GPSM2过表达对人胰腺癌细胞迁移能力的影响

目的:构建G蛋白信号调节蛋白2(GPSM2)稳定高表达的胰腺癌细胞株,探讨GPSM2与人胰腺癌细胞迁移能力的关系。方法:构建GPSM2基因过表达质粒(pCMV-Tag3B-GPSM2)并鉴定,将人胰腺癌MIA-PaCa-2细胞分别转染pCMV-Tag3B-GPSM2(GPSM2转染组)或p CMV-Tag3B空载体(阴性对照组),以无处理的MIA-Pa Ca-2细胞为空白对照,用RT-PCR检测各组细胞GPSM2 mRNA表达;Westernblot检测各组细胞GPSM2、β-连环蛋白(β-catenin)的表达;用Transwell实验检测各组胰腺癌细胞迁移能力。结果:成功构建了GPSM2稳定高表达的重组细胞株。与空白对照组比较,GPSM2转染组细胞GPSM2 mRNA表达量明显上调,达前者73.3倍、GPSM2、β-catenin蛋白表达量明显升高、迁移细胞计数明显增加(均P0.05)。此外,胰腺癌细胞中GPSM2与β-catenin的表达水平呈明显的正向线性关系(P0.05)。阴性对照组与空白对照组间各指标的差异均无统计学意义(均P0.05)。结论:上调胰腺癌细胞中GPSM2的表达能增加胰腺癌细胞的迁移能力,该作用可能与β-catenin蛋白表达升高有关。     

应用肿瘤数据库信息分析HMCN1基因在胃腺癌中的表达及其作用机制

目的: 通过对癌症基因图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)等相关数据库的信息挖掘,研究HMCN1基因在胃腺癌中的表达,探讨其与胃腺癌发生发展的潜在机制。方法: 获得Cbioportal在线分析TCGA数据库中289例胃腺癌患者的RNA数据,结合患者的生存时间信息,应用Kaplan-Meier法分析HMCN1变异与胃腺癌患者生存之间的关系。利用基因表达谱动态分析（GEPIA）数据库信息,搜索HMCN1 mRNA在正常胃腺组织与胃腺癌组织表达的区别,分析其在不同病理分期中的表达情况。应用Genecards数据库收集与HMCN1基因的相关蛋白,绘制HMCN1相关蛋白网络图,对相关蛋白进行富集分析,分析蛋白富集的信号通路、生理过程及关键下游蛋白。结果： 289例胃腺癌中有66例(23%)发生HMCN1基因突变,HMCN1变异组总生存时间长于无变异组（P=0.015 3),变异组无病生存时间与无变异组生存时间差异无统计学意义(P=0.052 3)。胃腺癌组织中HMCN1 mRNA表达明显高于正常胃腺组织;与HMCN1相关的蛋白有CTDSPL、DDX1、CLP1、CFB等25个,其中CTDSPL蛋白在胃腺癌中表达降低,相关蛋白富集分析得到Wnt信号通路、Hippo信号通路、丝氨酸型内肽酶活性通路等细胞组织生理活动。 结论： 胃腺癌组织中HMCN1 mRNA呈高表达,其可能通过促进CTDSPL蛋白降解发挥抑癌基因的作用。     

长链非编码RNA在脂多糖刺激的大鼠肠巨噬细胞中的差异表达

目的:探讨脂多糖(LPS)诱导的肠巨噬细胞炎症反应与长链非编码RNA(lncRNA)表达的关系。方法:分离培养大鼠肠巨噬细胞,用lncRNA表达谱芯片技术检测LPS处理的大鼠肠巨噬细胞(实验组)和无处理的大鼠肠巨噬细胞(对照组)之间差异表达的lncRNA,并用分层聚类的方法分析了基因芯片数据;构建差异表达的lncRNA-mRNA共表达网络,利用GO分析和通路分析预测其生物学功能;最后用RT-qPCR对部分差异表达的lncRNA进行验证。结果:与对照组比较,实验组共检测出357个差异表达的lncRNA(差异表达倍数1.5),其中上调的有245个,下调的有112个。GO分析和通路分析显示差异表达的lncRNA参与多种生物过程,包括炎症反应,免疫应答和细胞凋亡,其中lncRNA NONMMUT024673、NONMMUT047081在网络中可能起重要作用。RT-qPCR验证NONMMUT024673、NONMMUT047081的表达,结果与基因芯片数据一致。结论:LPS可诱导大鼠肠巨噬细胞lncRNA表达改变,这些差异表达的lncRNA可能参与调控LPS诱导的肠巨噬细胞的炎症反应。     

胰腺癌组织FOXC2的表达及其与预后的关系

目的: 探讨叉头框C2(forkhead box C2,FOXC2)在胰腺癌中的表达及其与胰腺癌患者预后的相关性。方法: 利用Oncomine数据库分析FOXC2 mRNA在胰腺癌及癌旁组织中的表达;收集112例胰腺患者癌组织及相应癌旁组织,采用qRT-PCR和免疫组织化学染色检测FOXC2的表达,并分析其与临床病理参数的关系。应用Kaplan-meier法分析FOXC2表达对患者生存时间的影响。结果： Oncomine数据库中FOXC2 mRNA在胰腺癌癌组织中表达明显高于癌旁组织(t_Badea=4.074,t_Pei= 3.741,P均<0.05);FOXC2蛋白主要表达于胰腺癌细胞胞核,且癌组织免疫组化评分明显高于癌旁组织( t=7.571,P<0.05);FOXC2 mRNA在胰腺癌组织中表达明显高于癌旁组织( t=13.79,P<0.05);有淋巴结转移的癌组织中FOXC2阳性表达率高于无淋巴结转移的癌组织(χ ² =16.998,P<0.01),胰腺癌Ⅲ期FOXC2阳性表达率高于Ⅰ期( χ 2=15.688,P<0.001)和Ⅱ期( χ ²=10.678,P=0.001)。FOXC2阳性组胰腺癌患者的中位生存时间显著短于阴性组( χ ²=10.32,P=0.001 3),FOXC2阳性表达(HR=2.569,P=0.003)可作为预测胰腺癌预后的独立因素。 结论： FOXC2在胰腺癌组织中呈高表达,且与胰腺癌患者的预后高度相关。     

YEATS域含蛋白质4在胰腺癌组织中的表达及预后意义

目的:探讨YEATS域含蛋白质4(YEATS4)胰腺癌组织中的表达及其与临床意义。方法:用手术切除且病理确诊的80例胰腺癌组织及对应癌旁组织标本构建组织芯片,利用免疫组织化学技术检测YEATS4在胰腺癌及癌旁组织中的表达情况。分析胰腺癌组织中YEATS4的表达与胰腺癌临床病理特征及胰腺癌患者预后的关系。结果:免疫组化结果显示,YEATS4在胰腺癌组织中的阳性表达率明显高于相应癌旁组织(56.25%vs.26.25%,P0.05)。YEATS4的阳性表达与胰腺癌患者的性别(P=0.037)、TMN分期(P0.001)、神经转移(P=0.006)、淋巴结转移(P0.001)以及脉管侵犯(P=0.042)明显有关。全组患者中YEATS4蛋白阴性表达患者生存率明显高于其阳性表达患者(χ~2=7.593,P=0.0059);亚组分析显示,YEATS4蛋白与不良预后的关系仅明显存在于TMN III/IV期、淋巴结转移、神经转移和脉管侵犯患者中(均P0.05)。YEATS4表达是胰腺癌患者预后的独立危险因素(HR=2.1,95%CI=1.1～4.2,P=0.026)。结论:YEATS4在胰腺癌中的表达量升高,可能参与了胰腺癌的进展,并可能是胰腺癌治疗的潜在预后标记和治疗靶点。