亚硒酸钠、硫酸镁对石英致细胞因子释放和羟脯氨酸合成影响的体外研究

[目的]观察亚硒酸钠(Na_2SeO_3)、硫酸镁(MgSO_4)对二氧化硅(石英)致巨噬细胞(RAW264.7)释放肿瘤坏死因子(TNF-a)、白介素-1(IL-1)的单独拮抗作用以及对人胚肺成纤维细胞羟脯氨酸(Hyp)合成水平变化的单独以及联合拮抗作用。[方法]对数生长期的RAW264.7细胞,调整浓度为2×10~5个/ml。在染200mg/L石英同时单独加入不同浓度Na_2SeO_3、MgSO_4溶液,24h后测定培养液中TNF和IL-1水平,并取培养液与人胚肺成纤维细胞共同培养,48h后测定人胚肺成纤维细胞培养液中Hyp含量。另外,在染石英同时联合加入不同浓度的Na_2SeO_3和MgSO_4溶液,培养24h后取培养液与人胚肺成纤维细胞共同培养,48h后测定其中的Hyp含量。[结果]①与石英组比,Na_2SeO_3对RAW264.7细胞释放TNF-α无明显影响,MgSO_4可以显著降低TNF-α的活性(P<0.05),其中以1.0μmol/L MgSO_4的效果更为明显。②与石英组比,一定剂量的Na_2SeO_3、MgSO_4可以降低IL-1的活性,其中以0.5μmol/L Na_2SeO_3和2.0μmol/L MgSO_4的效果最好(P<0.05)。③与石英组比,一定剂量的Na_2SeO_3、MgSO_4可以显著降低人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平(P<0.05),其中以2.0μmol/L Na_2SeO_3和2.0μmol/L MgSO_4的效果最明显。④与石英组比,一定剂量的Na_2SeO_3与MgSO_4联合可以降低人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平,其中以2.0μmol/L Na_2SeO_3和2.0μmol/L MgSO_4联合作用效果最明显(P<0.05)。[结论]一定剂量的MgSO_4对石英致巨噬细胞释放TNF-α具有拮抗作用;一定剂量的Na_2SeO_3和MgSO_4对石英致巨噬细胞释放IL-1具有单独拮抗作用,对人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平具有单独及联合拮抗作用。     

硒锰对二氧化硅致巨噬细胞某些抗氧化指标变化的影响

目的 观察亚硒酸钠(Na2SeO3)与氯化锰(MnCl2)单独及联合作用对二氧化硅(SiO2)致肺泡巨噬细胞(AM)超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)及过氧化氢酶(CAT)水平变化的影响,寻找两者的最佳剂量组合.方法 采用大鼠肺灌洗法纯化获得AM(1×1012个/L),同时加入SiO2及不同浓度的Na2SeO3溶液、MnCl2溶液、Na2SeO3 MnCl2溶液,37 ℃,5%CO2培养箱培养18 h后,检测MDA、H2O2含量、SOD及CAT活力.结果 Na2SeO3与MnCl2单独及两者联合使用均具有拮抗SiO2细胞毒性作用.且以1.0 μmol/L Na2SeO3与1.00 mg/L MnCl2联合作用效果最好.结论 Na2SeO3与MnCl2单独及两者联合应用在体外可有效拮抗SiO2粉尘的细胞毒性作用,降低AM的MDA、H2O2含量,同时升高SOD及CAT活力,两者合用效果更佳.     

硒和镁拮抗二氧化硅致肺泡巨噬细胞氧化损伤的研究

目的:观察亚硒酸钠与硫酸镁单独及联合应用对染尘肺泡巨噬细胞丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)及过氧化氢酶(CAT)水平变化的影响,寻找二者的最佳剂量组合。方法:采用大鼠肺灌洗法纯化获得肺泡巨噬细胞(1×109L-1),同时加入S iO2及不同浓度的亚硒酸钠溶液、硫酸镁溶液、亚硒酸钠+硫酸镁溶液,于37℃、5%CO2培养条件下培养18 h后,检测MDA、H2O2含量及CAT活性。结果:亚硒酸钠与硫酸镁单独以及两者联合应用都可以使S iO2染毒的肺泡巨噬细胞MDA及H2O2含量下降,CAT活性有所增高,且以1.0μmol.L-1亚硒酸钠与1.0μmol.L-1硫酸镁联合作用效果最好。结论:亚硒酸钠与硫酸镁在体外可有效拮抗S iO2粉尘的细胞毒性作用,二者合用效果更佳。     

硒镁联合作用对SiO2致肺泡巨噬细胞NO、NOS水平变化的影响

[目的]观察亚硒酸钠(Na2SeO3)与硫酸镁(MgSO4)单独及联合作用对二氧化硅(SiO2)致肺泡巨噬细胞(AM)一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)水平变化的影响,寻找二者的最佳剂量组合.[方法]采用大鼠肺灌洗法纯化获得肺泡巨噬细胞(1×109个/L),同时加入SiO2及不同浓度的MgSO4溶液、Na2SeO3溶液、Na2SeO3 MgSO4溶液,37℃,5%CO2条件下培养18h后,检测NO含量与NOS活性.[结果]与SiO2组比较,Na2SeO3与MgSO4单独及联合使用在体外均可以降低巨噬细胞NO水平及NOS活性(P<0.05),Na2SeO3与MgSO4的交互作用具有统计学意义,且以1.0μmol/L Na2SeO3与1.0μmol/L MgSO4联合作用效果最好.[结论]Na2SeO3与MgSO4二者联合应用在体外可明显降低SiO2粉尘所致AM的NO水平和NOS的活性.     

锌和硒拮抗二氧化硅致人胚肺成纤维细胞羟脯氨酸合成的实验研究

目的:观察葡萄糖酸锌(ZnG)和亚硒酸钠(Na2SeO3)对人胚肺成纤维细胞羟脯氨酸(Hyp)合成水平的单独以及联合拮抗作用。方法:用RAW264.7细胞和人胚肺成纤维细胞分别于37℃、5%CO2培养箱进行培养,RAW264.7细胞在细胞生长对数期时加入二氧化硅(SiO2),同时加入不同浓度ZnG、Na2SeO3的溶液,24 h后取RAW264.7细胞培养液与人胚肺成纤维细胞共同培养,作用48 h后测人胚肺成纤维细胞培养液中Hyp含量。结果:ZnG、Na2SeO3单独与联合作用均可以显著降低人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平(P<0.05),其中以ZnG 2.25 mg/L和Na2SeO32.0μmol/L浓度的单独与联合作用效果最明显。结论:一定剂量的ZnG、Na2SeO3对SiO2致人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平具有单独以及联合拮抗作用。     

葡萄糖酸锌和氯化锰对二氧化硅致CHL细胞间隙连接通讯功能下调的影响

目的观察葡萄糖酸锌(ZnG)、氯化锰(MnCl2)及其联合作用对二氧化硅(SiO2)致中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)间隙连接通讯(GJIC)功能下调的影响,并寻找两者的最佳剂量组合。方法常规培养CHL细胞,按实验分组:生理盐水对照组(阴性对照组);SiO2组(100 mg/L);ZnG组(2.25 mg/L);MnCl2组(1.00 mg/L);SiO2 ZnG组(培养液除含100 mg/L SiO2外,分别含1.00,1.50,2.25 mg/L ZnG);SiO2 MnCl2组(培养液除含100 mg/L SiO2外,分别含0.25,0.50,1.00 mg/L MnCl2);ZnG和MnCl2联合作用组(每组除含SiO2100 mg/L外,采用两因素三水平正交设计,ZnG MnCl2共设9个浓度组)。培养6 h后通过划痕染料示踪技术(SLDT)观察成纤维细胞通讯连接功能。结果与SiO2组比较,ZnG和MnCl2在一定的浓度下可以减轻SiO2对中国仓鼠肺成纤维细胞通讯连接功能抑制作用(P<0.05);ZnG(1.50 mg/L)与MnCl2(0.50 mg/L)联合作用效果最好。结论ZnG,MnCl2及二者联合在体外可减轻SiO2粉尘对中国仓鼠肺成纤维细胞通讯连接功能的抑制作用。     

锌和硒拮抗二氧化硅致人胚肺成纤维细胞羟脯氨酸合成的实验研究

目的:观察葡萄糖酸锌(ZnG)和亚硒酸钠(Na2SeO3)对人胚肺成纤维细胞羟脯氨酸(Hyp)合成水平的单独以及联合拮抗作用.方法:用RAW264.7细胞和人胚肺成纤维细胞分别于37℃、5%CO2培养箱进行培养,RAW264.7细胞在细胞生长对数期时加入二氧化硅(SiO2),同时加入不同浓度ZnG、Na2SeO3的溶液,24 h后取RAW264.7细胞培养液与人胚肺成纤维细胞共同培养,作用48 h后测人胚肺成纤维细胞培养液中Hyp含量.结果:ZnG、Na2SeO3单独与联合作用均可以显著降低人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平(P＜0.05),其中以ZnG 2.25 mg/L和Na2SeO3 2.0 μmol/L浓度的单独与联合作用效果最明显.结论:一定剂量的ZnG、Na2SeO3对SiO2致人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平具有单独以及联合拮抗作用.     

锌硒锰镁联合拮抗二氧化硅致肺泡巨噬细胞毒性的作用

[目的]观察葡萄糖酸锌（ZnG）、亚硒酸钠（Na2SeO3）、氯化锰（MnCl2）和硫酸镁（MgSO4）联合作用对二氧化硅（SiO2）致肺泡巨噬细胞（AM）中过氧化氢（H2O2）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）水平变化的影响，寻找4者的最佳剂量组合。[方法]采用大鼠肺灌洗法纯化获得AM（1×10^9个／mL），同时加入SiO2及不同浓度的ZnG＋Na2SeO3＋MnCl2＋MgSO4溶液组合，另设不加组合溶液的SiO2对照组和阴性对照组。37℃，5％CO2培养箱培养18h后，检测上述5种指标。[结果]与SiO2对照组比较，ZnG、Na2SeP3、MnCl2与MgSO4联合使用均可明显降低AM中H2O2、MDA含量，升高GSH—Px、SOD和CAT的活性（P〈0．01），且以1．5mg／L的ZnG、1．0μmol／L的Na2SeO3、1．0mg／L的MnCl2、和0．5μmol／L的MgSO4联合作用效果最好。极差分析结果表明，对GSH—Px、SOD的影响，Na2SeO3的作用强于ZnG、MnCl2和MgSO4；对H2O2、MDA的影响，ZnG的作用强干Na2SeO3、MnCl2与MgSO4；对CAT的影响，MnCl2、ZnG的作用则要强于Na2SeO3与MgSO4。[结论]ZnG、Na2SeO3、MnCl2与MgSO4联合应用可明显拮抗SiO2粉尘所致AM的氧化损伤。     

葡萄糖酸锌和硫酸镁拮抗二氧化硅细胞毒性作用的研究

目的:观察葡萄糖酸锌与硫酸镁单独及联合作用对二氧化硅致肺泡巨噬细胞丙二醛、超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶水平变化的影响,寻找二者的最佳剂量组合。方法:采用大鼠肺灌洗法纯化获得肺泡巨噬细胞(1×109个/L),同时加入二氧化硅及不同浓度的葡萄糖酸锌溶液、硫酸镁溶液、葡萄糖酸锌与硫酸镁溶液,37℃,5%CO2培养箱培养18h后,检测丙二醛、超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶含量。结果:葡萄糖酸锌与硫酸镁单独作用,以及两者联合使用都具有拮抗二氧化硅细胞毒性作用。且以1·5mg/L葡萄糖酸锌的与2·0μmol/L硫酸镁联合作用效果最好。结论:葡萄糖酸锌与硫酸镁单独及二者联合应用在体外可有效拮抗二氧化硅粉尘的细胞毒性作用,降低肺泡巨噬细胞的丙二醛含量,升高巨噬细胞的超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶的活力,二者合用效果更佳。     

锌镁拮抗二氧化硅致成纤维细胞DNA损伤的实验研究

目的观察葡萄糖酸锌(ZnG)、硫酸镁(MgSO4)及两者联合作用对二氧化硅(SiO2)致中国仓鼠肺(CHL)成纤维细胞DNA损伤的的影响,寻找两者的最佳剂量组合。方法常规培养CHL成纤维细胞,按实验分组:①生理盐水对照组(阴性对照);②SiO2组:含SiO2100 mg/L;③ZnG(2.25 mg/L)组;④MgSO4(2.0μmol/L)组;⑤SiO2 ZnG组:内含100 mg/L SiO2外,含ZnG 1.0、1.5、2.25 mg/L;⑥SiO2 MgSO4组:内含100 mg/LSiO2外,含MgSO40.5、1.0、2.0μmol/L;⑥ZnG、MgSO4联合作用组:每组内含SiO2100 mg/L外,采用2因素3水平正交设计,ZnG MgSO4共设9个剂量组。培养2 h后收获细胞,通过彗星试验检测CHL成纤维细胞DNA损伤情况。结果与SiO2组比,ZbG、MgSO4可以显著减轻SiO2致DNA链断裂作用(P<0.05);1.5 mg/L ZnG与2.0μmol/L MgSO4联合作用效果最好。结论ZnG、MgSO4及两者联合应用在体外可有效减轻SiO2粉尘致CHL成纤维细胞的DNA损伤作用。