调节性B细胞促进前列腺癌细胞增殖和侵袭的作用及机制研究

调节性B细胞(regulatory B cell,Breg)是机体内分泌IL-10的主要细胞,在肝癌等恶性肿瘤免疫中发挥重要作用。研究将2015年6月至2017年12月来河北医科大学第四医院就诊的前列腺癌和良性前列腺增生患者纳入研究范围,免疫组化法检测良、恶性组织中IL-10水平和Ki-67增殖指数;流式细胞术检测外周血CD19~+IL-10~+Breg百分比;MTT实验检测前列腺癌细胞增殖率;Transwell侵袭实验检测前列腺癌细胞侵袭能力。免疫组化结果显示良性前列腺增生组织中IL-10平均光密度(average optical density, AOD)为12.60±2.72,Ki-67增殖指数为(3.00±0.84)%,前列腺癌组织中IL-10的AOD为86.10±11.49,Ki-67增殖指数为(45.30±4.11)%(t=6.23,P0.000 1;t=10.08,P0.000 1);流式细胞术检测结果显示良性前列腺增生患者外周血中Breg百分比为(0.14±0.03)%,前列腺癌患者外周血中Breg百分比为(0.41±0.04)%(t=5.082,P0.000 1);相关性分析结果显示前列腺癌患者和良性前列腺增生患者外周血Breg百分比与组织中IL-10表达水平和Ki-67增殖指数均呈显著正相关(r=0.701 9,P=0.000 6;r=0.784 3,P0.000 1);MTT及Transwell实验结果显示Breg促进前列腺癌细胞增殖和侵袭,IL-10在其中发挥重要作用。综上,Breg在前列腺癌患者外周血中所占比例显著升高,能够通过分泌IL-10促进前列腺癌细胞增殖和侵袭,这可能为前列腺癌的免疫治疗提供新靶点。     

桧木醇诱导人肾透明细胞癌786-O细胞凋亡及其机制研究*

目的:探讨桧木醇（hinokitiol ）对人肾透明细胞癌786-O细胞株的增殖抑制作用及诱导凋亡效应,初步阐明其机制。方法:采用CCK-8 法检测桧木醇对肾癌786-O细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡情况;转染EGFP-LC3 后镜下观察细胞自噬状态;采用Western blot对细胞Caspase- 3 剪切体、LC3 和P62蛋白表达量进行检测。结果:桧木醇可以显著抑制肾癌786-O细胞增殖,通过激活Caspase途径诱导细胞凋亡。桧木醇诱导肾癌786-O细胞发生自噬,LC3 蛋白表达显著上调,而P62蛋白表达下调。结论:桧木醇可显著抑制肾癌786-O细胞的增殖并通过过度激活细胞自噬促进肾癌细胞凋亡。      

铁死亡相关蛋白SLC7A11及GPX4在肾细胞癌中的表达及意义

目的:探讨SLC7A11及GPX4在肾细胞癌及正常肾组织中的表达差异,初步分析SLC7A11及GPX4的表达情况与肾癌预后之间的关系。方法:采用免疫组化方法检测SLC7A11及GPX4在肾癌及正常肾组织中的表达,同时分析SLC7A11及GPX4表达水平与肾癌患者临床病理参数的相关性。采用Spearman法分析SLC7A11及GPX4之间表达的相关性,利用Kaplan-Meier生存曲线及Cox回归方法分析SLC7A11,GPX4表达的高低及临床因素对肾癌患者预后产生的影响。结果:SLC7A11及GPX4在肾癌中为高表达,而在正常肾组织为低表达（P<0.05）,SLC7A11及GPX4蛋白表达与肾癌大小、远处转移及临床分期密切相关,SLC7A11与GPX4之间呈正相关(r=0.583,P<0.01)。在肾癌组织中,SLC7A11,GPX4表达阳性的患者与阴性表达的患者相比预后较差（P<0.05）。多因素分析提示肾癌大小、远处转移、临床分期、SLC7A11及GPX4是影响肾癌预后的独立因素。结论:SLC7A11及GPX4在肾癌中高表达,可能参与了肾癌的发生,SLC7A11或GPX4高表达的肾癌患者预后不良,未来可能成为肾癌治疗新靶点。     

河北医科大学第四医院前列腺癌患者的基线特征与生存分析

背景与目的：近年来，前列腺癌发病率逐年增高，但前列腺癌筛查工作仍不全面，国内前列腺癌数据库也相对匮乏。分析河北医科大学第四医院前列腺癌患者的基线特征、治疗以及生存情况等数据，为河北及周边地区前列腺癌的诊治提供参考。方法：回顾性分析2008年1月—2018年12月在河北医科大学第四医院泌尿外科就诊的857例前列腺癌患者信息，分析初次就诊时非转移性（M ₀ ）和转移性（M ₁ ）前列腺癌患者的基线特征、治疗方案和生存情况。对随访数据采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线，并用log-rank检验比较两组之间生存率差异。结果：纳入基线统计的患者共计857例，中位年龄71岁，797例存在前列腺特异性抗原（prostate-specific antigen，PSA）记录，689例存在Gleason评分记录。412例M ₀ 患者和445例M ₁ 患者中，PSA≥100 ng/mL的患者分别占11.1%（44/397）和57.3%（229/400），Gleason评分≥8分的患者分别占46.9%（166/354）和63.9%（214/335）。纳入随访分析的患者共计606例，患者生存395例，死亡211例，其中182例死于肿瘤进展。M ₀ 和M ₁ 患者5年生存率分别为63.2%（76/120）和41.3%（102/247），M ₀ 和M ₁ 患者的中位生存期分别为85和 47个月（P＜0.01）。此外，在所有采用传统内分泌治疗［雄激素剥夺治疗（androgen deprivation therapy，ADT）或联合雄激素阻断治疗（combined androgen blockade，CAB）］的M ₁ 患者和高危转移性激素敏感性前列腺癌（metastatic hormone-sensitive prostate cancer，mHSPC）患者中，中位PSA进展时间（time to PSA progression，TTPP）分别为18和17个月。内分泌治疗初诊M ₀ 患者的中位TTPP为25个月。12例影像学检测未发现远处转移的去势抵抗性前列腺癌（non-metastatic castrate-resistant prostate cancer，NM-CRPC）患者，中位无转移生存期（metastasis-free survival，MFS）仅为16个月。结论：前列腺癌患者的年龄、PSA及Gleason评分偏高，多数患者在治疗时有转移，5年生存率偏低，因此应重视和加强前列腺癌的筛查工作。在接受内分泌治疗的M ₁ 患者进展为转移性去势抵抗性前列腺癌（metastatic castrate-resistant prostate cancer，mCRPC）的时间较短，此外，接受内分泌治疗的M ₀ 患者进展至NM-CRPC后，进展为mCRPC或死亡的时间也非常短，未来对于M ₁ 和NM-CRPC患者应采取更为积极的治疗，以延缓病情进展到mCRPC阶段。     

长链非编码 RNA LOC100130476在肾细胞癌的表达及启动子区甲基化状态

目的∶探讨LOC10130476 在肾细胞癌（renalcell careinoma，RC）中的表达及启动子区甲基化状态。方法∶应用RT-qPCR 和甲基化特异性 PCR（methylation-specific PCR，MSP）检测 RCC中LOC100130476的表达及启动子区甲基化状态，并分析与临床病理资料的关系;DNA甲基转移酶抑制剂（5-Aza-dC）干预后的肾癌细胞系中，采用RT-qPCR 检测 LOC100130476 的表达及甲基化状态。结果;RT-gPCR显示，LOCI00130476在RCC组织的表达明显低于正常组织（0.593±0.306w1.000±0.018，t=-11.143，P<0.001），并与淋巴结转移（t=2.774.P=0.007）及临床分期（F=5.436，P=0.002）相关。L.OCI00130476 在3株肾癌细胞系（A498、ACIIN，786-O）的相对表达量均低于对照组（HK-2）（F=107.068，P<0.001）。5-Aza-dC处理后，LOCI00130476 的表达均增高。MSP显示.RCC组织的甲基化率明显高于正常组织（x=33.273，P<0.01），并与淋巴结转移有关（y=4.250，P=0.039）;3株肾癌细胞系经5-Aza-dC处理后，A498、786-0 中 LOC100130476 甲基化消失，ACHIN 中 LOC100130476 甲基化降低，3种细胞中LOCl00130476 非甲基化增高。结论;LOCl00130476在 RCC中低表达，并呈高甲基化状态，其高甲基化可能是肾癌发生发展的分子机制之一。     

肾细胞癌中Wif-1基因的甲基化状态及表达

目的检测肾细胞癌(RCC)中Wnt抑制因子-1(Wif-1)基因的甲基化状态及表达水平,探讨其在肾细胞癌发生发展中的可能机制。方法分别应用甲基化特异性PCR(MSP)和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测56例肾细胞癌及相应癌旁正常肾组织中Wif-1基因的甲基化状态及表达水平。结果 Wif-1基因在RCC组织中的甲基化率显著高于相应癌旁正常肾组织(P<0.05)。Wif-1基因在RCC组织中的相对表达量显著低于相应癌旁正常肾组织(P<0.05)。在RCC组织中,Wif-1基因甲基化阳性组mRNA的相对表达量与甲基化阴性组mRNA的相对表达量比较无显著差异(P>0.05)。结论 Wif-1基因启动子区的高甲基化在肾细胞癌的发生中是一个频发事件。