棘球蚴TGF-β/Smad和MAPK信号通路的研究进展

由于棘球蚴和宿主的密切接触,在棘球蚴感染过程中,棘球蚴及宿主细胞都可能分泌多种细胞因子,使刺激信号通过细胞表面的受体传递到细胞内,干预宿主的免疫系统,产生免疫耐受从而使棘球蚴能够在宿主体内长期共存。本文就近年来棘球蚴感染过程中转化生长因子-β(TGF-β)/Smad和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路所起的免疫调节作用作一综述。     

新疆细粒棘球蚴95基因的克隆及同源性分析

目的：分析新疆地区细粒棘球蚴95（EG95）基因结构特点。方法：从新疆地区细粒棘球蚴原头节中提取基因组DNA，以细粒棘球蚴原头节DNA为模板进行PCR扩增，获得EG95基因，将其克隆至pUCm-T载体，利用DNAman软件及GeneBank/BLAST功能测序并进行基因全序列分析。结果：测序显示新疆株EG95(EG95-XJ)基因片段为1191bp。BLAST比对分析表明EG95-XJ基因与新西兰株EG95基因家族成员同源性达86％-97％，所有的碱基差异均发生于内含子区域。结论：中国新疆地区的EG95基因为EG95基因家族成员之一，但其序列与新西兰株EG95基因之间存在一定的差异。     

小鼠感染泡球蚴后细胞因子水平的变化

目的　观察人工接种泡球蚴(EM)昆明小鼠体内6种细胞因子水平的动态变化,研究泡球蚴病的免疫学机制。　方法　实验组和对照组小鼠分别腹腔接种泡球蚴及生理盐水,持续观察260d,收集各组血清用ELISA法检测血清中白细胞介素2(IL2)、γ干扰素 (IFNγ)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、IL4、IL5、IL10水平。　结果　实验组6种细胞因子水平始终高于正常对照组,其中辅助性T细胞1(Th1)类细胞因子IL2水平在感染后 80d达到峰值,感染140d后迅速降低;TNFα水平在感染后40d较对照组明显上升,感染100d左右达到峰值,140d后迅速下降;IFNγ在感染80d后达到峰值,140d后缓慢下降;而在80d以前,辅助性T细胞2(Th2)类细胞因子IL4、IL5、IL10维持在较低水平;100d后,这3类细胞因子明显上升,其中IL4、IL10水平在100d达到峰值,IL5水平在140d达到峰值,以后维持在较高水平。　结论　Th2细胞介导的体液免疫与Th1细胞介导的细胞免疫共同参与了宿主抗棘球蚴免疫。感染早期以Th1细胞介导的细胞免疫应答为主,感染中晚期转化为以Th2细胞介导的体液免疫为主。     

细粒棘球绦虫Eg95抗原基因疫苗体外瞬时表达及对小鼠诱导的免疫应答

目的　检测细粒棘球绦虫Eg95抗原基因疫苗(pcDNA3 Eg95)体外瞬时表达,探讨其诱导小鼠的体液和细胞免疫效果。　方法　pcDNA3 Eg95经脂质体转染HeLa细胞瞬时表达。逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测Eg95抗原信使RNA(mRNA)在HeLa细胞中的表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)和蛋白质印迹法(Westernblot ting)检测Eg95蛋白的瞬时表达情况。pcDNA3 Eg95基因疫苗肌肉注射免疫BALB/c小鼠,ELISA检测IgG和IgG2a水平,四甲基偶氮唑盐试验(MTT法)检测免疫小鼠T淋巴细胞增殖反应。　结果　RTPCR检测结果显示,pcD NA3 Eg95瞬时表达组有Eg95抗原基因mRNA表达,ELISA和Westernblotting检测结果表明,可在HeLa细胞中特异性表达Eg95蛋白。用pcDNA3 Eg95基因疫苗免疫BALB/c小鼠,第3周出现特异性IgG免疫应答,持续升高至第10周,显著高于对照组。从第2周开始,小鼠血清IgG2a应答即为阳性,且长时间(至第10周 )维持较高水平,与pcD NA3空质粒组比较,其差异具有非常显著性意义(P<0.01)。用原核表达的Eg95重组蛋白刺激免疫小鼠脾细胞,有明显的T细胞增殖反应。pcDNA3 Eg95基因疫苗免疫组刺激指数明显高于pcDNA3空质粒组(P<0.01)。结论　pcDNA3 Eg95基因疫苗可诱发小鼠产生特异的体液免疫和细     

继发性细粒棘球蚴病小鼠的细胞因子动态研究

为观察经实验诱发棘球蚴病小鼠体内几种细胞因子水平的变化，研究棘球蚴病的免疫学发病机制，对小鼠腹腔接种棘球蚴原头节，持续220d观察其血清中细胞因子水平变化，结果表明与正常对照比较，IL－2始终低于正常值，在220d达到峰值；IL－4在140d前呈增高趋势，以后逐渐下降；GM－CSF始终在正常水平以上波动，其中在100d达到峰值；IFN－γ在100d后超过正常值，140d后又急剧下降，说明机体在抗包虫免疫中的一个重要机制是Th2辅助的体液免疫与Th1介导的细胞免疫共同作用的结果。     

细粒棘球绦虫基因型的微卫星分析

目的利用细粒棘球绦虫微卫星序列为分型标记,建立高效、快速、简便的鉴定细粒棘球绦虫基因型技术。方法采用FAM和HEX两种不同荧光染料分别标记细粒棘球绦虫的Sca、Emsk、C106微卫星序列引物,利用荧光PCR-基因扫描技术鉴定新疆不同地区CE病人细粒棘球绦虫分离株的基因型。结果44例CE病人的66个分离株标本经PCR及微卫星标记鉴定均为细粒棘球绦虫,其中43例病人的65个细粒棘球绦虫分离株标本为G1基因型;1例病人的1个细粒棘球绦虫分离株标本为G6基因型。结论微卫星标记能够从基因水平快速、精确地鉴定新疆细粒棘球绦虫分离株的基因型,对细粒棘球绦虫的流行病学和致病性研究有重要价值。     

分子生物学技术在细粒棘球绦虫虫株分类研究中的应用

以往主要利用形态解剖学、生物学及生物化学方法对细粒棘球绦虫虫株进行分类鉴定,近年来分子生物学技术迅速发展,广泛应用于寄生虫分类学研究.本文拟对核酸序列分析以及AFLP、RAPD、微卫星DNA等分子生物学技术在细粒棘球绦虫虫株分类、鉴定及遗传变异中的应用概况及研究进展作一综述.     

苦杏仁水煎剂对佐剂性关节炎大鼠抗炎作用研究

目的研究苦杏仁水煎剂对佐剂性关节炎(AA)大鼠的抗炎作用。方法建立AA大鼠模型,观察苦杏仁水煎剂对AA大鼠足肿胀、踝关节组织病理变化的影响。结果苦杏仁水煎剂能有效抑制AA大鼠关节肿胀及减缓组织炎症的发展。结论苦杏仁水煎剂对AA大鼠具有良好的抗类风湿关节炎作用,机制还需进一步探讨。