从人外周血B淋巴细胞中应用PCR扩增人抗体基因

本文用常规ＰＣＲ法和半套式ＰＣＲ法，以一组人抗体重链和轻链引物，直接从人外周血淋巴细胞中扩增出抗体重链Ｆｄ基因和轻链基因。一些常规ＰＣＲ法不能直接扩增的人抗体基因，用半套式ＰＣＲ法扩增却得到了阳性结果。扩增的抗体基因的分子量与国内外同类报道一致。本文结果提示，在建立抗体基因文库时，半套式ＰＣＲ法能进一步丰富扩增的抗体基因的多样性     

半套式PCR和DNA探针技术检测Q热立克次体

目的 建立半套式PCR和DNA探针技术由于检测Q热立克次体。方法 依据已知的Q热立克次体的16S和23S rRNA基因及其间区的序列。设计3条引物,建立了扩增16S－23S mRNA基因间区的半套式PCR方法,并将扩增片段制成探针,建立了斑点杂交技术。结果 10株Q热立克次体分离株均可扩增出572bp的PCR条带,而对照菌都为阴性,此半套式PCR方法的灵敏度高达1pg;用九里株扩增片段标记后制成的探针,与10个Q热立克次体分离株的全DNA呈阳性杂交,对照菌为阴性,此杂交方法的灵敏度为0．5ng。结论 基于Q热立克次体16S－23S rRNA基因间区的半套式PCR和DNA探针技术具有较好的特异性和灵敏度,可联合应用于Q热的病原学诊断。     

HAV噬菌体抗体特异性的鉴定

ＨＡＶ噬菌体抗体特异性的鉴定万泽生王海涛姜绍谆近年出现的噬菌体抗体库技术，使人们能够不经过细胞融合，采用基因工程的方法，从人外周血淋巴细胞ＩｇｍＲＮＡ直接制备抗体。我们利用这一技术，已成功地构建了噬菌体抗体库〔１〕。本文报道从库中筛选具有抗甲肝病毒（...     

从人源性噬菌体抗体库中筛选人抗HBsAg的Fab噬菌体抗体(摘要)

目的:从人源性噬菌体抗体库中筛选人抗HBsAg Fab噬菌体抗体。方法:用固相化HBsAg对所构建的噬菌体抗体库进行三轮淘筛,从中筛选人抗HBsAg Fab噬菌体抗体。材料:①SB培养基:每升培养基含细菌培养用胰化蛋白胨30g,酵母提取物20g,Mops 1g,pH7.0。②SOC培养基:每升培养基含细菌培养用胰化蛋白胨20g,酵母提取物5g,NaCl 0.5g,250mmol/L KCl溶液10ml,pH7.0。临用前加入2mol/L MgCl_2溶液5ml和1mol/L葡萄糖溶液20ml。③血源纯化HBsAg。④     

PEA单抗相对亲和力及抗原结合位点的测定

用绿脓杆菌外毒素Ａ（ＥＰＡ）免疫后的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞，经融合后制备出４株抗ＰＥＡ的单克隆抗体。从５０％最大结合的单克隆抗体浓度分析可知，４株单克隆抗体的相对亲和力为４Ｄ１－４Ｄ３〉１Ｄ１－５Ｆ１１〉１Ｄ７－４Ｃ１０〉４Ｈ５－３Ｅ９。通过ＥＬＩＳＡ相加实验证实：４株单克隆抗体均识别相同的ＰＥＡ抗原位点。     

寓德育于智育之中

教师是人类灵魂的工程师。学生的思想品德、智力和体魂状况,在相当程度上决定于教师的工作。学生在校期间,约有4/5以上的时间和教师在一起,学生的思想问题大部分是通过学习反应出来的。针对这一特点,我们在搞好教学工作同时,注意结合专业内容,将思想工作渗透到教学中去。我们的体会主要是: 一、谈成就,树立专业思想我们的学生是经过严格考试和政审选拔上来的,他们一般都有比较明确的学习目的。但是,由于     

用半套式PCR扩增人外周血B淋巴细胞的HgVH基因

以Ａｎｇｒａｙ ＳＫ和自行设计的引物作半套式ＰＣＲ，成功地从人外周血Ｂ淋巴细胞中扩增出Ｉｇ重链可变区基因。扩增产物的分子量为６６０ｂｐ左右。该文结果提示，在建立全套抗体基因文库时，半套式ＰＣＲ法能较好地解决Ｉｇ可变区基因多样性的扩增问题。     

从人源性噬菌体抗体库中筛选人抗HBsAg的Fab噬菌体抗体

目的从人源性噬菌体抗体库中筛选人抗HBsAgFab噬菌体抗体。方法用固相化HBsAg对所构建的噬菌体抗体库进行三轮淘筛,从中筛选人抗HBsAgFab噬菌体抗体。结果第三轮淘筛后洗脱下来的噬菌体,较第一轮增加80倍,含有抗体轻链基因和重链基因的克隆,也由淘筛前的17%增至100%,经ELISA证实,筛选到的抗HBsAg噬菌体抗体对HBsAg具有良好的结合活性,而与牛血清白蛋白和HAVAg等无关抗原均不反应。结论HBsAg对抗体库的淘筛,富集了表面呈现抗HBsAg的单克隆抗体的噬菌体。