基于sacB负筛选标记的Targetron质粒分析系统构建北大核心CSCD

目的构建基于sacB负筛选标记的Targetron质粒分析系统。方法构建sacB毒蛋白诱导表达受体质粒pACYC-sacB(携带p15A复制子),分析sacB毒蛋白对大肠埃希菌的毒性。设计sacB基因打靶位点,构建脱水四环素诱导的Targetron供体质粒pSY11-sacB(携带colE1复制子和sacB405a打靶位点)。双质粒共转化大肠埃希菌BL21(DE3),脱水四环素诱导Targetron表达并对sacB基因进行打靶。涂布含有5%蔗糖和0.1 mmol/L IPTG的选择培养基,筛选sacB基因失活的阳性菌落,利用菌落PCR进一步验证Ⅱ型内含子在靶位点的插入情况。结果sacB基因表达的大肠埃希菌不能在含有5%蔗糖的平板中生长;双质粒共转化后,脱水四环素诱导Targetron表达能够插入到sacB405a靶位点;sacB基因失活后,大肠埃希菌能够在含有5%蔗糖的平板上生长,菌落PCR验证内含子插入到DNA靶位点。结论建立了基于sacB负筛选标记的Targetron质粒分析系统,为Ⅱ型内含子功能鉴定、迁移规律分析等奠定了基础。     

改良的细菌荚膜染色法

荚膜(capsule)是某些细菌细胞壁外的一层黏液性物质,其厚度≥0.2 μm且边界明显.通常认为荚膜与细菌的致病性有关,在细菌鉴定中有重要意义.传统的细菌荚膜染色法有Hiss法、Muir法、墨汁负染法以及常用的吕氏美蓝染色法等,但这些荚膜染色法的染色效果往往不够理想[1～4].改良荚膜染色法是在吕氏美蓝染色法的基础上进行改良,染色效果良好,现报告如下.     

慢性胆囊炎胆囊结石细菌L型感染的诊断与治疗观察

目的：探讨胆囊细菌L型感染的临床诊断与临床治疗。方法：选择胆囊细菌L型感染的抗菌药物对外科手术前的胆囊炎胆囊结石者进行治疗，手术中采集胆囊标本进行细菌及其L型的分离培养和检测胆汁的抗菌药物活性。结果：接受红霉素或氟哌酸治疗患者的胆囊标本中细菌L型的检出率明显低于接受青霉素治疗的患者，氟哌酸治疗前且胆汁内具有抗菌药物活性者，细菌L型的检出率也显著低于胆汁没有抗菌药物活性的患者，结论：合理使用细菌L型感染并且能够进入胆囊的抗菌药物，将能够有效杀灭胆囊内的细菌及其L型，有利于控制慢性胆囊炎病情的发展或胆囊结石的形成。     

医学微生物学PBL教学课程设计和实施的思考

介绍澳大利亚墨尔本大学医学本科感染与免疫PBL课程的教学情况和国内某医学院医学微生物学教学现状,探讨如何开展医学微生物学的PBL教学。     

阿莫西林诱导L型形成对幽门螺杆菌感染治疗效果的影响

目的 探讨不规范使用抗生素导致幽门螺杆菌(Hp)形成L型与感染复发的关系.方法 以阿莫西林诱导Hp形成细胞壁缺陷型(即L型),以液体稀释法检测Hp及L型阿莫西林敏感性;以Hp灌胃感染小鼠,分别以生理盐水、常规或低于常规剂量阿莫西林或配伍克拉霉素治疗6d,20d后取胃组织行Hp及L型分离培养、16 SrDNA片段PCR和病理学检查.结果 阿莫西林对Hp和L型的MIC分别为0.0625和0.125μg/mL;单一阿莫西林治疗和感染对照小鼠胃粘膜L型分离、PCR均阳性,病理学检查呈慢性炎症表现;低剂量治疗和感染对照组均分离出Hp;配伍、盐水对照及空白组各项检测均阴性.结论 不规范使用抗生素使Hp发生L型变异,L型生长或返祖可能是导致感染复发的重要原因.     

猕猴肝脏实验感染猪囊尾蚴的观察

目的了解猪囊虫病猕猴的肝功能、肝脏声像图及病理变化特征。方法用猪带绦虫虫卵经喂食感染健康猕猴,于感染第84d进行猕猴肝脏B超检查和血清部分肝功能指标的全自动生化分析仪检测、透明质酸的放射免疫法检测以及猪囊尾蚴IgG的ELISA检测。于感染第90d,经麻醉致猕猴死亡,剖检各组织器官,取肝脏进行常规组织病理学检查。结果猕猴经人工感染猪带绦虫幼虫84d后,体重较感染前减轻2.4kg,肝脏B超检查见边界较清楚、不均匀的低回声或混合性回声的结节样病灶;血清总胆汁酸盐为感染前的4.5倍,透明质酸为感染前的1.9倍,胆碱酯酶较感染前降低25%;肝组织活检见11个结节,结节内未见虫体,但病灶内可见嗜酸性粒细胞浸润,周围纤维结缔组织增生,可见肝细胞脂肪变性和坏死;血清猪囊尾蚴IgG阳性。结论猪囊尾蚴除可引起灵长类的肌肉和脑囊虫病,还可寄生在肝脏并引起寄生部位肝组织的损伤,血清学检查和肝脏B超有助于诊断肝脏囊虫病。