低密度传代培养人脂肪基质细胞的体外增殖和表面抗原表达

目的:观察低密度传代培养对人脂肪基质细胞的形态、增殖能力和表面抗原表达的影响。方法:实验于2004-05/2006-01在上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科和组织工程研究中心完成。①吸脂术获得脂肪组织,经胶原酶消化分离。②培养脂肪基质细胞,原代细胞80%融合后分别以5000/cm2和1000/cm2的接种密度传代至第3代。③四唑盐比色法和流式细胞法检测比较不同密度传代培养对细胞形态、增殖能力及表面抗原表达的影响。结果:①低密度传代培养的细胞形态相对均一、体积较小。②四唑盐比色法结果显示低密度传代细胞增殖活力与高密度传代培养组差异无显著性。③流式细胞学检测结果表明,低密度培养组表达CD105,CD166,Stro-1,Flk-1等干细胞相关表面抗原的细胞比例显著高于高密度培养组。结论:低密度传代培养有利于脂肪基质细胞的体外增殖,并能显著提高细胞群体中干细胞的比例,有可能发展成为一种简便的脂肪干细胞纯化方法。     

力学刺激促进骨髓基质干细胞体外软骨分化

目的探讨离心力刺激对猪骨髓基质干细胞(BMSCs)体外成软骨分化的作用,以及对三维支架上构建组织工程化软骨的影响,明确力学刺激与细胞分化及组织形成的关系,为体外软骨构建提供适当参数。方法抽取8周龄猪髂嵴骨髓,应用贴壁法分选单个核细胞,体外培养扩增后获得第2代BMSCs,以5.0×107/cm3的细胞密度接种到聚羟基乙酸(PGA)制成的圆柱形三维支架上,7d后分成4组,在不同的力学条件及诱导条件下培养。8周后取材,行相关检测。结果力学诱导组形成的组织呈白色,细腻光泽,形状规则,体积无明显改变,有良好的弹性和硬度,并具有典型的软骨陷窝结构和大量软骨特异性细胞外基质,Ⅱ型胶原及丰富的聚合蛋白多糖(GAG)成分。GAG含量为(6.0±1.2)mg/g,抗压强度为(2.2±0.8)kPa,弹性模量为(7.4±1.6)kPa。各项指标均明显优于其他各组。结论力学刺激有利于促进BMSCs成软骨分化,并在三维支架材料上构建组织工程化软骨。     

妇科细胞学检查按照VCE取材及Bethesda系统报告方式的体会

既往宫颈及阴道细胞学检查一直采用巴氏分级法。１９９８年６月起我们按照ＶＣＥ取材并用Ｂｅ－ｔｈｅｓｄａ系统报告方式,至１９９９年１２月共进行１４０５例,现将体会报告如下。１ＶＣＥ取材１． １ＶＣＥ的由来 Ｖ是 Ｖａｇｉｎａ的字头,指用刮板取自阴道上１／３段侧壁处的标本;Ｃ是Ｃｅｒｖｉｘ的字头,指用刮板取自宫颈外口鳞柱交界区的标本;Ｅ是Ｅｎｄｏｃｅｒｖｉｘ的字头,指用棉棒取自宫颈管粘膜组织处的标本。分别涂在同一张玻片上,按ＥＣＶ顺序均匀涂片,立即放置在９５％乙醇中固定２０ｍｉｎ,行巴氏染色,树脂胶封片…     

肠梗阻患者的临床护理体会

目的探讨肠梗阻患者的临床护理。方法回顾性分析我院近年来收治肠梗阻患者100例的护理体会进行分析。结果保守治疗及手术治疗后科学合理的护理,均取得痊愈。结论预防术后过度的粘连的产生,保证充分有效的胃肠减压,胃肠功能恢复后合理饮食是保证康复的首要条件。     

舒芬太尼复合罗哌卡因联合分娩镇痛对产程及阴道助产率影响的研究

目的探讨舒芬太尼复合罗哌卡因联合分娩镇痛对产程及阴道助产率的影响。方法选择足月阴道分娩初产妇486例,分为分娩镇痛组362例和非无痛分娩组（对照组）124例,观察镇痛效果、镇痛药物不良反应、第一产程、第二产程时间,缩宫素使用、产钳助产、胎儿窘迫、新生儿窒息及产后出血等发生情况。结果舒芬太尼复合罗哌卡因分娩镇痛效果显著（P〈0．01）;镇痛组第一产程活跃期和第二产程时间略长于对照组,但两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;缩宫素的使用、产钳助产、胎儿窘迫、新生儿窒息及产后出血量两组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。镇痛组主要的不良反应为皮肤瘙痒,与对照组比较,差异有统计学意义（11．6％ vs 2．4%,P〈0．05）;但呕吐及运动阻滞的不良反应两组间差异无统计学意义（P〉0．05）;结论舒芬太尼复合罗哌卡因用于分娩镇痛效果好,略延长产程,但并不增加助产率。     

增强型绿色荧光蛋白转染活细胞效率的研究

目的 研究影响增强型绿色荧光蛋白(EGFP)逆转录病毒表达系统转染活细胞效率的主要相关参数,建立一种稳定高效的活细胞EGFP标记技术.方法 培养、扩增携带EGFP逆转录病毒载体的包装细胞PGl3,分别于12h、24h、36 h和48 h收集病毒液,转染骨髓基质细胞(BMSCs),通过流式细胞仪和荧光显微镜检测不同时间点病毒转染效率.选择转染率最高时间点的病毒液,连续转染BMSCs两次,小剂量嘌呤霉素筛选6h,观察病毒转染率及细胞活力.再以上述方法转染脂肪基质细胞(ADSCs)和成纤维细胞(FBs),观察这种方法标记其他干细胞或成熟分化细胞的可行性.结果 根据流式细胞仪及荧光显微镜观察结果,24h收集的病毒液转染BMSCs效率最高(64.56±2.53)％,36 h次之(56.98±3.22)％,12 h(47.39+1.82)％与48 h(37.84±1.77)％相对较低.连续转染两次并经短暂筛选后,BMSCs转染率可达80％以上,且细胞活力不受影响.采用相同方法转染脂肪基质细胞(ADSCs)和成纤维细胞(FBs),转染率均能达到80％,且细胞形态、增殖能力均未见明显改变.结论 本实验建立了一种稳定高效的活细胞EGFP转染技术,为研究组织工程种子细胞的体内、外转归及细胞间相互作用提供了稳定且直观的检测手段.     

组织工程软骨生物反应器的设计

目的 根据流体力学原理优化反应器内腔结构,并设计一套组织工程软骨生物反应器.方法 采用计算机仿真的方法对反应器内腔流场进行仿真计算,通过流场分析确定内腔结构,最终构建一套完整的生物反应器系统.结果 确定了生物反应器的内腔结构,生物反应器由控制系统和细胞培养室两部分构成,能置于培养箱中对软骨细胞材料复合物进行动态培养.结论 反应器内腔的结构是合理的.整个生物反应器系统运行可靠.     

新西兰兔肌注肉毒毒素后肌肉及神经组织超微结构的变化研究

目的:观察新西兰兔注射肉毒毒素后,局部肌肉及神经组织超微结构变化特点,为把A型肉毒毒素充分利用于临床实践提供重要的组织形态学依据及指导依据。方法:选雄性新西兰白兔32只,随机分为A组和B组,每组各16只。选择耳前肌为注射部位,右侧耳前肌注射0.05ml(2.5U)注射用A型肉毒毒素,其中A组注射新鲜配置好的A型肉毒毒素,B组注射配置后储存2周的A型肉毒毒素;左侧耳前肌注射等量生理盐水作为对照。A、B组各随机分为2组,每组8只,分别于注射后第5天和第12周进行其肌肉组织活检,对照侧同时间点取活检。行肌肉、神经组织电镜观察。结果:肌肉电镜观察结果:在注射后早期(第5天),新鲜及储存的A型肉毒毒素对肌肉的影响无显著性差异;在注射后晚期(第12周),新鲜及储存的A型肉毒毒素比较,两者造成的肌肉萎缩程度无显著性差异。神经电镜观察结果:A型肉毒毒素注射后神经改变与上述肌肉改变同。结论:通过电镜观察注射A型肉毒毒素后的局部肌肉、神经,可以理想地观察单个目的肌肉及神经的超微结构变化特点,并且发现储存2周的A型肉毒毒素与新鲜的A型肉毒毒素比较,两者效价基本相同,为A型肉毒毒素在临床开展相关研究及应用提供了新的思路。     

低密度传代培养人脂肪基质细胞的体外增殖和表面抗原表达

目的：观察低密度传代培养对人脂肪基质细胞的形态、增殖能力和表面抗原表达的影响。 方法：实验于2004-05／2006—01在上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科和组织工程研究中心完成。①吸脂术获得脂肪组织，经胶原酶消化分离。（函培养脂肪基质细胞，原代细胞80％融合后分别以5000／cm^2和1000／cm^2的接种密度传代至第3代。③四唑盐比色法和流式细胞法检测比较不同密度传代培养对细胞形态、增殖能力及表面抗原表达的影响。 结果：①低密度传代培养的细胞形态相对均一、体积较小。②四唑盐比色法结果显示低密度传代细胞增殖活力与高密度传代培养组差异无显著性。③流式细胞学检测结果表明，低密度培养组表达CD105，CD166，Stro-1，Flk-1等干细胞相关表面抗原的细胞比例显著高于高密度培养组。 结论：低密度传代培养有利于脂肪基质细胞的体外增殖，并能显著提高细胞群体中干细胞的比例，有可能发展成为一种简便的脂肪干细胞纯化方法。     

预防护理差错 保证护理质量的体会

如何预防医疗护理差错事故 ,保证医疗护理质量 ,一直是临床重视和研究的课题。护理工作中 ,发生差错事故的多少 ,是衡量护理工作质量的指标之一 ,是护士长工作中必须重视的问题。在护士长工作的实践中 ,对预防差错事故有以下一些体会。1　案例介绍例 1:一位眼科护士在值班时 ,看到 1名青光眼病人入睡困难 ,第 2ｄ将做手术 ,为了让病人休息好 ,她给了病人 2片安定 (10ｍｇ) ,结果后半夜病人眼痛剧烈 ,难以入睡。测眼压高 ,给予 2 0 %甘露醇得以缓解。大家帮助分析指出 :青光眼病人禁用安定类药物 ,此药有升高眼压的作用。由此病案得出 :作为 …