p53基因突变、int-2基因扩增与食管癌的关系

ｐ５３基因突变、ｉｎｔ－２基因扩增与食管癌的关系邵根泽任运生张少英温博贵食管癌的发生是一个涉及多基因改变的多步骤过程，ｃ－ｍｙｃ、ＥＧＲＦ、ｉｎｔ－２、ｈｓｔ－１、ＣｙｃｌｉｎＤ等癌基因以及ｐ５３、Ｒｂ、ＡＰＣ、ＭＣＣ、ｐ１６等抑癌基因的异常是食管癌...     

人脑钠素基因工程菌的发酵条件及产物纯化研究

为进一步提高工程菌的下游纯化效率,本文利用高效表达质粒载体将多拷贝脑钠素基因转人宿主菌E．xoliM5219,摸索最佳发酵条件,热诱导获较高表达（30％）:通过超声裂解收获目的蛋白包涵体,采用制备性电泳成功获得纯度大于95％的5BNP融合蛋白;经BNP／SKATOLE裂解成单体后测得有舒张血管活性。该纯化路线为后续工作提供了线索。     

人脑钠素基因工程菌的发酵条件及产生物纯化研究

为进一步提高工程菌的下游纯化效率，本文利用高效表达质粒载本将多拷贝脑钠素基因转入宿主菌Ｅ．ｃｏｌｉＭ５２１９，摸索最佳发酵条件，热诱导获较高表达；通过超声裂解收获目的蛋白包涵体，采用制备性电泳成功获得纯度大于９５％的５ＢＮＰ融合蛋白；经ＢＮＰ／ＳＫＡＴＯＬＥ裂解成单后测得有舒张血管活性。该纯化路线为后续工作提供了线索。     

多串重组BNP蛋白的裂解、复性及活性测定

在脑钠素编码ｃＤＮＡ的５＇和３＇端分别引入色氨酸密码子，构建成首尾串联的多拷贝基因，经温控表达后，获得由色氨酸连接的多串重复ＢＮＰ蛋白，用色氨酸特异的裂解剂２－硝基酚硫代苯－３－甲基－溴吲哚（ＢＮＰＳ－Ｓｋａｔｏｌｅ）和ＤＭＳＯ／ＨＢｒ两种方法裂解，得到ＢＮＰ单体蛋白，经谷胱甘肽氧化还原对复性后测活，检测到了ＢＮＰ较强的舒张血管活性。     

原核表达的多串重复人脑钠素蛋白的裂解

目的：将原核表达的多串重复人脑钠素蛋白裂解成单体。方法：利用高效表达质粒载体将串将５拷贝人脑钠素基因转入宿主菌Ｅ．ｃｏｌｉ Ｍ５２１９,以热诱导方式表达５ＢＮＰ融合蛋白,超声裂解收获５ＢＮＰ融合蛋白包涵体,制备性电泳分离纯化;凝血酶消化后,再经ＢＭＰＳ－Ｓａｔｏｌｅ法裂解。结果：利用本文原核表达系统所表达的５ＢＮＰ融合蛋白占菌体总蛋白的３０％,采用制备性电泳可获得纯度〉９５％的５ＢＮＰ融合蛋白;凝     

从DNA双螺旋结构学说看科学方法论

从ＤＮＡ双螺旋结构学说看科学方法论任运生，申延琴１９５３年，Ｗａｔｓｏｎ和Ｃｒｉｃｋ提出了ＤＮＡ双螺旋结构学说，从而开创了分子生物学的新时代。近几十年生物学理论与实践的每一进步，无不以这一基本理论为前提。正所谓＂一朵忽先变，百花皆后香。＂因此，对这一...     

含人脑钠素多拷贝基因原核系列表达载体的构建

根据人脑钠素（ＨｕｍａｎＢｒａｉｎＮａｔｒｉｕｒｅｔｉｃＰｅｐｔｉｄｅ，ｈＢＮＰ）的ｃＤＮＡ序列，化学合成四条ＤＮＡ片段，经ＰＣＲ延伸扩增，获得全长ＢＮＰ之ｃＤＮＡ，依ＥｃｏＲＩ和ＰｓｔＩ位点插入ＰＢＶ２２１表达质粒，构建成ＰＢＶ２２１／ＢＮＰ重组体，依据ｃＤＮＡ片段中ＢｇＩⅡ和ＢａｍＨＩ切点的共同粘性末端，依次构建成ＰＢＶ２２１／２ＢＮＰ，ＰＢＶ２２１／３ＢＮＰ．．．．．．．．．ＰＢＶ２２１／８     

心钠素多拷贝基因的原核表达及其产物的纯化与测定

将含八拷贝心钠素（Ｃａｒｄｉｏｎａｔｒｉｎ，ＣＮ）ｃＤＮＡ的质粒转化大肠杆菌，在ｌａｃ启动子控制下经化学诱导表达，表达的多串蛋白之间由不存在于心钠素序列的赖氨酸相互分析，经分离纯化后，得到了８ＣＮ蛋白，电泳表现为单一条带，经赖氨酸酶Ｃ和羧肽酶Ｂ酶切及复性处理后，检测到较强的心钠素放免和生物学活性。