Identification of insulin receptor substrate 1 serine/threonine phosphorylation sites using mass spectrometry analysis: regulatory role of serine 1223

Insulin receptor substrate 1 (IRS-1), an intracellular substrate of the insulin receptor tyrosine kinase, also is heavily phosphorylated on serine and threonine residues, and several serine phosphorylation sites alter the function of IRS-1. Because of the large number of serine/threonine residues, position-by-position analysis of these potential phosphorylation sites by mutagenesis is difficult. To circumvent this, we have employed matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight and HPLC-electrospray ionization tandem mass spectrometry techniques to scan for serine and threonine residues that are phosphorylated in full-length human IRS-1 ectopically expressed in cells using an adenoviral vector. This approach revealed 12 phosphorylation sites on serine or threonine residues, 10 of which were novel sites. Seven of these sites were in proline-directed motifs, whereas five were in arginine-directed sites. Sequence inspection suggested that phosphorylation of Ser1223 might alter the interaction of IRS-1 with the protein tyrosine phosphatase Src homology domain 2 (SH2)-containing phosphatase-2 (SHP-2). Mutation of Ser1223 to alanine to prevent phosphorylation resulted in increased association of SHP-2 with IRS-1, decreased insulin-stimulated tyrosine phosphorylation of IRS-1 in CHO/IR cells, and decreased insulin-stimulated association of the p85 regulatory subunit of phosphatidylinositol-3-kinase with IRS-1. This mutation had no effect on association of IRS-1 with the insulin receptor. Sequence analysis showed the Ser1223 region to be widely conserved evolutionarily. These data suggest that phosphorylation of Ser1223 dampens association of IRS-1 with SHP-2, thereby increasing net insulin-stimulated tyrosine phosphorylation.     

再次硬膜外麻醉术后行PCEA效果观察

术后病人自控镇痛（patient controlled analgesia，PCA）因其有效缓解术后疼痛已在临床上广泛应用。而硬膜外病人自控镇痛（patient controlled epidural analgesia，PCEA）较静脉病人自控镇痛（patient controlle dintravenous analgesia，PCIA）镇痛效果更完善，且副作用少。临床上既往有硬膜外麻醉史再次硬膜外麻醉术后镇痛患者日益增多，     

100例窒息新生儿48小时内血气变化与头颅CT的改变

目的探讨新生儿窒息后48小时内血气变化与头颅CT的改变及其影响因素。方法每例窒息后48小时内入院新生儿在吸氧之前立即抽取动脉血进行血气分析,测定PaO2、PaCO2、pH值,72小时行头颅螺旋CT检查,根据头颅CT检查结果,分为轻度和中重度两组,应用统计学处理两组血气分析结果。结果100例窒息新生儿中重度组有52例,合并颅内出血40例(占40%),PaO2、PaCO2、pH值与轻度组相比较有显著性差异。结论新生儿窒息后持续缺氧,导致高碳酸血症、酸中毒,进一步加重脑组织的损害。     

35年剖宫产率及适应证的变化

目的：探讨剖宫产率迅速升高的原因及适应证的变化。方法：对３５年剖宫产病例进行回顾性分析。结果：剖宫产的适应证发生了明显的变化，剖宫产新生儿死亡率、窒息率以及围产儿死亡率均有下降。结论：剖宫产率的升高在一定程度上降低了围产儿死亡率，但围产儿死亡率的进一步降低要依赖整个围产医学的发展，不能仅依赖增加剖宫产率。     

乌司他丁治疗急性轻症胰腺炎的疗效观察

目的 评价乌司他丁治疗急性轻症胰腺炎临床疗效。方法 将58例急性轻症胰腺炎患者随机分成两组，治疗组30例，对照组28例。对照组予禁食、胃肠减压、抗炎、抑制胃酸分泌及支持对症等常规治疗，治疗组除常规治疗外，加用乌司他丁，每次10万U，静脉滴注。每天1次，疗程7天。观察记录患者腹部症状、体征及血尿淀粉酶变化情况等并进行统计学处理。结果 治疗组在5天后症状、体征的缓解率及5天内患者血、尿淀粉酶下降水平均明显优于对照组（P〈0．05）。结论 乌司他丁对急性轻症胰腺炎有较好的疗效。     

模拟高原缺氧环境对大鼠心、脑组织损伤的研究

目的 采用大型低压低氧动物实验舱模拟海拔6 000 m低氧低温环境,探讨不同暴露时间对大鼠心、脑组织损伤的程度,为建立大鼠急性高原病模型及其相关机制研究奠定基础。方法 32只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组及低氧低温1、3、5 d组,每组8只。正常对照组大鼠饲养于当地海拔高度（1 500 m）,不予处理;其余3组根据不同暴露时间置于低压氧舱模拟海拔6 000 m高原进行低氧低温处理。HE染色观察心、脑组织病理改变,并检测相关生化指标的变化,评价不同暴露时间对大鼠心、脑组织的损伤情况。结果 HE染色结果显示,低氧低温引起大鼠心、脑组织不同程度的损伤,其中心肌组织在上述实验条件下随暴露时间的延长损伤加重,而脑组织在3 d时损伤最为严重;与正常对照组相比,各组心肌组织丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量、乳酸（lactid acid,LD）含量随时间延长而明显增加（P<0.05或P<0.01）,还原型谷胱甘肽（reduced glutathione,GSH）含量、总超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase,T-SOD）、Na⁺K⁺-ATPase活力随时间延长而明显降低（P<0.05或P<0.01）;脑组织MDA含量在1 d及3 d时有显著升高（P<0.05或P<0.01）,LD含量随时间延长而明显升高（P<0.05）,GSH含量、T-SOD及Na⁺K⁺-ATP酶活力仅在3 d时降低最为明显（P<0.05）。结论 模拟海拔6 000 m高原环境对大鼠心、脑组织造成明显损伤,且损伤程度与暴露于低氧低温的时间有关,机体抗氧化能力降低、自由基增加和能量代谢障碍是导致其损伤的重要因素。     

荧光偏振免疫法测定环孢素A全血浓度结果分析

目的：考察不同器官移植患者环孢素谷浓度与效果之间的关系。方法：采用荧光偏振免疫法对１５７例肺、肾、骨髓移植患者进行常规ＣｓＡ血药浓度监测,并结合临床进行归纳、分析、统计。结果：发现食物、性别、肝功等均可影响ＣｓＡ的全血浓度,不同患者服用相同剂量的ＣｓＡ血药浓度差异较大。结论：在临床器官移植中,要加强血药浓度监测。     

愈骨疗伤方醇提物和水提物的药效学研究简

目的：比较愈骨疗伤方（Yuguliaoshang recipe,YGLS）醇提物和水提物促进骨折愈合的作用.方法：提取工艺分为水提工艺和醇提工艺.将60只家兔随机分为10个组：对照组,模型组,YGLS醇提取物低、中、高剂量（0.16、0.32、0.64 g/kg醇提取粉末）组,水提取物低、中、高剂量（0.26、0.53、1.06 g/kg水提取粉末）组,伤科接骨片（0.4 g/kg）组和麝香接骨胶囊（0.4 g/kg）组,每组6只.除对照组外,其余9组,均进行骨缺损模型制作,并给予相应的药物治疗.给药30 d后,测定血清碱性磷酸酶活性和血清钙、磷浓度,对骨缺损部位进行X线检查,病理学检查.结果：从X线片可见,中、高剂量醇提和水提组家兔骨痂填满缺损,骨折线随骨痂骨性愈合而消失,与模型组相比,有显著差异（P＜0.05）.从病理学检查可见,醇提的高剂量组和水提的高剂量组,骨小梁普遍较模型组增粗,骨小梁相互连接,有髓腔通过,各剂量醇提和水提物均能在一定程度上促进骨折愈合.与模型组比较,醇提和水提的中剂量组家兔血清碱性磷酸酶活性显著升高（P＜0.05）;水提高剂量组家兔血清钙磷离子浓度乘积明显升高（P＜0.05）,醇提高剂量组家兔血清碱性磷酸酶活性、钙离子浓度、磷离子浓度及钙磷离子浓度乘积也升高（P＜0.05）.结论：YGLS水提物和醇提物均有促进骨折愈合的作用.     

川崎病55例临床分析

目的探讨川崎病早期诊断有价值的临床特征。方法回顾性分析55例川崎病患儿各种临床表现发生率。结果①55例川崎病患儿发病年龄以婴幼儿为主，3岁以内占81．8％。以春、夏季多见。不典型川崎病10例（18．2％）。就诊时除发热外，其它症状出现频率的次序是：球结膜充血94．6％、口腔粘膜改变89．1％、淋邑结肿大85．5％、指趾脱皮76．4％、皮疹74．6％、手足硬肿72．7％。②就诊时已有冠状动脉改变36例（65．5％），以双支冠状动脉多见（40％），其次为左冠状动脉（18．2％）。结论川崎病早期临床症状缺乏特异性，心血管并发症出现早。     

高效毛细管电泳法测定丙戊酸片中主药的含量

目的:建立以高效毛细管电泳法测定丙戊酸片中主药含量的方法。方法:缓冲液为20mmol/L磷酸二氢钾10ml中加入0.01%四丁基氢氧化铵100μl,分离电压为15kV,温度为25℃,测定波长为214nm,压力进样时间为6s。结果:丙戊酸检测浓度在50～800μg/ml范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9992),平均回收率为99.7%(RSD=0.68%)。结论:本方法操作简便、快速,进样量少,成本低,结果准确,可用于丙戊酸片的质量控制。