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目的明确PERV的整合是否影响HEK293细胞中HERV-W各基因表达水平。方法根据GenBank中登录的基因序列,分别设计HERV-W gag、HERV-W pol、HERV-Wenv、syncytin-1和humanβ-actin引物,并分别建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法,用于检测HEK293、HEK293-PERV中各基因mRNA的表达。结果本研究建立的检测方法均具有良好的特异性、敏感性和稳定性,标准曲线的相关系数大于0.99,扩增效率介于95%~110%,可用于检测。结论检测结果经2~(-△△Ct)分析后,发现与对照相比,PERV整合后的HEK293-PERV中HERV-Wgag、HERV-Wpol、HERV-Wenv和syncytin-1 mRNA相对表达量分别升高37.08倍、42.56倍、2.49倍和13.17倍,为进一步明确PERV在异种移植中的安全性提供参考。 相似文献
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天津北辰医院坐落在天津京津公路北医道,始建于1963年,是北辰区惟一一所国家二级甲等综合性医院和爱婴医院,也是天津北辰区惟一一所国际救援中心网络定点医院和天津市交通事故网络定点医院。2000年该院成为天津市首批医疗保险定点医院。北辰医院占地3万余平米,建筑面积2.8万平米。现有职工586人,其中卫生技术人员468人,副主任以上医师37人,主治医师及主管护师、技师计132人。该院现有25个临床科室,7个医技科室。其中内科系统包括心血管、内分泌、呼吸、消化及肾科等专业组;外科系统包括肿瘤、普外、骨创骨病、胸外、泌尿、微创、肛肠等专业… 相似文献
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目的 采用梯度HPLC法测定注射用硝酸异山梨酯的有关物质。方法 采用Agela Venusil MP C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以水-甲醇为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长为210 nm,柱温30℃。结果 系统适用性试验2-单硝酸异山梨酯峰与单硝酸异山梨酯峰分离良好,样品中各杂质及主峰的分离度和检测灵敏度均能满足有关物质的测定要求。结论 本方法可用于测定注射用硝酸异山梨酯的有关物质,为该品种的质量评价提供更具分辨力的方法。 相似文献
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本文采用差示分光光度法,建立了诺氟沙星糖浆剂的含量测定方法,可消除制剂中辅料干扰,具有操作简便,不使用有机溶剂,方便准确等特点,方法的回收率和重现性均较好,符合制剂检验要求。 相似文献
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细胞色素P4501A1基因mRNA的化学诱导及在人肝中的基础表达 总被引:1,自引:0,他引:1
利用Northern印迹杂交及逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术研究了几种传代培养细胞和成人肝组织及人胚胎肝组织细胞色素P4501A1(1A1)基础表达水平并观察了几种化学诱导剂对人羊膜细胞FL系和原代胚肝细胞该基因mRNA水平的诱导.结果显示:3-甲基胆蒽,苯巴比妥,β-萘黄酮在不同程度上能高诱导FL细胞1A1mRNA表达.RT-PCR结果显示CHL细胞及V79细胞存在基础表达,但Northern杂交结果提示其表达量极低.成人肝脏中1A1亦存在极低的表达水平,而人胚胎肝脏不能用高灵敏度的RT-PCR检测到痕迹表达,提示胚胎发育时期1A1基因处于完全关闭状态. 相似文献
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人细胞色素p450IA1基因cDNA的克隆和鉴定 总被引:5,自引:1,他引:4
在用3-甲基胆蒽诱导培养人羊膜FL细胞24h后,抽提细胞总RNA并直接合成cDNA第一链。利用人工合成的一对寡核苷酸引物,采用PCR技术特异性地扩增Cyt p50IA1 cDNA。30个循环后琼脂糖凝胶电泳显示1.5Kb大小片段,长度与预计相符。Southern杂交结果证实此片段确为Cyt p450IA1 cDNA。将此片段克隆至质粒pGEM-3Z并进行部份序列分析。结果显示克隆片段包含Cyt p 相似文献