羊膜脱细胞基质的制备及其生物相容性

目的:羊膜是一种天然的细胞外基质,具有抗原性低、排异反应小特点.实验拟进行羊膜脱细胞基质的制备,观察其作为组织工程支架材料的生物相容性.方法:实验于2007-03/08在河北医科大学解剖教研室实验中心完成.实验材料:4～6周龄健康清洁级SD大鼠,体质量100～ 150 g,由河北医科大学实验动物中心提供.实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准.新鲜人羊膜取自石家庄市第四医院,采取前征得产妇知情同意,实验经医院伦理委员会批准.实验方法:①取新鲜人羊膜冲洗后以1%tritonX-100溶液振荡24 h,0.25%胰蛋白酶37 ℃振荡4 h,充分漂洗,冷冻干燥,环氧乙烷消毒,并进行苏木精-伊红染色和扫描电镜检测.②体外分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,并复合培养于羊膜脱细胞基质上,以不含细胞的培养基作为空白对照,以普通培养基培养作为阴性对照,倒置显微镜下观察生长情况,并进行苏木精-伊红检测.四甲基偶氮唑盐法测定羊膜脱细胞基质浸提掖对骨髓间充质干细胞毒性;将羊膜脱细胞基质植入SD大鼠背部皮下,检测其组织相容性.结果:①制备的羊膜脱细胞基质为白色菲薄、半透明的膜状物,柔韧性好,经苏木精-伊红和扫描电镜检测无细胞残留.苏木精-伊红染色可见羊膜表面细胞黏附生长良好,细胞伸展,形态与正常培养细胞无差异.②实验组第2、4、6、8天的吸光度值低于对照组,相对增殖率随培养时间延长而增加,平均相对增殖率为89.5%,细胞毒性评分均为1级.③皮下埋置术后动物全部成活,伤口无红肿、渗液等炎症反应,移植物均未见坏死、纤维化等.光镜下,术后1周移植物周围可见以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润,羊膜卷尚完整;术后2周,淋巴细胞减少,偶见新生毛细血管;术后4周,部分移植物已经降解,基本未见淋巴细胞.结论:经去污剂和酶消化法制备的羊膜脱细胞基质生物相容性良好,是一种理想的组织工程支架材料.     

消栓肠溶胶囊治疗缺血性中风恢复期(气虚血瘀证)多中心、随机、双盲双模拟、平行对照临床试验

目的观察消栓肠溶胶囊对缺血性中风恢复期气虚血瘀证患者神经功能缺损程度、证候及安全性指标的影响,从而探讨其疗效。方法采用随机、双盲双模拟、阳性药平行对照及多中心临床试验的研究方法,治疗组324例给予消栓肠溶胶囊和复方地龙胶囊模拟剂,对照组107例给予消栓肠溶胶囊模拟剂和复方地龙胶囊,连续使用(28±1)d,并分别于用药前、用药(28±1)d、发病(90±2)d对患者的神经功能缺损程度和证候及安全性指标进行采集分析。结果 1治疗组与对照组神经功能缺损评分,治疗后均有降低,组内、组间比较差异均有统计学意义,且治疗组疗效优于对照组;2治疗组与对照组中医证候积分均降低,组内、组间差异有统计学意义,治疗组疗效优于对照组;32组治疗前后生命体征、血尿常规等理化检查未发现明显异常,未出现严重不良事件。结论消栓肠溶胶囊能显著改善缺血性中风气虚血瘀证患者神经功能缺损症状及气虚血瘀症状,其疗效优于复方地龙胶囊,具有较好的安全性。     

长春西汀与疏血通联合治疗慢性脑供血不足的效果观察

目的：研究长春西汀联合疏血通治疗慢性脑供血不足的临床效果。方法选择2013年10月~2014年10月在本科住院的慢性脑供血不足患者138例,将入组患者随机分为3组,每组46例,A组采用长春西汀联合疏血通治疗,B组单用长春西汀治疗,C组单用疏血通治疗,共用3周,分别于第7、21天观察和比较3组的疗效。结果3组治疗第21天的FIB水平均低于治疗前,差异有统计学意义（P<0.05）。3组治疗第21天的BA、RVA及LVA血流速度均较治疗前增快,A组较B、C组增快更明显,差异有统计学意义（P<0.05）。 A组的总有效率明显高于B、C组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论联合用药组的血流速度改善程度及疗效明显优于单药组,说明联合用药的效果优于单用药物。     

郭登洲教授治疗湿热型肾病综合征经验分析

郭登洲博士，为全国百名杰出中医，从事中西医结合肾病临床及科研工作20余年，临床经验丰富，擅长应用中医疗法治疗肾脏疾病。 肾病综合征，是以大量蛋白尿、低蛋白血症、高脂血症、水肿为主要特点的一系列临床综合征，是肾内科的一类主要常见疾病，属于中医学“水肿”“尿浊”“腰痛”等范畴。目前现代医学对于肾病综合征的治疗以应用肾上腺皮质激素为主，但药物副作用明显，且激素减量或停用后易复发和加重。目前一般认为，激素类药物属于阳燥之品易助内热，临证常表现为舌苔厚腻，或黄或白，或口苦黏腻，或嘴干口渴，或大便黏滞不爽，脉多弦数或滑数等湿热之象，且在肾病综合征的治疗过程中，湿热最是难清。郭登洲教授从事肾脏病临床及科研工作20余年，对此证的治疗颇有心得，笔者有幸师从郭登洲教授，现将恩师治疗肾病综合征湿热证型经验总结如下。     

环甲膜切开术在突发窒息患者中的应用

环甲膜切开术是抢救窒息患者、创建呼吸通道的快速有效的措施 ,往往用于气管插管失败的患者 ,因其本身很容易造成喉狭窄等并发症 ,并非是一种常规的手术方法 ,我院 1992～2 0 0 1年行环甲膜切开术 15例 ,报道如下。1　资料与方法本组 15例均为突发窒息的患者 ,牙关紧闭或气管插管失败。男 10例 ,女 5例 ,年龄 4～ 5 5岁 ,其中喉外伤 5例 ,急性喉水肿 2例 ,喉异物 4例 ,头颈外伤 2例 ,急性会厌炎 2例。手术方法 :取平卧位 ,快速消毒、铺单 ,1%利多卡因局麻 ,左手拇指和中指分别固定甲状软骨和环状软骨 ,于甲状软骨和环状软骨间做长约 3～ 4cm…     

褪黑素对小鼠淋巴细胞电离辐射损伤的防护作用

目的 探讨褪黑素(MLT)对小鼠淋巴细胞电离辐射损伤的防护作用及其机制。方法 采用流式细胞术和荧光分光光度法在离体和整体条件下分别检测小鼠淋巴细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率。在此基础上,腹腔注射MLT,观察2 Gy X射线全身照射后24 h小鼠胸腺、脾脏淋巴细胞数量及胸腺细胞³H-TdR掺入率和Con A、LPS诱导的脾T、B淋巴细胞转化率的变化。结果 离体研究中,小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞体外接受0.5~6.0 Gy照射后,凋亡小体百分率、DNA裂解率均呈剂量依赖性增加,而照射前预先加入2 mmol/L MLT,细胞凋亡小体百分率、DNA裂解率与单纯照射组比较均显著降低。整体研究中,2Gy全身照射前腹腔注射MLT,小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率显著低于单纯照射组,接近或低于假照水平,MLT剂量在0.1~2.5 mg/kg范围内均有作用,但无明显剂量依赖性。小鼠胸腺、脾脏淋巴细胞数量、胸腺细胞³H-TdR掺入率及有丝分裂原诱导的脾脏T、B淋巴细胞转化率在2 Gy全身照射后均显著低于假照组(P <0.001)。0.5~10 mg/kgMLT预先腹腔注射,胸腺、脾脏淋巴细胞数显著高于0 mg/kg体重组(单纯照射),其中0.5 mg/kg体重组增高最显著;胸腺细胞³H-TdR掺入率显著增高(P <0.01或P <0.001),以0.5 mg/kg体重组增高最显著;Con A诱导的T细胞转化率显著增高,也以0.5 mg/kg体重组为著;LPS诱导的B细胞转化率增高,以10mg/kg体重组最显著。结论 MLT在体内和体外均可减轻电离辐射诱导的小鼠淋巴细胞损伤,对免疫功能具有保护作用。     

胰腺损伤18例诊治体会

<正>胰腺损伤较为少见,因其固定于后腹膜.背靠脊柱,前面有腹肌、胃及结肠,受到损伤机会较小,一旦受伤说明暴力很大,损伤程度严重,死亡率为20%。胰腺损伤症状缺乏特异性,伤势复杂且多伴有多发伤,故术前诊断和手术处理存在一定难度。     

加味当归补血汤对糖尿病肾病大鼠肾组织miRNA-155及SOCS1的影响

目的：通过实验研究加味当归补血汤对糖尿病肾病（DKD）大鼠肾组织microRNA-155(miR-155)及细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)表达水平的影响，探讨加味当归补血汤治疗DKD的作用机制。方法：选取6周龄SPF级雄性SD大鼠50只，按照随机数字表法分为正常组（CON）和建模组。建模组使用高糖高脂饲料进行为期6周的喂养后，通过链脲佐菌素（STZ）腹腔注射（35 mg/kg）建立DKD大鼠模型。建模成功后随机数字表法分为模型组（MOD）、加味当归补血汤低剂量组（DBTL）、加味当归补血汤中剂量组（DBTM）、加味当归补血汤高剂量组（DBTH）、厄贝沙坦组（IRB），各给药组分别灌胃给药20周，CON组与MOD组给予同等体积生理盐水灌胃。20周结束后收集尿标本，全自动分析仪分析大鼠尿微量白蛋白与肌酐比值（UACR），取材后采用苏木精-伊红（HE）染色法、马松（Masson）三色染色法、过碘酸六胺银（PASM）染色法分别观察各组大鼠肾组织形态病理学变化；Real-time PCR检测DKD大鼠肾组织miR-155、SOCS1 mRNA的表达情况，蛋白免疫印迹法（Western ...