类疏水多酚。姜黄根包含三种最主要的姜黄素类:姜黄素、脱甲氧基姜黄素及双脱甲氧基姜黄素。姜黄中最具有活性成分的姜黄素占77%,而另外二种成分分别占17%和3%。近年来,大量实验研究证明其还具有抗炎、免疫调节、抗氧化、抗肿瘤等药理作     

阿托伐他汀对糖尿病肾病大鼠肾小球细胞增殖的影响及其意义

目的探讨阿托伐他汀对糖尿病肾病大鼠肾小球细胞增殖的影响及意义。方法将40只SD雌性大鼠随机分为四组:糖尿病肾病组(DN组)、预防组、治疗组、对照组,每组10只。DN组、预防组和治疗组糖尿病造模成功后,预防组和治疗组分别给予不同剂量的阿托伐他汀干预,对照组仅注射柠檬酸缓冲液。第8周测定相关生化指标,观察肾组织病理改变后,通过免疫组化法分析大鼠肾小球增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)的表达。结果预防组和治疗组相关生化指标较DN组好转,肾脏病变减轻,PCNA表达于肾小球固有细胞。DN组肾小球中PCNA的表达均较预防组、治疗组、对照组明显上调。而预防组、治疗组肾小球中PCNA的表达较DN组下调,且预防组PCNA的下调更为显著。结论阿托伐他汀通过下调肾小球PCNA表达,抑制肾小球细胞增殖实现对DN的保护作用。     

神经病学临床见习中CBL教学模式应用浅析

目的浅析以病例为基础的学习(Case Based Learning,CBL)模式在神经病学临床见习教学中的应用。方法选取2009级临床医学本科学生692人,采用CBL教学法进行神经病学临床见习教学,课后对学生进行作业和重点、难点的考核以及问卷调查以评价教学效果。结果学生病历书写格式规范、内容齐全,考核成绩良好,多数学生认为CBL教学法的教学效果很好。结论在神经病学见习教学中应用CBL教学模式能够培养医学生综合素质,是值得推广应用的教学方法。     

桂西壮族IgA肾病转化生长因子β1-509C/T基因多态性的研究

目的 探讨桂西地区壮族IgA肾病患者转化生长因子β1-509C/T基因多态性在分子遗传学中的意义.方法 PCR-RFLP法及基因直接测序法分析基因型及等位基因分布规律,对IgA肾病患者治疗前临床及病理资料进行相关分析.结果 ①桂西壮族IgA肾病组与正常对照组比较,转化生长因子β13种基因型和2种等位基因的分布差异无显著性(P＞0.05).②临床资料显示:补体C3、C4水平在各基因型间差异有显著性(P＜0.05),CC基因型C3、C4值均比TT型低;血压、血红蛋白、24 h尿蛋白定量、血白蛋白、血肌酐水平、尿酸水平、肉眼血尿、镜下血尿、高血脂、C-反应蛋白、血IgA、IgG、IgM的差异均无显著性(P＞0.05).③病理资料显示:3种基因型在Ⅰ、Ⅱ+Ⅲ、Ⅳ+V级的分布频率差异有显著性(P＜0.05),CC型的分级频率以Ⅳ+V级最高,TT型的分级频率以Ⅰ级最高.结论 转化生长因子β1-509C/T基因多态性与桂西地区壮族IgA肾病的遗传易感性不相关.但可能与较重的肾损伤、肾免疫病理沉积相关.