糖原累积病Ⅰa型患儿20例基因突变分析与临床研究

目的 研究糖原累积病Ⅰa型(GSD Ⅰ a)患儿葡萄糖-6-磷酸酶催化亚单位基因(G6PC基因)突变情况,探讨基因型与临床表型之间的关系.方法 依据临床表现、生化检查及饥饿试验、胰高血糖素刺激试验结果,拟诊出48例肝糖原累积病(LGSD)患儿;应用PCR反应直接测序的方法,对疑似LGSD患儿的G6PC基因外显子及其相邻区域进行突变检测.采用50例无血缘关系的健康儿童作为健康对照,以排除基因多态性;使用DNAMAN软件进行多物种序列同源性比较分析,确定其是否具有保守性.结果 48例LGSD患儿中检测到20例患儿存在G6PC基因突变,共检测到8种突变类型,包括1种剪切突变:c.648G＞T,5种错义突变:p.R83H、p.H119L、p.L173P、p.I341N、p.C109Y和2种移码突变:c.262delG、c.260-262delGGinsA.其中c.648G＞T、p.R83H是本组研究最常见的突变,突变频率分别为37.50％、22.50％;p.C109Y、c.260-262delGGinsA为新发突,41.67％(20/48例)拟诊为LGSD的患儿通过G6PC基因分析确诊为GSD Ⅰ a.从临床表现及常规实验室检查分析,20例GSD Ⅰ a患儿均表现为肝大、肝功能异常、高乳酸血症、高三酰甘油血症,88.24％(15/17例)的患儿饥饿试验阳性,82.35％(14/17例)患儿对胰高血糖素刺激试验无反应.结论 c.648G＞T、p.R83H为本组GSD Ⅰ a患儿最常见突变类型,p.C109Y、c.260-262delGGinsA为国内外尚未见报道的新发致病突变.GSDⅠa基因型不同的患儿均有相似的典型LGSD临床表现.     

0～6岁健康儿童干血滤纸片中游离肉碱和酰基肉碱水平研究

目的通过对0~6岁健康儿童干血滤纸片中游离肉碱和酰基肉碱水平的检测,对儿童体内游离肉碱及酰基肉碱水平进行了统计分析,为脂肪酸代谢障碍性疾病和有机酸血症诊断提供生物参考区间。方法应用同位素稀释非衍生化串联质谱法对广州地区263例健康儿童的外周血干血滤纸片酰基肉碱进行检测。将所有儿童分成男、女两组;根据年龄分为分4个组:年龄0~28d,孕周≥37周;年龄0~12月;年龄0~3岁;年龄0~6岁。结果进行正态性检验后发现,儿童的游离肉碱和酰基肉碱水平呈正态分布。男性儿童组与女性儿童组的游离肉碱和各种酰基肉碱水平差异无统计学意义(t=0.5,P=0.619)。C4、C5、C6、C10、C12、C18各年龄组间方差齐(P0.05),可进行单因素方差分析;C0、C2、C3、C5-OH、C8、C14、C16方差不齐(P0.05),进行秩和检验。C0、C2、C3、C5-OH、C6、C8、C10、C12、C14、C16、C18不同年龄组水平差异有统计学意义,按不同年龄计算参考值范围。C4、C5差异无统计学意义可合并组计算参考值范围。结论根据年龄的不同建立儿童干血滤纸片游离肉碱和酰基肉碱含量参考值范围对于脂肪酸代谢障碍和有机酸血症疾病的诊断、治疗十分重要。     

Citrin蛋白缺陷所致新生儿肝内胆汁淤积症酰基肉碱谱分析

目的分析新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)患儿的酰基肉碱谱,了解NICCD患儿脂肪酸代谢特点。方法收集经临床及SLC25A13基因突变分析确诊的25例NICCD患儿治疗前空腹血浆,采用液相色谱串联质谱技术检测血浆游离肉碱与酰基肉碱谱,并根据各种肉碱与酰基肉碱及其同位素内标离子峰的强度,由已知浓度的内标,自动计算出所测样品酰基肉碱浓度;以100例正常健康儿童作为对照进行分析比较。结果 NICCD患儿治疗前血浆游离肉碱、长链酰基肉碱水平明显高于正常健康儿童,中链酰基肉碱水平明显低于正常健康儿童,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论NICCD患儿存在脂肪酸代谢异常,血浆游离肉碱、长链酰基肉碱水平升高,中链酰基肉碱水平下降。     

气相色谱-质谱联用技术在3-羟基-3-甲基戊二酸尿症诊断中的应用

目的 建立尿素酶预处理气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)定量检测3-羟基-3-甲基戊二酸的方法,用于临床鉴别诊断3-羟基-3-甲基戊二酸尿症(3-HMG).方法 尿3-羟基-3-甲基戊二酸经尿素酶预处理,残余物进行三甲基硅烷化(BSTFA-TMCS)衍生,衍生化后进行GC-MS测定分析,采用总离子扫描模式进行检测.3-羟基-3-甲基戊二酸存在2种衍生化形式,即2个硅烷化(di-TMS)和3个硅烷化(tri-TMS)形式,分别选择特征离子m/z 175(di-TMS)和363(tri-TMS)为定量离子,内标十七烷酸选择特征离子m/z 327为定量离子.分析该法精密度、稳定性、样本回收率.用该法检测10例代谢性酸中毒、低血糖、未伴酮症、高度怀疑3-HMG的患儿尿样.结果 3-羟基-3-甲基戊二酸定量范围为6.17 ～1 234.56μmol·L-,线性方程为Y =0.284 3X-0.003,线性相关系数为0.998 6,低、中、高水平批内变异系数为2.17％、7.79％、5.78％;批间变异系数为4.19％、4.73％、9.24％;回收率为88.25％～108.47％.诊断3-HMG 1例,尿3-羟基-3-甲基戊二酸水平为219.86 mmol·mol-1肌酐.结论 尿素酶预处理GC-MS测定尿3-羟基-3-甲基戊二酸具有较高的回收率、精密度和准确性,可为临床诊断3-HMG提供参考依据.     

上皮型钙黏蛋白在子宫内膜异位症患者血清中的表达及意义

目的探讨血清上皮型钙黏蛋白(E-cad)在子宫内膜异位症血清中的表达及在诊断和预后评估中的作用。方法以酶联免疫法检测不同分期和术前术后的子宫内膜异位症患者、对照组血清中E-cad的含量,并分别进行比较。结果子宫内膜异位症组血清中E-cad含量较对照组明显升高(P<0.05);Ⅲ、Ⅳ期子宫内膜异位症患者血清中E-cad水平高于Ⅰ、Ⅱ期,但差异无统计学意义(P>0.05);术后1个月血清中E-cad水平低于术前(P<0.05)。结论E-cad在内异症发病中可能起一定的作用;其血清水平在子宫内膜异位症患者明显升高,虽与疾病严重程度无关,但与预后密切相关。     

血浆酰基肉碱分析在遗传代谢缺陷病筛查诊断中的应用

肉碱在脂肪酸β-氧化代谢以及调节细胞内外游离辅酶A中发挥重要作用.大部分脂肪酸β-氧化代谢障碍和某些有机酸血症会蓄积异常的酰基肉碱,因此通过血浆酰基肉碱分析可检测出20多种先天性遗传代谢病.现主要综述引起血浆酰基肉碱异常的相关疾病及血浆酰基肉碱分析在遗传代谢缺陷病筛查诊断中的应用.     

糖原累积病Ib型患儿基因突变分析与临床研究

目的：糖原累积病Ib型（GSDIb）是由于SLC37A4基因突变引起葡萄糖-6-磷酸转移酶（G6PT）活性缺陷所致,该病患者大部分有反复感染及炎症性肠病的发生,预后较差。SLC37A4基因的检测对GSDIb患者的诊断、分型、预测患者的预后尤为重要。本文旨在研究糖原累积病Ib型患儿SLC37A4基因突变的情况,探讨基因型与临床表型的关系。方法：应用聚合酶链反应直接测序的方法,对拟诊GSDIb型的28例患儿行SLC37A4基因外显子及其相邻区域的突变筛查。结果：7例患儿检测到SLC37A4基因突变,检出率为25% (7/28例),包括错义突变：p.Gly149Glu（9/13,69%）、p.Gly115Arg（1/13,8%）、p.Pro191Leu（1/13,8%）;移码突变：c.959-960 insT（1/13,8%）;剪接突变：c.870+5G>A（1/13,8%）。结论：c.959-960 insT为新突变,p.Gly149Glu为本研究最常见的突变,p.Gly149Glu突变可能与患儿的严重感染相关。     

143例Citrin缺陷导致新生儿肝内胆汁淤积症患儿的血浆氨基酸谱分析

目的 探讨Citrin缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)患儿血浆氨基酸谱特点及氨基酸谱与基因型的相关性.方法 选取2004-2019年在该院确诊的NICCD患儿143例为NICCD组,56例健康新生儿为对照组,49例不明原因肝内胆汁淤积症(INH)患儿为INH组,对3组的各氨基酸水平进行比较,并采用受试者工作...     

17例Noonan综合征临床表型与基因型特点

目的：为了增进对Noonan综合征(Noonan syndrome,NS)的认识,本文分析和总结了17例NS患儿的临床特点及基因分析结果。方法：回顾性分析2015年10月至2021年2月在广州市妇女儿童医疗中心诊断的17例NS患儿临床资料,通过全外显子联合Sanger测序分析基因变异类型。结果：17例NS患儿中男11例、女6例,诊断中位年龄4岁(5个月～11岁10个月)。17例患儿均具有典型特殊面容,伴有不同程度的精神运动发育迟缓;16例患儿就诊时身高身高标准差评分(standard deviation scores,SDS)<-2;3例有隐睾,3例有漏斗胸,3例有鸡胸,2例有头发卷曲。8例检出心脏结构异常,其中肺动脉瓣狭窄伴房间隔缺损3例,房间隔缺损2例,肺动脉瓣狭窄1例,动脉导管未闭伴二尖瓣脱垂并轻度关闭不全1例,室间隔与左室壁不均匀增厚1例。5例检出PTPN11基因突变;4例检出BRAF基因突变;3例检出KRAS基因突变;2例检出SHOC2基因突变,1例检出RAF1基因突变,1例检出CBL基因突变,1例检出SOS1基因突变。其中4个为新突变：PTPN11基因突变p.R4G和...