Canavalia gladiata种子的伴刀豆球蛋白的纯化

伴刀豆球蛋白(Concanavalin A,简称Con A)是不含糖的凝集素,也是一种强有力的促有丝分裂原。由于Con A的许多特性,故已被广泛应用于免疫学、细胞遗传学、纯化某些糖蛋白,以及作为细胞膜的“探针”等的研究工具。     

重组人白介素2腺病毒对腹水癌的治疗作用

为鉴定已构建的重组hIL 2腺病毒 (AdvIL 2 )活性 ,在体外转导人多种癌细胞系 ,以及观察重组病毒对小鼠腹水癌的治疗作用。方法 :通过ELISA法测定所表达hIL 2的量 ,MTT法测定所表达IL 2的活性。从注射后 2 4h后 ,每日称量试验小鼠的体重 ,并观察小鼠的存活情况。结果 :发现AdvIL 2在体外能高效转导多种癌细胞 ,并检测到有 10ng水平hIL 2表达 ,持续时间为 3周左右。腹腔注射治疗小鼠腹水癌 (MathA) ,总剂量为 5× 10 8PFU ,注射AdvIL 2组小鼠腹水增加明显低于对照组 :重组荧光酶腺病毒 (AdvLuc)、培养基 ,在观察结束时 ,试验小鼠的平均体重分别为 :2 6 .5g ,39g和 36 .5g。在注射后第 30天时观察存活率 ,AdvIL 2注射组存活率达 6 2 .5 % ,而AdvLuc对照组在 30d时存活率仅为 2 5 % ,培养基注射组动物则在第 2 5天时全部死亡。结论 :表明AdvIL 2用于腹水癌的治疗效果良好 ,具有较好前景.     

重组人白介素2腺病毒对腺水癌的治疗作用

目的：为鉴定已构建的重组ｈＩＬ－２腺病毒（ＡｄｖＩＬ－２）活性,在体外转导人多种癌细胞系,以及观察重组病毒对小鼠腹水癌的治疗作用。方法：通过ＥＬＩＳＡ法测定所表达ｈＩＬ－２的量,ＭＴＴ法测定所表达ＩＬ－２的活性。从注射后２４ｈ后,每日称量试验小鼠的体重,并观察小鼠的存活情况。结果：发现ＡｄｖＩＬ－２在体外能高效转导多种癌细胞,并检测到有１０ｎｇ水平ｈＩＬ－２表达,持续时间为３周左右。腹腔注射治疗小     

雪山豆(Phaseolus sp·)凝集素的纯化与其部分性质

取生长于四川高山区(1500米以上)的雪山豆(Phaseolus SP.)种子,经磨粉,生理盐水浸泡,取硫酸铵30—65％饱和度之沉淀,透析去盐,用pH7.2、0.015M磷酸盐缓冲液(含0.2M NaCl)平衡透析,通过Sephadex G-150凝胶过滤,可分出具有对兔红细胞凝集和促有丝分裂活性的组分。此组分经聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳,在碱性(Tris—EDTANa_2—硼酸液,pH9.0或酸性(0.35M甘氨酸/醋酸液)系统中均为单一蛋白带,糖蛋白染色法,证实为糖蛋白。     

腺病毒介导人IL-2基因治疗的抗肿瘤作用及机理分析

目的　观察重组人白介素 2腺病毒 (advh IL- 2 )在小鼠肝癌 H2 2中的转染效率、表达时程、体内抗肿瘤作用及其免疫机理。方法　小鼠皮下接种肝癌 H2 2 ,将肿瘤生长至体积为 10 0～ 2 0 0 mm3的荷瘤小鼠随机分组 ,经肿瘤局部注射给药。用 X- gal染色法检测重组腺病毒载体 adv L ac Z的转染效率 ;用 RT- PCR检测人 IL- 2基因的持续表达时间 ;以 H2 2瘤体生长及荷瘤小鼠存活时间评价 advh IL - 2抗肿瘤作用 ;以 51 Cr 4小时释放法测定治疗小鼠脾细胞的 L AK与 CTL 杀伤活性 ,免疫荧光法分析肿瘤组织内 CD4 +与 CD8+ T细胞浸润情况。结果　肿瘤局部单次注射 1× 10 9pfu重组腺病毒 ,可在肿瘤组织中进行有效的转染及表达 ,人 IL- 2基因的表达时间长于 12 d。AdvhIL- 2的抗肿瘤作用具有剂量依赖性 ,与 PBS组比较 ,2× 10 9pfu advh IL- 2可非常明显地抑制 H2 2皮下瘤的生长、延长荷瘤小鼠的生存时间 (P<0 .0 1) ,同时明显增强脾细胞 L AK与 CTL杀伤活性 (P<0 .0 1) ,增加肿瘤组织内CD4 + 与 CD8+ T细胞的浸润。结论　 Advh IL - 2通过介导人 IL - 2基因在小鼠 H 2 2肿瘤组织中的持续表达 ,产生明显的体内抗肿瘤作用 ,其机理与激活荷瘤小鼠抗肿瘤免疫反应有关     

重组hIL-2腺病毒在体外癌细胞中的表达

为鉴定已构建的重组ｈＩＬ－腺病毒在体外的感染和表达活性,体外转导人多种癌细胞系,通过ＥＬＩＳＡ法测定所表达ＩＬ－２的量,ＭＴＴ法测定所表达ＩＬ－２的活性。结果发现ＡｄｖＩＬ－２能高效转导癌细胞,并检测到有１０ｎｇ水平ＩＬ－２表达,持续时间为３周左右。